離心機的加速度調(diào)至較低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法一時間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。當(dāng)濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。超濾離心管可以用于制備疫苗、抗體等生物制品,以緩解某些疾病。河北小型超濾離心管廠家電話
超濾離心管使用注意事項:(1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。(3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預(yù)冷至4度)。不同離心機的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調(diào)至較低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法一時間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。溫州超濾離心管購買超濾離心管通常被用于天然藥物研究和制備中。
超濾管采用其特有的再生纖維素膜,定義為:一個確定NMWL 的超濾膜應(yīng)該截留至少90% 以上的這個大小的球形分子,即100kDa的球形蛋白用100k的再生纖維素膜得率超過90%。請仔細(xì)查看以下默克生命科學(xué)官方數(shù)據(jù):(以0.5mL的AU0.5為例,其它型號截留分子量的選擇原則一致,具體離心力和離心時間不同。截留分子量選小啦!看到這個表,你是否發(fā)現(xiàn)原來抱怨超濾管流速偏慢的根源來自對于截留分子量定義的誤解。膜孔徑要小于目的分子這是一原則。如果分子有近似球形的立體結(jié)構(gòu)(而非明顯的線性分子),在再生纖維素超濾膜體系內(nèi),選擇“等于”或“略小于”目的分子的截留分子量的超濾管是較佳選擇,這樣操作起來又快又好,既保證了樣品回收率,又縮短了離心時間,大幅降低大分子損傷風(fēng)險。
一種超濾離心管,包括主管,主管為頂部開口底部封閉結(jié)構(gòu),主管開口處安裝有頂蓋,主管內(nèi)安裝有內(nèi)管,內(nèi)管上下貫通,內(nèi)管底面貼合有超濾膜,超濾膜將內(nèi)管底面包覆,超濾膜底面貼合有支撐板,超濾膜位于內(nèi)管底面與支撐板之間,內(nèi)管底部安裝有底托,內(nèi)管配合底托將超濾膜、支撐板壓緊,內(nèi)管、超濾膜、支撐板、底托與主管中位于底托以下的容腔空間連通。本實用新型中,有效將樣本溶液和濾液經(jīng)離心和超濾分離,分離純度高。本產(chǎn)品由于超濾膜垂直與管體,超濾膜的另一側(cè)為支撐網(wǎng),支撐網(wǎng)設(shè)有大量網(wǎng)孔,支撐網(wǎng)的另一側(cè)直接為出液口,大口徑的出液口極大效率的增加濾液通量,并且拆卸方便,超濾膜易于更換,其他部件易于清洗,可重復(fù)使用,經(jīng)濟環(huán)保。濟環(huán)保。濟環(huán)保。超濾離心管在食品安全監(jiān)測中也具有重要意義,如檢測水產(chǎn)品中的重金屬等有害物質(zhì)。
其實,離心管是離心機中較重要的配件之一,它主要是用來承裝實驗樣品的,我們使用離心機時,首先需要用到的就是轉(zhuǎn)子,轉(zhuǎn)子里面需要放的就是離心管了。之所以說離心管是離心機較重要的配件之一是因為,如果沒有離心管,樣品就沒辦法承裝。那么,了解過離心管的作用之后,你知道離心管應(yīng)該如何選擇嗎?相信連用過離心機的朋友都不會很清楚。那么接下來小編帶你了解一下離心管應(yīng)該如何選擇。想要了解離心管如何選擇就要先說到材質(zhì),離心管的材質(zhì)一般分為三種,一種是塑料離心管,第二種是玻璃離心管,第三種是鋼制離心管。超濾離心管還可用于藥代動力學(xué)和藥物分析中,以確定藥物代謝和藥效學(xué)參數(shù)。北京濃縮超濾離心管定制
超濾離心管在藥物代謝動力學(xué)研究中也具有重要意義,以確定藥物代謝途徑和藥效學(xué)參數(shù)。河北小型超濾離心管廠家電話
使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。這個我是聽老板們說的,的確乙醇泡完后孔徑會增大,基本就是5-10KD較大,也就是說如果你的蛋白在21KD以上,應(yīng)該沒問題?;蛘呖梢圆挥靡掖寂荩肗aOH洗之后直接用無菌水保存,每周換一下液體,應(yīng)該沒有問題??纯凑f明書不就結(jié)了!我原來在CRO的時候一直是重復(fù)用的,也沒見什么不好??!短期會用的話,用20%的乙醇泡著,回頭拼命用millipore的水充干凈,然后在用樣品緩沖液平衡一下就好,至于有些人說的改變孔徑,也沒那么大影響的,你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個月以內(nèi)不用的話,建議用100mM的NaOH保存!更長時間的話加0.02%的疊氮鈉,但那個東西強致疾病物,不建議使用。理論上截留目標(biāo)物,孔徑應(yīng)選1/3~1/5的膜;透過目標(biāo)物,孔徑應(yīng)選5-10倍的膜。河北小型超濾離心管廠家電話