我們通常會(huì)以1/3到1/6甚至更低的區(qū)間來選擇超濾管的孔徑,通常更小的孔徑會(huì)使回收率提高但是超濾的時(shí)間也會(huì)比較長(zhǎng)。一定范圍內(nèi),超濾的回收率和速度是一對(duì)矛盾體,因此可以通過優(yōu)化孔徑的選擇,在回收率可以接受的條件下選擇較大的孔徑,來提高超濾的速度。低溫如< 10 ℃,液體的粘度會(huì)增加,流動(dòng)性會(huì)降低,因此液體的跨膜速率也會(huì)降低。適當(dāng)提高超濾溫度,往往能夠提高超濾的速度。有些客戶需要做幾十ml到幾百ml樣品的濃縮或者緩沖液置換,但是卻使用1支或幾支15ml的超濾管反復(fù)離心來完成操作,這樣必然造成時(shí)間上的浪費(fèi)。怎么辦?一定要挑選適合處理量的產(chǎn)品,減少不必要的反復(fù)離心從而提升超濾的效率。超濾離心管還可用于檢測(cè)藥品樣品中的殘留物和污染物,并進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)測(cè)和控制。鄭州濃縮超濾離心管使用方法
超濾離心管應(yīng)用:1、組成部分:該裝置包括一個(gè)蓋子、一個(gè)過濾器和一個(gè)50ML的離心管。2、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意:為了避免在離心過程中損壞裝置,在旋轉(zhuǎn)前請(qǐng)檢查間隙。 3、帶有200微升(μL)的移液管,用于濃縮液回收適用性。①注意:該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,只供一次使用,保質(zhì)期3年。為確保對(duì)預(yù)定用途的適用性,建議進(jìn)行初步的回收和截留試驗(yàn)。4、濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì)。鄭州濃縮超濾離心管使用方法使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免過度旋轉(zhuǎn)造成機(jī)械損傷或故障,并及時(shí)維護(hù)保養(yǎng)設(shè)備。
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;較新推出ZL產(chǎn)品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標(biāo)分子量的一半。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時(shí)需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長(zhǎng)時(shí)間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì),可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。超濾離心管可以通過配合其他實(shí)驗(yàn)室設(shè)備使用,如高速冷凍機(jī)、凝膠電泳儀等來達(dá)到更好的效果。
超濾離心管使用注意事項(xiàng):(1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。(3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,減小對(duì)膜的壓力。注意,一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機(jī),否則離心機(jī)出問題時(shí),無法一時(shí)間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直)。在實(shí)際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,這樣可以延長(zhǎng)離心管的使用壽命。超濾離心管是一種經(jīng)濟(jì)、有效且環(huán)保的分離技術(shù),具有普遍應(yīng)用前景。安徽小型超濾離心管生產(chǎn)公司
超濾離心管還可用于制備純度高的酶、蛋白質(zhì)等生物制品,以滿足不同實(shí)驗(yàn)室和行業(yè)的需求。鄭州濃縮超濾離心管使用方法
塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明或者是半透明的,它的硬度小,可用穿刺法取出梯度。缺點(diǎn)是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,使用壽命短。塑料離心管都有管蓋,它的作用是防止樣品外泄,尤其是用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)防止樣品外泄是很重要的一點(diǎn);管蓋還有一個(gè)作用是防止樣品揮發(fā)以及支持離心管,防止離心管變形。在挑選這一點(diǎn)的時(shí)候還要注意檢查管蓋是否嚴(yán)密,在試驗(yàn)時(shí)能否蓋嚴(yán),以到達(dá)倒置不漏液;我們都知道在塑料離心管中,常用材料有聚乙烯PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)等,其中聚丙烯PP管性能會(huì)相對(duì)較好,所以,我們?cè)谔暨x塑料離心管時(shí)盡可能的考慮聚丙烯的塑料離心管。鄭州濃縮超濾離心管使用方法