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淮安肺病疾病動物模型建模

來源: 發(fā)布時間:2021-10-16

    r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步驟4、鑒定為pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周齡、雌性小鼠6周齡分別與野生型異性小鼠交配獲得f1代雜合子小鼠,圖2為本發(fā)明f1代雜合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程圖,小鼠出生后20天進行pcr鑒定,若有陽性小鼠出生,則表示轉基因已經(jīng)整合到生殖細胞。(1)通過pcr方法對獲得的f1代小鼠進行基因型的鑒定:(a)dna的提?。悍椒?:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()來獲得高純度的基因組dna。步驟a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入離心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步驟b.將步驟a離心管內于56℃孵育過夜。步驟c.過夜后12000rpm離心2min去除雜質。步驟d.加入200μlbuffergb和200μl無水乙醇,充分混勻。步驟e.將吸附柱放在收集管上,將步驟d得到的樣品加到吸附柱里,12000rpm離心2min,棄掉收集管中液體。步驟f.棄去液體后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm離心1min,棄掉收集管中液體。步驟g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm離心1min。棄掉收集管中液體。注意:bufferwb需要與100%乙醇預混,沿管壁加入bufferwb沖走殘余的鹽。步驟h.重復步驟g一次。疾病動物模型建模有加些方式?淮安肺病疾病動物模型建模

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    設計了一套能夠特異性標記“穆勒膠質細胞”的系統(tǒng),再將能誘導神經(jīng)細胞形成的基因編輯系統(tǒng),包裝成“病毒”,注射到小鼠的視網(wǎng)膜。約1個月后,研究人員在小鼠的視網(wǎng)膜視神經(jīng)節(jié)細胞層,發(fā)現(xiàn)了由穆勒膠質細胞轉分化而來的視神經(jīng)節(jié)細胞。這些誘導而來的視神經(jīng)節(jié)細胞,不僅可以對光刺激產生相應的電信號,還可以和大腦中正確的腦區(qū)建立功能性聯(lián)系,將視覺信號傳輸?shù)酱竽X,成功恢復視覺功能。進一步的研究還表明,通過這一基因編輯技術,還能將小鼠模型中特定區(qū)域的“星形膠質細胞”非常高效地轉分化為多巴胺神經(jīng)元。轉分化而來的多巴胺神經(jīng)元,能將帕金森模型小鼠的運動障礙,逆轉到接近正常小鼠的水平。這項研究的負責人楊輝指出,盡管將膠質細胞轉分化為神經(jīng)元的基因編輯技術在實驗室里取得重要進展,但要將研究成果真正應用于人類疾病的***,還有很多工作要做。人類的視神經(jīng)節(jié)細胞能否再生?帕金森患者是否能通過該方法被***?研究人員今后將從小鼠模型轉到靈長類模型,進一步深入研究。哪一家疾病動物模型建模公司很多自發(fā)性動物模型在研究人類疾病時具有重要的價值。

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    本能發(fā)明的另一目的是公開了如上所述的方法制備的鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的用途是將該模型用于腰椎間盤突出***方法研究和/或影像學檢測研究。進一步地,該模型用于與磁性相關的***和/或檢測方面的研究,比如經(jīng)顱磁刺激和核磁共振。本發(fā)明利用壓迫元件插入腰椎椎間孔,模擬腰椎間盤突出后突出物對神經(jīng)根的持續(xù)慢性的機械壓迫癥狀,有益效果有:1.應用機械壓迫神經(jīng)根模擬腰椎間盤突出病理,癥狀的病因學與臨床情況接近;2.相關的疼痛行為類似于特定的慢性疼痛癥狀,且易于客觀測量;3.制備方法簡單,對動物損傷小,穩(wěn)定性好,成功率高;4.造模關鍵材料壓迫元件不受磁場干擾,無在磁場作用下移位風險,有利于后續(xù)對動物進行磁療,經(jīng)顱磁刺激等***及核磁共振等檢查;5.造模關鍵材料壓迫元件不影響磁場,不會對***儀器和核磁共振等儀器產生不良影響;6.此方法獲得的模型由于采用了h62黃銅或聚乳酸材料制備的壓迫元件,使得研究方法與檢測方法不受磁場作用限制,豐富了腰椎間盤突出臨床前研究的***方法及影像學檢測,為臨床研究提供理論依據(jù)。以下將結合附圖對本發(fā)明作進一步說明,以充分說明本發(fā)明的目的、技術特征和技術效果。附圖說明圖1是壓迫元件插入椎間孔的結構示意圖。

