EdU(5-ethynyl-2'-deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2'-脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與生物素標記的疊氮化物(Biotinlabeledazide)通過一價銅離子的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應非常迅速,被稱作點擊反應(Clickreaction),其反應原理參見圖1。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當?shù)臋z測設備檢測到增殖的細胞。上海東寰告訴您使用EdU細胞增殖檢測試劑盒的便捷性。湖南EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書
EdU檢測法中的點擊反應(Clickreaction)原理圖。生物素或熒光探針等標記的疊氮化物(LabeledAzide)與摻入到細胞DNA中的EdU,在銅離子的催化發(fā)生共價反應,形成穩(wěn)定的三唑環(huán),終使細胞DNA標記上生物素等探針。本試劑盒反應簡單、檢測靈敏度高。本試劑盒基于簡單高效的點擊反應,無需DNA變性,只需少量的小分子疊氮化物探針即可非常有效地標記出摻入的EdU,并且可以檢測到單個細胞的增殖情況。本試劑盒使用便捷、兼容性好。通過點擊反應,新合成的DNA會被相應的生物素探針所標記,從而可以使用適當?shù)臋z測設備檢測到增殖的細胞。河南哪家公司提供EdU細胞增殖檢測試劑盒供應商EdU細胞增殖檢測試劑盒,有哪些好處值得選擇?
目前,基于DNA的合成原理,人們*初開發(fā)了工具是BrdU染色法,但是這種方法操作耗時長,往往需要過夜處理細胞,操作繁雜,比如需要DNA變性、抗原修復以及抗原抗體反應等操作,后來在BrdU的基礎上,人們開發(fā)出了**性的探針--EdU,這種方法不需要繁雜的操作,節(jié)約時間,且反應更靈敏和準確。并且與MTT/WST-1或者CCK-8這種依靠化學顯色法只能得到一個折線圖的方法相比,EdU細胞增殖檢測法可以得到高清細胞增殖現(xiàn)象數(shù)據(jù)圖,可視化展示數(shù)據(jù)、更直觀、更具視覺效果!細胞增殖的能力是評價細胞、代謝、生理、病理狀況、細胞活性、基因毒性等的重要指標之一
該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。能夠在細胞增殖時期代替胸腺嘧啶(T)摻入正在復制的DNA分子中,通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應,把熒光集團標記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進行高效快速的檢測出DNA復制活性,廣泛應用于細胞增殖、細胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復等方面的研究。使用EdU細胞增殖檢測試劑盒的好處有哪些?
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細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液,室溫培養(yǎng)30分鐘,棄固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,搖床孵育5分鐘,以中和過量的多聚甲醛;(c)棄甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液,室溫通透10分鐘,棄細胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室溫清洗5分鐘;該產品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測,適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理,固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應用于流式細胞儀檢測。湖南EdU細胞增殖檢測試劑盒說明書
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