細胞增殖是評價細胞活性、代謝、生理和病理狀況的重要指標。EdU細胞增殖檢測方法通過檢測滲入DNA復制期間的EdU，借助熒光檢測工具即可準確地檢測出新增殖的細胞，快速統(tǒng)計處于S期的細胞百分數(shù)，分析細胞增殖情況。該方法簡單、靈敏、快速、準確，適合各種細胞系的細胞增殖檢測，尤其適用于高通量篩選試驗，如在藥物篩選中檢測加藥后細胞增殖變化。EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復制的DNA分子中，通過基于EdU與Apollo®熒光染料的特異性反應快速檢測細胞DNA復制活性，適用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA修復、病毒復制、細胞標記示蹤等方面的研究，尤其適合進行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實驗。EdU細胞增殖檢測試劑盒的功能具體介紹。福建如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透，就可以使疊氮化物探針有效進入細胞并發(fā)生點擊反應，不會影響細胞形態(tài)，不會影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測，也不會影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測細胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測細胞核)。而BrdU法為了使大分子的BrdU抗體進入細胞并與DNA上的BrdU結(jié)合，需要對雙鏈DNA進行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等)，這種變性可能會影響細胞形態(tài)，影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測原理的比較參見圖2。湖南品質(zhì)好的EdU細胞增殖檢測試劑盒廠家EdU細胞增殖檢測試劑盒的特點是什么？上海東寰告訴您。

EdU細胞增殖檢測試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應，把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性，廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測方法需要DNA變性、抗原修復、抗原抗體過夜孵育等復雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性，只需溫和的細胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點，操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散，無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應，能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復制活性。

EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物，分子量很小，在動物體內(nèi)能夠迅速擴散到各種組織和中，并滲入正在復制的DNA分子，通過基于Apollo®熒光染料與EdU的特異性反應即可簡單、快速、準確地檢測出細胞增殖情況。與BrdU檢測方法相比，EdU檢測方法用量小得多，十分之一的用量即可獲得與BrdU檢測試劑盒相同甚至更好的檢測結(jié)果，而且小分子化學反應檢測方法反應快，效率高，反應時間需幾分鐘，不需要DNA變性、蛋白酶處理、抗原抗體過夜孵育，能夠更好地保護細胞形態(tài)，更簡單、更靈敏、更快速、更準確。EdU細胞增殖檢測試劑盒的重要組成部分。

Jurkat細胞只用EdU標記(左列)，或在標記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時后染色，然后通過流式細胞儀進行檢測。從流式結(jié)果圖中可以看出，EdU標記的細胞有較高比例的綠色熒光陽性細胞，呈現(xiàn)綠色熒光陰性(弱染色)和陽性(強染色)的兩個峰，分別對應于未增殖細胞和增殖細胞。經(jīng)過Hydroxyurea處理的細胞，綠色熒光陽性的細胞幾乎完全消失，剩下一個綠色熒光陰性的峰。Hela細胞只用EdU標記(左列)，或在標記EdU0min用10mM的DNA合成抑制劑羥基脲(Hydroxyurea)處理(右列)，2小時后染色（步驟染Hoechst，方便觀察增殖細胞比例），然后通過熒光顯微鏡進行檢測。鏡下可見，*EdU標記的細胞有一部分染上綠色熒光的增殖細胞，未增殖細胞的細胞核呈藍色單染。EdU細胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。福建如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

EdU細胞增殖檢測試劑盒的原理是什么？上海東寰告訴您。福建如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒公司

更準確--無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免變性帶來的樣品損傷，確保細胞核邊緣清晰完整；更簡單--無需抗原抗體反應，基于小分子化學反應的檢測方法，簡單高效，反應單需要幾分鐘；更靈敏--無需抗體，檢測染料單為BrdU抗體的1/500，更容易擴散，即使單個增殖細胞也能準確檢測；更快速--無需過夜，省卻了抗原抗體反應的復雜繁瑣步驟，完成整個檢測周期單需2.5小時；更兼容--對樣品幾乎無損傷，更容易與多種抗體或熒光蛋白同時標記，能夠同時檢測細胞其他性狀特征。rdU需要DNA變性后才能與抗體結(jié)合，導致BrdU、Hoechst染色彌散，邊緣模糊不清；而EdU邊緣清晰完整，檢測更靈敏、更準確福建如何使用EdU細胞增殖檢測試劑盒公司