BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測(cè)原理的比較。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗體，由于空間位阻，雙鏈DNA須變性后才能使BrdU抗體與BrdU結(jié)合。法使用小分子標(biāo)記的疊氮化物(Azide)，無需DNA變性，操作更便捷，兼容性好，檢測(cè)結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。本試劑盒檢測(cè)快速。相對(duì)于BrdU法，本試劑盒采用BeyoClick?EdU法檢測(cè)新合成的DNA，所需時(shí)間縮短。經(jīng)本試劑盒處理后，增殖的細(xì)胞呈棕色，可以用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀察。HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果參見圖3。圖3.HeLa細(xì)胞用本試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖的效果圖。無EdU組觀察不到棕色染色(左側(cè)一列)；EdU(10μM)孵育2小時(shí)組有明顯的棕色染色(中間一列)；而用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)提前預(yù)處理0.5小時(shí)后，棕色染色減弱，說明DNA合成被抑制后，EdU的摻入被抑制(右側(cè)一列)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的結(jié)構(gòu)如何組成？湖南口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司

可通過CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(發(fā)光法)進(jìn)行細(xì)胞群落中DNA合成測(cè)定（BrdUbased）。優(yōu)點(diǎn)是：實(shí)驗(yàn)結(jié)果同增殖細(xì)胞數(shù)目緊密相關(guān)，可一步完成細(xì)胞的溫和固定和變性，操作方便穩(wěn)定，不破壞細(xì)胞形態(tài)。5-Bromo-2′-dULabeling/DetectionKitI（熒光法）或KitII（AP）可使用試劑盒提供的BrdU單抗，以及酶或熒光偶聯(lián)二抗，檢測(cè)單細(xì)胞水平的DNA合成（BrdUbased）。前者通過免疫熒光檢測(cè)，后者通過熒光顯微鏡檢測(cè)。優(yōu)點(diǎn)是：使用核酸酶變性DNA，在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。安徽EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒購買EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)廠家。

與BrdU方法相比，EdU檢測(cè)方法無需DNA變性，無需抗原修復(fù)，無需抗原抗體反應(yīng)，更簡(jiǎn)單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確，是細(xì)胞增殖檢測(cè)的比較好選擇。更準(zhǔn)確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細(xì)胞核邊緣清晰完整；更簡(jiǎn)單--無需抗原抗體反應(yīng)，基于小分子化學(xué)反應(yīng)的檢測(cè)方法，簡(jiǎn)單高效，反應(yīng)單需要幾分鐘；更靈敏--無需抗體，檢測(cè)染料單為BrdU抗體的1/500，更容易擴(kuò)散，即使單個(gè)增殖細(xì)胞也能準(zhǔn)確檢測(cè)；更快速--無需過夜，省卻了抗原抗體反應(yīng)的復(fù)雜繁瑣步驟，完成整個(gè)檢測(cè)周期單需2.5小時(shí)；更兼容--對(duì)樣品幾乎無損傷，更容易與多種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記，能夠同時(shí)檢測(cè)細(xì)胞其他性狀特征~

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)和BrdU細(xì)胞增殖檢測(cè)的對(duì)比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性，就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析，該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對(duì)的影響，因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時(shí)，然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)（每公斤小鼠注射5mgEdU），分別于0、12、24小時(shí)之后取小鼠腸組織，制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,**下圖)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒多少錢？

細(xì)胞增殖分析是細(xì)胞生長(zhǎng)和分化研究的關(guān)鍵，在藥物開發(fā)階段常用來評(píng)估化學(xué)藥物的毒性和對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的控制作用。經(jīng)過之后的細(xì)胞分裂階段，各個(gè)子代細(xì)胞會(huì)從母細(xì)胞中接收到大約一半的熒光染料。采用流式細(xì)胞儀對(duì)熒光強(qiáng)度進(jìn)行分析，即可測(cè)定出自標(biāo)記結(jié)合起，單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群所經(jīng)歷的傳代數(shù)目。通常根據(jù)平均DNA含量或細(xì)胞代謝參數(shù)進(jìn)行細(xì)胞增殖檢測(cè)，此類分析可以報(bào)告出總細(xì)胞數(shù)目和活細(xì)胞數(shù)目，或者測(cè)定出單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的DNA合成情況。細(xì)胞增殖染料稀釋分析主要基于細(xì)胞膜通透性，熒光團(tuán)分子、染料進(jìn)入細(xì)胞后，將會(huì)共價(jià)結(jié)合到蛋白質(zhì)上的氨基基團(tuán)上，從而使染料能夠長(zhǎng)時(shí)間停留在細(xì)胞中。你知道EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)嗎？江蘇如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家

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EdU檢測(cè)法中的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標(biāo)記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細(xì)胞DNA中的EdU，在銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，終使細(xì)胞DNA標(biāo)記上生物素等探針。本試劑盒反應(yīng)簡(jiǎn)單、檢測(cè)靈敏度高。本試劑盒基于簡(jiǎn)單高效的點(diǎn)擊反應(yīng)，無需DNA變性，只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標(biāo)記出摻入的EdU，并且可以檢測(cè)到單個(gè)細(xì)胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過點(diǎn)擊反應(yīng)，新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記，從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測(cè)設(shè)備檢測(cè)到增殖的細(xì)胞。湖南口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司