    建立一種理想的腰椎間盤突出的動物模型對本病的機制研究和臨床防治具有重要意義?,F(xiàn)有模型對腰椎間盤突出癥的模擬均存在明顯不足,或與臨床實際病變部位有一定差距,如慢性坐骨神經(jīng)結扎模型;或操作難度大,對動物損傷重,如自體髓核移植模型,選擇性神經(jīng)根結扎模型。因此,急需一種新的操作簡單,重復率高,穩(wěn)定且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型。技術實現(xiàn)要素:為了建立一種操作簡單,穩(wěn)定好且能準確模擬腰椎間盤突出后癥狀的動物模型,本發(fā)明提供了一種大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型的制備方法。其包括以下步驟:步驟一、麻醉大鼠;步驟二、于大鼠腰4到骶1水平左側或右側作縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌,暴露腰4椎間孔和腰5椎間孔;步驟三、將壓迫元件插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中,得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型。其中,步驟一具體為:腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠后,將大鼠背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動物手術臺上,鋪無菌巾。在一個具體實施方式中,壓迫元件為l型棒;步驟三具體為:將2根l型棒的***端分別插入到左側或右側腰4椎間孔及腰5椎間孔中,l型棒的第二端置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如何定義好的小鼠疾病模型?

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1、動物模型名稱:環(huán)磷酰胺致白細胞減少癥小鼠模型2、實驗動物種屬:KM小鼠或NIH小鼠3、實驗動物性別:雄性4、實驗動物年齡:約4周齡5、實驗動物體重:18~22g6、實驗動物環(huán)境:SPF級,1、實驗方法:環(huán)磷酰胺誘導。小鼠按30mg/kg體重劑量腹腔注射環(huán)磷酰胺,連續(xù)注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日,以及停止注射第2、5、8、11、15日時分別**作外周血象檢測,觀察外周血白細胞總數(shù)。***1次檢測觀察后麻醉處死小鼠,取其股骨,用Hanks液沖洗骨髓細胞,顯微鏡下觀察骨髓有核細胞數(shù)。2、檢測標準:模型組小鼠的外周血白細胞總數(shù)明顯降低,鏡下觀察模型組小鼠的骨髓有核細胞數(shù)較正常對照組小鼠明顯降低。小鼠是人類疾病理想的動物模型不僅因為小鼠在生理上與人類極為相似而且小鼠的遺傳資源非常豐富?;窗怖w維化疾病動物模型建模

什么是疾病動物模型建模?淮安肺病疾病動物模型建模

    2mg組、4mg組、6mg組lh水平均上升,同樣,只有2mg組有明顯升高(p<),如圖3所示。表3表4②體重變化:(mean±sd),如圖4所示:2mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第2天開始)。3mg組(連續(xù)注射7天)與空白組相比,大鼠體重***下降(p<,注射第4天開始),直至第12天*存活1只大鼠。4mg、6mg組(第1、8天注射)與空白組相比,大鼠體重分別在***次及第二次注射后的有***下降(p<),4mg組體重在停止給藥后4天與空白組無差異。③卵巢重量:如表5、圖5所示,2mg、6mg組大鼠在經(jīng)過順鉑注射后卵巢重量相比對照組,都有不同程度縮減,其中2mg組卵巢重量明顯減輕(p<),4mg、6mg組無明顯差異。表5④動情周期觀察(陰道涂片):3mg組動物死亡時間早,無完整的動情周期。如表、圖6所示。正常大鼠動情周期4-5天。分為四個階段,動情前期:撇圓形有核上皮細胞占絕大多數(shù),白細胞和角化上皮細胞很少(圖a)。動情期:角化上皮細胞占多大多數(shù),由散在增至集白細胞和有核上皮細胞很少(圖b)。動情后期:片狀角化上皮細胞,有核上皮細胞和白細胞3種都有,無太大差異(圖c)。動情間期:白細胞占絕大多數(shù),有核上皮細胞和角化上皮細胞很少(圖d)。表6⑤病理結果:如圖7所示?;窗卜尾〖膊游锬P徒?/p>

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