EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標(biāo)記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction),其反應(yīng)原理參見圖1。通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的生物素探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臋z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒運(yùn)用再哪些領(lǐng)域?河南哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買
可通過CellProliferationELISA,BrdU(比色法.)或CellProliferationELISA,BrdU(發(fā)光法)進(jìn)行細(xì)胞群落中DNA合成測定(BrdUbased)。優(yōu)點(diǎn)是:實(shí)驗(yàn)結(jié)果同增殖細(xì)胞數(shù)目緊密相關(guān),可一步完成細(xì)胞的溫和固定和變性,操作方便穩(wěn)定,不破壞細(xì)胞形態(tài)。5-Bromo-2′-dULabeling/DetectionKitI(熒光法)或KitII(AP)可使用試劑盒提供的BrdU單抗,以及酶或熒光偶聯(lián)二抗,檢測單細(xì)胞水平的DNA合成(BrdUbased)。前者通過免疫熒光檢測,后者通過熒光顯微鏡檢測。優(yōu)點(diǎn)是:使用核酸酶變性DNA,在不傷害細(xì)胞完整性的情況下使抗體結(jié)合BrdU。河北EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買上海東寰與您分享EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。
EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。EdU染色(a)通過用10:1去離子水稀釋10x反應(yīng)緩沖液進(jìn)行配制1xEdU反應(yīng)緩沖液;(b)按照溶解200mg緩沖添加劑溶于1ml去離子水的比例稱取適量的粉末進(jìn)行溶解,即為可用的緩沖添加劑的濃度,建議現(xiàn)用現(xiàn)配;注:緩沖添加劑為白色粉末,較難準(zhǔn)確稱量,稱量范圍可稍微放寬,但是不應(yīng)超過±20%,且該粉末較易氧化,使用后請旋緊管蓋,如試劑出現(xiàn)棕黃色,則需報(bào)廢或更換。
EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈。通過以上原理圖的對比,大家不難發(fā)現(xiàn),EdU法檢測細(xì)胞增殖,無須抗體,無變性步驟,保持細(xì)胞形態(tài)和DNA完整性,是一種簡單,可靠,省事的創(chuàng)新方法。但是,現(xiàn)在依然有很多研究者們依然沒有得到細(xì)胞增殖檢測*行之有效,節(jié)約反應(yīng)時(shí)間的方法。Abbkine的EdU檢測試劑盒有兩個(gè)型號,分別匹配的是兩種不同的熒光通道,細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(綠色熒光),KTA2030,488通道;細(xì)胞增殖成像分析試劑盒(EdU法)(橘紅色熒光),KTA2031,549通道。使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒能給人們帶來便利嗎?
細(xì)胞增殖雖然與多種因素有關(guān),比如細(xì)胞代謝活性、與細(xì)胞增殖相關(guān)的蛋白表達(dá)、ATP的濃度等等,但是檢測細(xì)胞增殖現(xiàn)象的直接準(zhǔn)確的方法就是用熒光探針直接檢測遺傳物質(zhì)DNA的合成,這種方法是研究細(xì)胞增殖、信號通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。與傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法相比,EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實(shí)情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好?湖北EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒廠家
有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒?河南哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買
EdU細(xì)胞增殖方法簡單,方便,無需DNA變性,能夠與各種抗體或熒光蛋白同時(shí)標(biāo)記,以檢測細(xì)胞其他性狀特征。該方法無需DNA變性,無需抗原修復(fù),無需抗原抗體反應(yīng),簡單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測,尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn),如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU方法無需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術(shù),在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細(xì)胞增殖檢測方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點(diǎn)河南哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒購買