EdU細(xì)胞增殖檢測和BrdU細(xì)胞增殖檢測的對比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性，就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測分析，該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對的影響，因此客戶了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時，然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測細(xì)胞增殖活性，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)（每公斤小鼠注射5mgEdU），分別于0、12、24小時之后取小鼠腸組織，制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,**下圖)檢測細(xì)胞的增殖情況，使用DAPI進(jìn)行復(fù)染（藍(lán)色）。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些？上海哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家

EdU-488細(xì)胞增殖檢測試劑盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488)，是一種利用核苷滲入法對細(xì)胞增殖情況進(jìn)行快速、簡單、高靈敏檢測的試劑盒。其原理為：試劑盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一種胸苷(T)類似物，EdU可以在在細(xì)胞周期的S期中替代胸苷摻入到新合成的DNA中；另一方面，EdU上的乙炔基能與疊氮化物(如熒光探針AlexaFluor488Azide)通過Cu+的催化發(fā)生共價反應(yīng)，形成穩(wěn)定的三唑環(huán)，該反應(yīng)非常迅速，被稱作點擊反應(yīng)(Clickreaction)(圖1)。通過點擊反應(yīng)，新合成的DNA會被綠色熒光標(biāo)記，然后通過檢測熒光信號實現(xiàn)細(xì)胞增殖的檢測。江蘇哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒價格EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時要考慮什么問題？

    具有保密性的材料除外）。2、目的蛋白相應(yīng)一抗：請您提供質(zhì)量保證的一抗（或委托我公司準(zhǔn)備）。抗體的使用量通過預(yù)實驗后進(jìn)行確認(rèn)，原則上不回收使用一抗。3、陽性對照樣品（盡量提供）。4、相關(guān)文獻(xiàn)（可選）。注：若要檢測磷酸化蛋白，請在2-3個月內(nèi)進(jìn)行，因為長時間保存的樣品容易使磷酸化蛋白去磷酸化而檢測不到磷酸化條帶。五、提交給客戶結(jié)果1、預(yù)實驗顯色結(jié)果（TIFF格式、JPEG格式或PNG格式），預(yù)實驗采取3個一抗稀釋度，選取部分實驗樣本。2、正式實驗顯色結(jié)果（TIFF格式、JPEG格式或PNG格式）。3、完整實驗報告。六、服務(wù)項目說明1、提供的蛋白量與待檢測的目的蛋白數(shù)量有關(guān)，蛋白數(shù)量增加相應(yīng)的樣品量也要增加。2、每張膜樣品數(shù)量為1-8個，不足8個以8個收取。9-16個樣品為2張膜，17-24個樣品為3張膜；以此類推。舉例：7個樣品，1個目的蛋白，算1張膜；有9個樣品，1個目的蛋白，算2張膜；7個樣品，2個目的蛋白，算2張膜，有9個樣品，2個目的蛋白，算4張膜。注：以上為一般算法。如果客戶樣品數(shù)量需要按照組別等來進(jìn)行上樣時，需要重新確定每張膜的上樣量及膜的張數(shù)。3、選擇部分樣品進(jìn)行預(yù)實驗，參考目的蛋白一抗說明書進(jìn)行3個稀釋度的預(yù)實驗。

本試劑盒可以檢測到細(xì)胞或組織樣品中單個的增殖細(xì)胞，同時也可以對細(xì)胞或組織樣品總體的細(xì)胞增殖情況進(jìn)行定量檢測。本試劑盒可以檢測培養(yǎng)的細(xì)胞或組織樣品，也可以檢測組織切片，但均需提前進(jìn)行EdU的摻入。細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法，如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒給社會帶來了什么好處？

以及酶或熒光偶聯(lián)二抗，檢測單細(xì)胞水平的DNA合成（BrdUbased）。前者通過免疫熒光檢測，后者通過熒光顯微鏡檢測。優(yōu)點是：使用核酸酶變性DNA，在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。體內(nèi)外均可進(jìn)行標(biāo)記，且可同時使用其他標(biāo)記進(jìn)行檢測，操作安全簡便。適用于貼壁或懸浮細(xì)胞，冰凍或福爾馬林包埋組織切片。EdU與BrdU檢測法不同，EdU-Click檢測，如EdU-Click594（BCK-EDU594）無需進(jìn)行DNA變性來檢測摻入的EdU，而是通過一次快速、高度特異性的點擊反應(yīng)，將EdU高效地?fù)饺氲叫潞铣傻腄NA之中,通過EdU與不同熒光染料的特異性反應(yīng)檢測DNA復(fù)制活性，從而確地反映細(xì)胞的增殖情況。這一類細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點擊實驗方案，準(zhǔn)確且兼容各種抗體實驗方案，整個實驗可在30分鐘內(nèi)完成，在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面，堪比多重分析方法。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好？上海東寰告訴您！上海品牌EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢

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EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液；(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解，即為可用的緩沖添加劑的濃度，建議現(xiàn)用現(xiàn)配；注：緩沖添加劑為白色粉末，較難準(zhǔn)確稱量，稱量范圍可稍微放寬，但是不應(yīng)超過±20%，且該粉末較易氧化，使用后請旋緊管蓋，如試劑出現(xiàn)棕黃色，則需報廢或更換。(c)按照以下的表格進(jìn)行染色反應(yīng)液的配制：該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。上海哪一家EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家