即為本發(fā)明構(gòu)建的一種pirb基因敲入的小鼠動物模型。本發(fā)明所采用第二種技術(shù)方案的特點還在于,步驟1中得到grna1和grna2后分別與trancrrna在25℃孵育10min形成二級結(jié)構(gòu)。步驟3中g(shù)rna1、grna2的濃度均為2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射濃度為30~100ng/μl。步驟4中southern雜交采用bamhi和avrii核酸內(nèi)切酶切割f1代雜合子小鼠的dna。本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明提供了pirb基因敲入的小鼠動物模型及其構(gòu)建方法,本發(fā)明的小鼠動物模型對于pirb基因功能的研究和在體驗證提供了良好的基礎。分離自pirb基因敲入小鼠的細胞還可以用于研究pirb發(fā)揮調(diào)節(jié)作用的下游機制。通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交,可以用于研究ad不同***或不同細胞類型pirb的調(diào)節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質(zhì)粒載體的構(gòu)建圖;圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構(gòu)建方法的流程圖;圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結(jié)果鑒定電泳圖;圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗證pirb基因敲入效果的測序峰圖;圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的方法示意圖;圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的結(jié)果圖。上海東寰為您提供完善的裸鼠動物疾病模型。大鼠疾病動物模型建模說明書
設計了一套能夠特異性標記“穆勒膠質(zhì)細胞”的系統(tǒng),再將能誘導神經(jīng)細胞形成的基因編輯系統(tǒng),包裝成“病毒”,注射到小鼠的視網(wǎng)膜。約1個月后,研究人員在小鼠的視網(wǎng)膜視神經(jīng)節(jié)細胞層,發(fā)現(xiàn)了由穆勒膠質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化而來的視神經(jīng)節(jié)細胞。這些誘導而來的視神經(jīng)節(jié)細胞,不僅可以對光刺激產(chǎn)生相應的電信號,還可以和大腦中正確的腦區(qū)建立功能性聯(lián)系,將視覺信號傳輸?shù)酱竽X,成功恢復視覺功能。進一步的研究還表明,通過這一基因編輯技術(shù),還能將小鼠模型中特定區(qū)域的“星形膠質(zhì)細胞”非常高效地轉(zhuǎn)分化為多巴胺神經(jīng)元。轉(zhuǎn)分化而來的多巴胺神經(jīng)元,能將帕金森模型小鼠的運動障礙,逆轉(zhuǎn)到接近正常小鼠的水平。這項研究的負責人楊輝指出,盡管將膠質(zhì)細胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元的基因編輯技術(shù)在實驗室里取得重要進展,但要將研究成果真正應用于人類疾病的***,還有很多工作要做。人類的視神經(jīng)節(jié)細胞能否再生?帕金森患者是否能通過該方法被***?研究人員今后將從小鼠模型轉(zhuǎn)到靈長類模型,進一步深入研究。寶山區(qū)疾病動物模型建模哪家好動物疾病模型的另一個富有成效的用途。
1、動物模型名稱:環(huán)磷酰胺致白細胞減少癥小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級,1、實驗方法:環(huán)磷酰胺誘導。小鼠按30mg/kg體重劑量腹腔注射環(huán)磷酰胺,連續(xù)注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日,以及停止注射第2、5、8、11、15日時分別**作外周血象檢測,觀察外周血白細胞總數(shù)。***1次檢測觀察后麻醉處死小鼠,取其股骨,用Hanks液沖洗骨髓細胞,顯微鏡下觀察骨髓有核細胞數(shù)。2、檢測標準:模型組小鼠的外周血白細胞總數(shù)明顯降低,鏡下觀察模型組小鼠的骨髓有核細胞數(shù)較正常對照組小鼠明顯降低。
