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徐匯區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模

來源: 發(fā)布時(shí)間:2021-10-11

球囊拉傷致高脂血癥動(dòng)脈硬化兔模型,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:新西蘭兔,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級 1、實(shí)驗(yàn)方法:用球囊拉傷誘導(dǎo)法。采用3%戊巴比妥鈉耳緣靜脈注射麻醉,經(jīng)右股淺動(dòng)脈,將3.5F球囊擴(kuò)張導(dǎo)管插至腹主動(dòng)脈20cm,球囊充液膨脹至2個(gè)大氣壓緩慢拉出,反復(fù)3次。球囊拉傷手術(shù)后,動(dòng)物喂以高脂飼料,連續(xù)9周,每天給料兩次,自由飲水。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取腹主動(dòng)脈斑塊進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):腹主動(dòng)脈斑塊病理鏡下可見腹主***程度的改變。動(dòng)物疾病模型廣泛應(yīng)用于疾病機(jī)制研究。徐匯區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模

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    該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟實(shí)施:步驟1、基于crispr/cas9技術(shù)構(gòu)建針對c57bl/6j小鼠rosa26基因的特異性grna1和grna2,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如;步驟2、構(gòu)建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶載體,將打靶載體進(jìn)行線性化處理;步驟3、步驟2中將含有l(wèi)oxp位點(diǎn)打靶載體、步驟1中有活性的grna1和grna2與cas9蛋白共同注射進(jìn)入**小鼠受精卵中,獲得f0代小鼠;步驟4、將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過pcr、測序和southern雜交確定動(dòng)物基因型;步驟5、將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。泰州肺病疾病動(dòng)物模型建模動(dòng)物模型的優(yōu)越性主要表現(xiàn)在以下幾下方面!

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    技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明屬于遺傳學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,還涉及上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。背景技術(shù):鼠源成對免疫球蛋白樣受體b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb,pirb),是人類免疫球蛋白樣受體b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2,lilrb2)的同源基因,pirb基因(ncbireferencesequence:)位于小鼠的7號染色體近端,總大小為,編碼841個(gè)氨基酸,目前鑒定出15個(gè)外顯子,外顯子1起始密碼為atg,外顯子15的終止密碼子是tga(轉(zhuǎn)錄本:)。pirb蛋白屬于i型跨膜糖蛋白,包含由六個(gè)免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域(domain,d)組成(d1-d6)的胞外段,一個(gè)疏水的跨膜段,三個(gè)免疫受體酪氨酸依賴的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs,itims)和一個(gè)itims樣序列組成的胞內(nèi)段。理論上講,pirb的分子量約為92kd,但是western-blot分析中,pirb經(jīng)常位于105kd處,因?yàn)閜irb是糖蛋白。以往研究發(fā)現(xiàn),pirb在免疫系統(tǒng)和中樞調(diào)節(jié)中均發(fā)揮重要作用。在免疫系統(tǒng)中,pirb在許多造血細(xì)胞都有表達(dá),包括b細(xì)胞、肥大細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、粒細(xì)胞和樹突細(xì)胞,但是在胸腺細(xì)胞、成熟的t細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞不表達(dá)。

1、動(dòng)物模型名稱:橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:5周 5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:150g-180g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級 1、實(shí)驗(yàn)方法:橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按0.3mL/100g體重,背頸部皮下注射50%CCl4的橄欖油溶液,***注射量加倍(6mL/kg體重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水,4周后改為30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重,3次/周)。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個(gè)月。實(shí)驗(yàn)結(jié)束測量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動(dòng)脈血流量(SMABF)。處死,取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):門靜脈及腸系膜上動(dòng)脈血流量情況與正常對照組比較均增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。可以簡化實(shí)驗(yàn)操作和樣品收集。

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1、動(dòng)物模型名稱:酒精誘導(dǎo)的肝硬化大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:150g-160g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級。1、實(shí)驗(yàn)方法:用酒精誘導(dǎo)法。大鼠每天按10mL/kg體重灌服酒精混合物(酒精:吡唑:玉米油=10mL:25mg:2mL)造模,每周2次按0.3mL/kg劑量腹腔注射給予CCl4:橄欖油=1:3,連續(xù)灌服60天。解剖取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):肝組織可見肝硬化病理改變(S1級~S4級)。大鼠疾病建模請找上海東寰。連云港皮膚疾病動(dòng)物模型建模

利用動(dòng)物疾病模型來研究人類疾病可以克服平時(shí)一些不易見到不便于在病人身上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的人類疾病的研究。徐匯區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模

1、動(dòng)物模型名稱:FSH聯(lián)合HCG致超排懷孕小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:3~4周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:16~18g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級 1、實(shí)驗(yàn)方法:注射用重組人促卵泡***(FSH)聯(lián)合注射絨促性素(HCG)誘導(dǎo)。對雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG當(dāng)天下午約16:00~17:00按雌雄鼠1:1合籠。次日早上檢查雌鼠陰栓情況。2、檢測標(biāo)準(zhǔn):合籠后次日雌鼠檢查出現(xiàn)陰栓,表明成功構(gòu)建了超排懷孕小鼠模型。徐匯區(qū)Balbc裸鼠疾病動(dòng)物模型建模

上海東寰生物科技有限公司主營品牌有東寰生物,發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大,該公司服務(wù)型的公司。是一家有限責(zé)任公司企業(yè),隨著市場的發(fā)展和生產(chǎn)的需求,與多家企業(yè)合作研究,在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過不斷改進(jìn),追求新型,在強(qiáng)化內(nèi)部管理,完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時(shí),良好的質(zhì)量、合理的價(jià)格、完善的服務(wù),在業(yè)界受到寬泛好評。公司業(yè)務(wù)涵蓋原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測試劑盒,動(dòng)物疾病模型,價(jià)格合理,品質(zhì)有保證,深受廣大客戶的歡迎。上海東寰生物以創(chuàng)造***產(chǎn)品及服務(wù)的理念,打造高指標(biāo)的服務(wù),引導(dǎo)行業(yè)的發(fā)展。

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