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崇明區(qū)疾病動(dòng)物模型建模原理

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2021-11-29

1、動(dòng)物模型名稱:角膜環(huán)鉆致角膜損傷兔模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:新西蘭兔3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:2~3月齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:1.8~2.5kg6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)。1、實(shí)驗(yàn)方法:角膜環(huán)鉆致兔角膜機(jī)械性損傷。耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉聯(lián)合肌肉注射速眠新Ⅱ進(jìn)行兔麻醉。環(huán)鉆前先用2%硼酸溶液沖洗雙眼,再滴0.25%氯霉素眼藥水2滴消毒,以保持結(jié)膜清潔。開(kāi)瞼,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已滅菌的6mm角膜環(huán)鉆分別在兔眼角膜上作環(huán)切,并滴入2滴氯霉素眼藥水潤(rùn)洗,用顯微眼鑷、角膜上皮鏟和精細(xì)眼剪小心去掉角膜損傷區(qū)域上皮,術(shù)畢,滴氯霉素眼藥水2滴。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):肉眼或裂隙燈下觀察到角膜有損傷。小鼠疾病模型研究也是人相關(guān)疾病藥物研發(fā)的起點(diǎn)。崇明區(qū)疾病動(dòng)物模型建模原理

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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:成年5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:160-200g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法:熱力致皮膚損傷法。麻醉大鼠,根據(jù)體重腹部備皮,然后固定于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。將大鼠移近加熱純凈水的燒杯,將紗布條浸入熱水中,待水溫恒定于99℃時(shí),取出紗布,立即平鋪于待燙部位,于紗布接觸大鼠皮膚后開(kāi)始計(jì)時(shí)。致傷3s為淺II°燙傷,致傷10s為深I(lǐng)I°燙傷。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):a.皮膚大體觀察:致傷3s大鼠局部皮膚發(fā)紅、輕微水腫。愈合后毛發(fā)生長(zhǎng)良好,有少量紅褐**素沉著,皮膚輕微攣縮,表皮光滑;致傷10s大鼠局部皮膚發(fā)白、水腫。愈合后毛發(fā)生長(zhǎng)良好,皮膚瘢痕形成,表面粗糙不平。b.皮膚組織病理學(xué)觀察:致傷3s大鼠表皮層次尚清楚,細(xì)胞明顯腫脹、變性,層次結(jié)構(gòu)尚清楚,細(xì)胞核結(jié)構(gòu)不清;致傷10s大鼠表皮細(xì)胞部分脫落,結(jié)構(gòu)不清,明顯變性、壞死,部分細(xì)胞已溶解江蘇皮膚疾病動(dòng)物模型建模模型應(yīng)適用于多數(shù)研究者使用,容易復(fù)制,實(shí)驗(yàn)中便于操作和采集各種標(biāo)本。

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    r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠,圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖,小鼠出生后20天進(jìn)行pcr鑒定,若有陽(yáng)性小鼠出生,則表示轉(zhuǎn)基因已經(jīng)整合到生殖細(xì)胞。(1)通過(guò)pcr方法對(duì)獲得的f1代小鼠進(jìn)行基因型的鑒定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來(lái)獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入離心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內(nèi)于56℃孵育過(guò)夜。步驟c.過(guò)夜后12000rpm離心2min去除雜質(zhì)。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無(wú)水乙醇,充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上,將步驟d得到的樣品加到吸附柱里,12000rpm離心2min,棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm離心1min,棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意:bufferwb需要與100%乙醇預(yù)混,沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復(fù)步驟g一次。

該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法,將步驟3中性成熟的陽(yáng)性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過(guò)pcr、測(cè)序和southern雜交確定動(dòng)物基因型;將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。必須真正了解研究者感興趣且需要的小鼠疾病模型。

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1、動(dòng)物模型名稱:放血致失血性貧血小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:KM小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:約4周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:18~22g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí) 1、實(shí)驗(yàn)方法:眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過(guò)眼眶靜脈叢放血,0.5mL/只,并測(cè)外周血紅細(xì)胞總數(shù)(RBC)及血紅蛋白含量(Hb)。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢**檢測(cè)外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):模型組小鼠放血后24小時(shí)的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降,低于正常值參考值,且與正常對(duì)照組比較具***性差異(P<0.05),表明成功構(gòu)建了失血性貧血?jiǎng)游锬P驮炷?。小鼠疾病模型?yīng)用于轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中的思路與策略該研究從臨床患者中篩選到潛在的致病基因。徐州皮膚疾病動(dòng)物模型建模

明確研究疾病的獨(dú)特資源確定小鼠疾病模型的初步選擇。崇明區(qū)疾病動(dòng)物模型建模原理

    可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種變化和修飾。本發(fā)明對(duì)試驗(yàn)中所使用到的材料以及試驗(yàn)方法進(jìn)行一般性和/或具體的描述。雖然為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領(lǐng)域公知的,但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細(xì)描述。下述實(shí)施例中所涉及的儀器、試劑、材料等,若無(wú)特別說(shuō)明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等,可通過(guò)正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實(shí)施例中所涉及的實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè)方法等,若無(wú)特別說(shuō)明,均為現(xiàn)有技術(shù)中已有的常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè)方法等。實(shí)施例1:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成2mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例2:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實(shí)施例3建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液25ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中,配制成4mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg分別在***天及第八天腹腔注射。實(shí)施例4:建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下:將%氯化鈉溶液(齊魯制藥,批號(hào):aa1a8029a)中。崇明區(qū)疾病動(dòng)物模型建模原理

上海東寰生物科技有限公司主營(yíng)品牌有東寰生物,發(fā)展規(guī)模團(tuán)隊(duì)不斷壯大,該公司服務(wù)型的公司。是一家有限責(zé)任公司企業(yè),隨著市場(chǎng)的發(fā)展和生產(chǎn)的需求,與多家企業(yè)合作研究,在原有產(chǎn)品的基礎(chǔ)上經(jīng)過(guò)不斷改進(jìn),追求新型,在強(qiáng)化內(nèi)部管理,完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時(shí),良好的質(zhì)量、合理的價(jià)格、完善的服務(wù),在業(yè)界受到寬泛好評(píng)。公司始終堅(jiān)持客戶需求優(yōu)先的原則,致力于提供高質(zhì)量的原代細(xì)胞,細(xì)胞增殖與凋亡,細(xì)胞檢測(cè)試劑盒,動(dòng)物疾病模型。上海東寰生物自成立以來(lái),一直堅(jiān)持走正規(guī)化、專業(yè)化路線,得到了廣大客戶及社會(huì)各界的普遍認(rèn)可與大力支持。

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上海東寰生物科技有限公司于2015年09月24日成立。法定代表人席其良,公司經(jīng)營(yíng)范圍包括:從事生物科技領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)開(kāi)發(fā)、技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),化工產(chǎn)品(除危險(xiǎn)化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學(xué)品)的銷售等。