超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標(biāo)分子量選擇適當(dāng)?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標(biāo)分子量的一半。因?yàn)槌瑸V膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復(fù)加樣離心。如果同時(shí)需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復(fù)2次可除去99%鹽。避免過長(zhǎng)時(shí)間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設(shè)計(jì),可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。超濾離心管可以用于分離各種生物樣品,如血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液、酶溶液等。廣州3K超濾離心管定做
超濾離心管使用注意事項(xiàng):(1)選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。(3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達(dá)到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,減小對(duì)膜的壓力。注意,一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機(jī),否則離心機(jī)出問題時(shí),無法一時(shí)間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直)。在實(shí)際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,這樣可以延長(zhǎng)離心管的使用壽命。杭州外泌體超濾離心管排行榜超濾離心管還可用于制備高純度的酶、蛋白質(zhì)等生物制品,以應(yīng)用于不同領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)室操作。
離心管,管狀試樣容器,可帶密封蓋或壓蓋,是實(shí)驗(yàn)室里面常見的一種實(shí)驗(yàn)耗材,主要是配合離心機(jī)使用,即將實(shí)驗(yàn)液體裝在其中,然后放在離心機(jī)里面離心。進(jìn)口離心管按照材料分類:塑料離心管,玻璃離心管,鋼制離心管,又可以分為PP、PC、PS等,根據(jù)不同需要,生產(chǎn)廠家會(huì)選擇不同的塑料材料來進(jìn)行制作。根據(jù)其大小,又分為1.5ml、2ml、5ml、10ml、15ml、50ml等,國(guó)產(chǎn)的離心管一般就是這幾個(gè)規(guī)格,用的較多的也就是10ml和50ml的。如果您的離心機(jī)是配30ml或者其他規(guī)格的離心管時(shí),就要考慮進(jìn)口的了。另外,離心管還有圓底和尖底,以及螺旋蓋和插蓋之分。螺旋蓋的離心管帶有較精細(xì)的刻度,插蓋的只有一個(gè)總體的容量標(biāo)示。
離心機(jī)的加速度調(diào)至較低檔,減小對(duì)膜的壓力。注意,一定要等離心機(jī)達(dá)到目的轉(zhuǎn)速之后,方可離開離心機(jī),否則離心機(jī)出問題時(shí),無法一時(shí)間處理。膜與轉(zhuǎn)軸的方向根據(jù)說明書調(diào)整(角轉(zhuǎn)離心機(jī)的情況是膜與軸垂直)。在實(shí)際使用中,一般轉(zhuǎn)速開的比說明書里的要低,這樣可以延長(zhǎng)離心管的使用壽命。當(dāng)濃縮到剩下1ml時(shí),取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍(lán)色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測(cè),繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。超濾離心管可以用于制備溶液中的化合物和分子,以進(jìn)行進(jìn)一步的純化和鑒定。
超濾離心管的常見問題與解答,一:超濾離心管的膜材質(zhì)是什么?超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時(shí),去污劑分子會(huì)聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象,這有可能會(huì)影響去污劑的去除效果,具體的操作步驟請(qǐng)垂詢我們。超濾離心管還可以用于分離和提取植物中的活性成分和化合物。杭州外泌體超濾離心管排行榜
使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的操作程序和實(shí)驗(yàn)室規(guī)范,并定期進(jìn)行設(shè)備維護(hù)和保養(yǎng)。廣州3K超濾離心管定做
離心超濾裝置用于濃縮和澄清過濾生物樣品,蛋白純化,顆粒物去除,血漿或血清過濾,以及從細(xì)胞裂解液或細(xì)胞培養(yǎng)上清去除細(xì)胞或細(xì)胞碎片。提供一系列離心設(shè)備,快速安全處理100 μl到100ml樣品。可選拋棄型和可重復(fù)使用超濾裝置。超濾離心濃縮管,用于生物樣品濃縮。離心超濾管,簡(jiǎn)單快速,一步離心完成樣品濃縮,起始樣品體積可達(dá)500μl??煞湃?.2ml角轉(zhuǎn)子離心。垂直膜配合狹長(zhǎng)的流道,有效地避免濾膜堵塞,提高濃縮速度,即使顆粒含量高的溶液,也同樣能達(dá)到快速濃縮。在30分鐘內(nèi)就可達(dá)到超過90%的濃縮回收率。死端結(jié)構(gòu)避免離心干燥樣品。0.5ml-20ml樣品處理量的超濾管,截留分子量2KDa-100KDa,規(guī)格齊全,濃縮回收率高、流速更快,較高達(dá)12000g的高速離心機(jī),機(jī)械強(qiáng)度更好,質(zhì)量更好,價(jià)格更優(yōu)惠。廣州3K超濾離心管定做