超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;新推出產(chǎn)品膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達(dá)到1000倍以上,基本上可以達(dá)到換buffer的目的。超濾離心管還可用于檢測(cè)環(huán)境樣本中的微生物、重金屬等有害物質(zhì)。金華100K超濾離心管生產(chǎn)公司
超濾離心管使用注意事項(xiàng):當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí),取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍(lán)色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測(cè),繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過(guò)程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導(dǎo)致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過(guò)高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時(shí)超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。深圳外泌體超濾離心管工廠使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意保持其平衡和穩(wěn)定,并調(diào)整旋轉(zhuǎn)參數(shù)以確保較佳效果。
超濾離心管關(guān)于回收率的疑問?一般對(duì)濃度大于0.1mg/ml的溶質(zhì)進(jìn)行回收,回收率在90%以上。通常,樣品損失是由于濾膜表面和料管表面的非特異性吸附造成的。為了獲得較高的回收率,所選濾膜的截留率約為目標(biāo)蛋白的1/3。超濾膜是一種非對(duì)稱膜,其孔徑呈正態(tài)分布。在高壓離心下也可能發(fā)生泄漏,在這種情況下蛋白質(zhì)可能會(huì)發(fā)生變形。因此,截留孔徑越小,流速越慢,但回收率會(huì)更高。濃縮過(guò)程中有蛋白質(zhì)沉淀,如何處理?如果蛋白質(zhì)濃縮過(guò)快或過(guò)多,都可能造成蛋白質(zhì)沉淀,濃縮后的蛋白質(zhì)之后濃度不宜過(guò)高;對(duì)于對(duì)濃縮速度敏感、易沉淀的蛋白質(zhì),建議改進(jìn)方法如下:1)降低離心速度,2)使用截留分子量較大的超濾膜3) 吹吸濃縮管,然后離心。
超濾離心管應(yīng)用:1、組成部分:該裝置包括一個(gè)蓋子、一個(gè)過(guò)濾器和一個(gè)50ML的離心管。2、帶有擺桶式或定角式轉(zhuǎn)子的離心器以及可以容納50mL試管的樣本腔/試管座。①注意:為了避免在離心過(guò)程中損壞裝置,在旋轉(zhuǎn)前請(qǐng)檢查間隙。 3、帶有200微升(μL)的移液管,用于濃縮液回收適用性。①注意:該產(chǎn)品未經(jīng)消毒,只供一次使用,保質(zhì)期3年。為確保對(duì)預(yù)定用途的適用性,建議進(jìn)行初步的回收和截留試驗(yàn)。4、濃縮含有抗原、抗體、酶、核酸(單株或雙株DNA/RNA樣本)、微生物、洗出液和凈化樣本的生物樣本。5、凈化組織培養(yǎng)基提取液和細(xì)胞溶解液中的大分子成分,從反應(yīng)混合液中去除引物、連接或分子標(biāo)記,在HPLC之前去除蛋白質(zhì)。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的溫度、時(shí)間和壓力要求,以獲得較佳結(jié)果。
一般來(lái)說(shuō),我們較常用的離心管就是塑料離心管,塑料離心管的優(yōu)缺點(diǎn)也很明顯,優(yōu)點(diǎn)是它的硬度較小,可以利用穿刺法來(lái)得到我們需要的物質(zhì)。但這也正是它的缺點(diǎn),因?yàn)橛捕刃?,所以它也更容易變形,抗腐蝕性也差,所以它的壽命是比較短的。塑料離心管的還可以按照材質(zhì)來(lái)選擇,分別有聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC),聚丙烯(PP)這三種材質(zhì)。一般大規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室都是將塑料離心管做一次性使用,但一般的實(shí)驗(yàn)室還是會(huì)循環(huán)使用,不推薦循環(huán)使用,因?yàn)檫@樣會(huì)造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確性,但如果非要做循環(huán)使用的話小編還是建議使用pp材質(zhì)的離心管,然后經(jīng)過(guò)高壓高溫進(jìn)行消毒,pp材質(zhì)是上述三種材質(zhì)中較好的,所以在選擇的時(shí)候我們盡量選擇pp材質(zhì)的離心管。超濾離心管還可用于生產(chǎn)工藝控制和質(zhì)量監(jiān)測(cè),以確保產(chǎn)品符合標(biāo)準(zhǔn)要求。金華100K超濾離心管生產(chǎn)公司
超濾離心管可以用于分離提取動(dòng)植物組織中的DNA、RNA等核酸分子,以進(jìn)行基因克隆和功能研究。金華100K超濾離心管生產(chǎn)公司
玻璃離心管,大家都知道,玻璃是很容易碎的,所以如果我們選擇玻璃離心管時(shí),離心機(jī)的離心力一定不能調(diào)得很高,還需要將玻璃離心管墊上橡膠墊,避免破碎,玻璃離心管的優(yōu)點(diǎn)是管體透明,利于觀察分離情況。鋼制離心管,鋼制離心管硬度大、抗熱、抗凍、不變形等優(yōu)點(diǎn)被普遍應(yīng)用,一般鋼制離心管都會(huì)循環(huán)使用。離心管盡量選擇pp材質(zhì)的塑料離心管,也可以選鋼制的,玻璃材質(zhì)因?yàn)槠淙菀灼扑椋蛛x轉(zhuǎn)速要求高,需將轉(zhuǎn)速控制在2000rpm/min內(nèi),所以通常情況下不做選擇。離心管的選擇還可以根據(jù)自己所分離樣品的大小來(lái)決定是選擇微量離心管、普通離心管、大容量離心管還是離心瓶。金華100K超濾離心管生產(chǎn)公司