cns，pirb的功能和下游抑制性信號通路仍然未被闡明，因此迫切需要pirb的細胞和動物模型。目前對于pirb基因功能的研究，多采用可溶性的pirb的胞外段(pirbextracellularpeptide，pep)和抑制劑，或者采用慢病毒轉染。前者受到是否能夠透過血腦屏障和抑制劑效率的影響，后者慢病毒轉染在原代細胞和在體的轉染效率比較低，使研究pirb的功能受到極大的限制。為解決這些問題，我們通過crispr/cas9技術建立了pirb基因敲入小鼠，將pirb基因敲入c57bl/6j的rosa26位點，為研究pirb在免疫系統(tǒng)或者神經(jīng)系統(tǒng)的作用和機制提供了很好的工具。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供pirb基因敲入的小鼠動物模型?？梢院喕瘜嶒灢僮骱蜆悠肥占?。虹口區(qū)酒精肝疾病動物模型建模

    PMID：15082495、7561688)①HE染色②關節(jié)側視圖③PCR鑒定、二、糖尿病相關動物模型1.糖尿病***1）模型構建（PMID：30826357）使用鏈佐星（STZ）注射ApoE-/-小鼠，建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型，同時與ApoE-/-小鼠采用高脂喂養(yǎng)18周2）模型檢測指標（PMID：29107826、28345659）3）生化指標檢測4）超聲檢測5）主動脈染色檢測2.糖尿病心肌病1）誘發(fā)性DCM模型模型構建（PMID：29732743）實驗動物：大鼠方法：各大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1，pH，現(xiàn)配現(xiàn)用)，并給予高脂飼料進行喂養(yǎng)。①模型檢測指標血糖檢測②HE染色③超聲心電圖2）自發(fā)性1型DCM模型3）自發(fā)性2型DCM模型3.糖尿病視網(wǎng)膜病變1）模型構建PMID：30862093實驗動物：小鼠方法：糖尿病雄性db/db（+/+Leprdb/J）小鼠。喂養(yǎng)至21周2）模型檢測指標①膠質原纖維酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR組視網(wǎng)膜組織內(nèi)核層及外核層結構松散，細胞排列紊亂GCL，神經(jīng)節(jié)細胞層;INL，內(nèi)核層;ONL，外核層三、動物模型構建總結1.臨床資料合理性在納入臨床資料時，需關注特定疾病患者的流行病學趨勢，即疾病易發(fā)年齡，男女比例等，同時需考慮是否與體重、基因表達等具有相關性。2.模型合理性選擇合適，簡便。阿爾茲海默癥疾病動物模型建模原理便于研究者按實驗目的需要隨時采取各種樣品。

實驗期間每天進行陰道涂片，觀測動情周期變化。進一步地，檢測***水平是指：檢測雌***(e2)、促卵泡生長素(fsh)和促黃體生成素(lh)的水平。進一步地，檢測對比卵巢重量是指：比較各組大鼠雙側卵巢臟器系數(shù)。進一步地，陰道涂片是指：采用陰道脫落細胞涂片法，使用染色劑為亞甲基藍。本發(fā)明利用順鉑成功地建立了大鼠卵巢早衰模型，為基礎研究建立穩(wěn)定的卵巢早衰動物模型奠定了良好的基礎。本發(fā)明使用的各種術語和短語具有本領域技術人員公知的一般含義。提及的術語和短語如有與公知含義不一致的，以本發(fā)明所表述的含義為準。附圖說明圖1：e2水平檢測結果示意圖。圖2：fsh水平檢測結果示意圖。圖3：lh水平檢測結果示意圖。圖4：大鼠體重檢測結果示意圖。

    該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調節(jié)機制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動物模型的構建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術方案是：pirb基因敲入的小鼠動物模型，包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點grna1和grna2，將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi)，所述grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術方案為：pirb基因敲入的小鼠動物模型的構建方法，具體按照以下步驟實施：步驟1、基于crispr/cas9技術構建針對c57bl/6j小鼠rosa26基因的特異性grna1和grna2，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如；步驟2、構建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶載體，將打靶載體進行線性化處理；步驟3、步驟2中將含有l(wèi)oxp位點打靶載體、步驟1中有活性的grna1和grna2與cas9蛋白共同注射進入**小鼠受精卵中，獲得f0代小鼠；步驟4、將步驟3中性成熟的陽性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代，獲得f1代雜合子小鼠，通過pcr、測序和southern雜交確定動物基因型；步驟5、將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。臨床上平時不易見到的疾病可用動物隨時復制出來。

可以對本發(fā)明進行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領域公知的，但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細描述。下述實施例中所涉及的儀器、試劑、材料等，若無特別說明，均為現(xiàn)有技術中已有的常規(guī)儀器、試劑、材料等，可通過正規(guī)商業(yè)途徑獲得。下述實施例中所涉及的實驗方法，檢測方法等，若無特別說明，均為現(xiàn)有技術中已有的常規(guī)實驗方法，檢測方法等。實施例1：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液50ml加入規(guī)格為10mg的醫(yī)用順鉑(齊魯制藥，批號：aa1a8029a)中，配制成2mg/kg順鉑注射液，按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實施例2：建立大鼠卵巢早衰模型步驟如下：將％氯化鈉溶液(齊魯制藥，批號：aa1a8029a)中，配制成3mg/kg順鉑注射液,按照10ml/kg連續(xù)腹腔注射7天。實驗動物向小型化的發(fā)展趨勢更有利于實驗者的日常管理和實驗操作。金山區(qū)疾病動物模型建模供應商

很多自發(fā)性動物模型在研究人類疾病時具有重要的價值。虹口區(qū)酒精肝疾病動物模型建模

通過pirb敲入動物模型與不同類型cre小鼠的雜交，可以用于研究ad不同***或不同細胞類型pirb的調節(jié)作用。附圖說明圖1為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠插入pirb基因cds和loxp位點的打靶質粒載體的構建圖；圖2為本發(fā)明pirb基因敲入的小鼠模型的構建方法的流程圖；圖3為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠的基因型pcr結果鑒定電泳圖；圖4為本發(fā)明f1代pirb敲入的小鼠驗證pirb基因敲入效果的測序峰圖；圖5為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的方法示意圖；圖6為本發(fā)明f1代pirb基因敲入的小鼠進行southern鑒定的結果圖。虹口區(qū)酒精肝疾病動物模型建模

上海東寰生物科技有限公司一直專注于經(jīng)營范圍為：從事生物科技領域內(nèi)的技術開發(fā)、技術轉讓、技術咨詢、技術服務。化工產(chǎn)品（除危險化學品、監(jiān)控化學品、煙花爆竹、民用物品、易制毒化學品）的銷售?！疽婪毥?jīng)批準的項目，經(jīng)相關部門批準后方可開展經(jīng)營活動】。，是一家商務服務的企業(yè)，擁有自己**的技術體系。一批專業(yè)的技術團隊，是實現(xiàn)企業(yè)戰(zhàn)略目標的基礎，是企業(yè)持續(xù)發(fā)展的動力。公司業(yè)務范圍主要包括：原代細胞，細胞增殖與凋亡，細胞檢測試劑盒，動物疾病模型等。公司奉行顧客至上、質量為本的經(jīng)營宗旨，深受客戶好評。公司深耕原代細胞，細胞增殖與凋亡，細胞檢測試劑盒，動物疾病模型，正積蓄著更大的能量，向更廣闊的空間、更寬泛的領域拓展。