細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒怎樣使用？上海東寰告訴您。福建EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn)，操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性浙江正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用方式。

使用本試劑盒所做結(jié)果可以用熒光顯微鏡、激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀或熒光酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測，也可以用于高內(nèi)涵篩選(High-ContentScreening,HCS)。對6孔板培養(yǎng)的細(xì)胞（每孔500μl的Click反應(yīng)液）、96孔板培養(yǎng)的細(xì)胞（每孔50μl的Click反應(yīng)液）、每管細(xì)胞數(shù)量為10-100萬的流式細(xì)胞儀檢測（每管500μl的Click反應(yīng)液）以及冰凍或石蠟切片的檢測（每個樣品100-200μl的Click反應(yīng)液），不同規(guī)格的本產(chǎn)品可以提供的反應(yīng)的量詳見說明書中的表。光譜特性：488-Azide：綠色熒光，Ex/Em=491/518nm；Hoechst33342：藍(lán)色熒光，Ex/Em=346/460nm,boundtoDNA。

EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要劇烈的DNA變性操作，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn)，更適合結(jié)合其他染料或蛋白標(biāo)記（如P65抗體）等進(jìn)行多重標(biāo)記，從而在細(xì)胞水平獲取更多的直觀多維特征信息，更適合深入開展細(xì)胞功能方面的研究。該方法無需DNA變性，無需抗原修復(fù)，無需抗原抗體反應(yīng)，簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確，適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測，尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn)，如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些？

與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法用量小得多，十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果，而且小分子化學(xué)反應(yīng)檢測方法反應(yīng)快，效率高，反應(yīng)時間需幾分鐘，不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育，能夠更好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)，更簡單、更靈敏、更快速、更準(zhǔn)確。EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物，分子量很小，在動物體內(nèi)能夠迅速擴(kuò)散到各種組織和中，并滲入正在復(fù)制的DNA分子，通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應(yīng)即可簡單、快速、準(zhǔn)確地檢測出細(xì)胞增殖情況。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒使用時的注意事項(xiàng)。江西口碑好的EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好

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試劑盒以外自備試劑和儀器：●PBS●純水●1%乙酸●移液器及吸頭●有515nm波長的酶標(biāo)儀使用方法：使用注意事項(xiàng)：●接種時注意細(xì)胞懸液一定要混勻，以避免細(xì)胞沉淀下來，導(dǎo)致每孔中的細(xì)胞數(shù)量不等，可以每接種幾個孔就混勻一下。培養(yǎng)板周圍一圈孔培養(yǎng)基容易揮發(fā)，為了減少誤差，建議培養(yǎng)板的四邊每孔只加培養(yǎng)基，而不作為指標(biāo)檢測孔?！衽囵B(yǎng)時間根據(jù)細(xì)胞種類的不同和每孔內(nèi)細(xì)胞數(shù)量的多少而異。●用水或乙酸洗細(xì)胞時充滿孔后保持一會倒掉即可，也可以用排或洗板機(jī)?！馩D值在1-2之間較好。以96孔板為例：1．取出培養(yǎng)好待測的96孔板。2．在培養(yǎng)基表面小心加入50μl固定液(懸浮細(xì)胞加100μl固定液)，靜置5分鐘后放入4℃冰箱30分鐘-1小時。(貼壁細(xì)胞可棄培養(yǎng)基后加入用水3倍稀釋的固定液；懸浮細(xì)胞必須直接加入固定液，輕加在培養(yǎng)液面，靜置5分鐘后再將平板移至4℃放置1小時，可使懸浮細(xì)胞固定在培養(yǎng)孔底部)。福建EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好