卵巢早衰(pof)是指女性40歲前以閉經(jīng)、不育、雌***缺乏及促性腺***水平升高為特征的一種疾病。一般人群中發(fā)病率為1%~3%,在繼發(fā)性閉經(jīng)婦女中占4%~8%,在20歲以前的發(fā)病率為%。近年來pof在育齡婦女中的發(fā)生率有逐年升高且向年輕化發(fā)展的趨勢,由于卵巢早衰患者卵巢分泌的雌***量減少,即可導致一些其他疾病,如骨質(zhì)疏松、泌尿生殖道萎縮、脂質(zhì)代謝紊亂、心血管疾病。順鉑又稱順氯氨鉑、氯氨鉑、ddp、錫鉑,是目前常用的金屬鉑類絡合物,在分子中鉑原子對其抗**作用有重要意義。但只有順式才有意義,反式無效。其可與dna鏈交叉連接,顯示出細胞毒作用。溶解后在體內(nèi)無需載體轉(zhuǎn)運,即可通過帶電的細胞膜。由于細胞內(nèi)氯離子濃度低(4mmol/l),氯離子為水所取代,電荷呈陽性,具有類似烷化劑雙功能基團的作用,可與細胞核內(nèi)dna的堿基結(jié)合,形成三種形式的交聯(lián),造成dna損傷,破壞dna復制和轉(zhuǎn)錄,高濃度時也抑制rna及蛋白質(zhì)的合成。順鉑具有抗*譜廣、乏氧細胞有效、作用性強等優(yōu)點,已普遍用于***睪丸*、卵巢*、子宮*、膀胱*、頸部*、前列腺*、腦*等,療效***。但順鉑用于****有一定的毒性,會引起副作用,與卵巢的損害有直接關系,有研究表明順鉑可誘導卵巢細胞凋亡。避免了在人身上進行實驗所帶來的風險。
1、動物模型名稱:固定制動致制動應激大鼠模型2、實驗動物種屬:SD大鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:成年5、實驗動物體重:180~220g6、實驗動物環(huán)境:SPF級 。1、實驗方法:采用固定制動方法。大鼠每天固定5~6小時進行制動應激,連續(xù)制動40天。2、檢測標準:模型組大鼠體重增長速度較正常對照緩慢;曠場試驗的結(jié)果顯示,造模結(jié)束時與正常對照組比較,模型組大鼠的水平穿越格數(shù)、垂直運動次數(shù)、理毛時間均減少,**格停留時間、糞便粒數(shù)均增加;ELISA的結(jié)果顯示,造模結(jié)束時與正常對照組比較,模型組大鼠CRH、ACTH、CORT含量均明顯增高。動物疾病模型廣泛應用于新藥靶點發(fā)現(xiàn)及篩選。成瘤疾病動物模型建模價格
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腰椎間盤突出是造成全球大部分地區(qū)工作缺失和活動受限的主要疾病,隨著日常生活節(jié)奏的不斷加快,腰椎間盤突出癥已經(jīng)成為臨床脊柱外科的常見病和多發(fā)病,而且發(fā)病人群越來越呈現(xiàn)年輕化及普遍化的趨勢。該病主要是由于腰椎長期的受力不均或突然性外傷,導致腰椎纖維環(huán)出現(xiàn)變形、破裂,纖維環(huán)、髓核及軟骨終板單獨或同時外突,從而壓迫到坐骨神經(jīng)、神經(jīng)根或馬尾神經(jīng),患者出現(xiàn)腰部疼痛,牽連股部,下肢足部放射性疼痛,引起神經(jīng)功能、運動功能障礙,特定身體部位出現(xiàn)麻痹或癱瘓癥狀。良好的腰椎間盤突出動物模型的建立,可以生動直觀的幫助醫(yī)療工作者理解腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)后,神經(jīng)的病理生理變化以及疾病的發(fā)***展規(guī)律,并可以通過成熟的動物模型,探索有效的***方法。近年來,隨著對腰椎間盤突出癥的認識研究的不斷深化,人們希望通過建立一種可靠、有效的腰椎間盤突出的動物模型,通過施加干預因素,更加準確地觀察模型體內(nèi)產(chǎn)生的變化,探究人體內(nèi)疾病發(fā)生機理,并將研究成果推廣到臨床,為***腰椎間盤突出癥提供合理、有效的防治手段。因此。大鼠疾病動物模型建模說明書
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