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超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過(guò)對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來(lái)說(shuō)(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時(shí)候,會(huì)有問(wèn)題。非特異結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。含有帶電的或者疏水結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)更易于不可逆結(jié)合到不同表面。對(duì)超濾離心管表面做鈍化預(yù)處理可降低蛋白質(zhì)在膜表面的吸附性損失,大多數(shù)情況下,在濃縮稀蛋白溶液之前預(yù)處理柱子可以提高回收率,因?yàn)槿芤嚎商顫M(mǎn)膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點(diǎn)。鈍化的方法是預(yù)先用較高容積的鈍化溶液預(yù)浸泡柱子1小時(shí)以上,蒸餾水徹底沖洗柱子,再用蒸餾水離心一次以徹底除去可能殘留在膜上的鈍化溶液。注意鈍化處理后別讓膜干了。如果要留待以后使用,需要加無(wú)菌蒸餾水保持膜濕潤(rùn)。超濾離心管可以用于分離和純化各種大分子化合物,如蛋白質(zhì)、核酸、多糖等。成都超濾離心管在哪買(mǎi)
我用的是3500g,4度離心,時(shí)間可以自己控制,取決于你之后的濃縮體積,我一般是200ul左右。千萬(wàn)別一下離心時(shí)間太長(zhǎng),不同的蛋白濃縮的速度不同,有的需要長(zhǎng)時(shí)間離心,有的則一下子就好。當(dāng)然也和你的蛋白是否比較純,所用的是什么buffer,還有蛋白的濃度有關(guān)系。所以離心時(shí)要先短些時(shí)間觀察一下你的濃縮速度,不要一下子濃縮過(guò)了,甚至形成沉淀就得不償失了。另外其實(shí)他們的管子都設(shè)計(jì)的是一次性使用,所以如果想重復(fù)使用,不要離得速度太高,4000-4500RPM就差不多了,另外重復(fù)使用時(shí)要看看管壁上有沒(méi)有裂紋,現(xiàn)在的管子好像不如從前的結(jié)實(shí)了。青島超濾離心管能干什么超濾離心管通常具有不同材質(zhì)的選擇,以適應(yīng)不同化學(xué)環(huán)境下的使用需求。
一般來(lái)說(shuō),超濾的回收率可達(dá)90%以上。樣本損失大多是由于濾膜表面和容器表面的非特異性吸附引起的。因此,選擇口碑好、優(yōu)良品質(zhì)的濃縮離心管非常重要。作為過(guò)濾方面的老牌公司,提供了多種濃縮離心管,可對(duì)50 μl到60 ml的樣本進(jìn)行高效的濃縮和脫鹽。它配備了(改良的聚醚砜)膜,確保低的非特異性吸附和高的回收率。當(dāng)然,這個(gè)的前提是你選對(duì)了濃縮離心管。濃縮離心管,適合處理不同體積的樣本。你可以根據(jù)你的樣本量來(lái)選擇。不過(guò),如果樣本濃度低體積大,可以選擇較小容積的濃縮離心管多次重復(fù)加樣離心。一旦樣本體積確定,下一步就是選擇適當(dāng)?shù)腗WCO。對(duì)于蛋白質(zhì)而言,建議所選濾膜的MWCO是欲截留分子大小的1/6-1/3。通常,截留孔徑越小,流速越慢,但截留比例更大。
實(shí)驗(yàn)室常用的離心管有塑料的和玻璃的,一般塑料的用得較多,因?yàn)椴AУ碾x心管不能用在高速或者超速離心機(jī)上。塑料的離心管又有PC (聚碳酸酯)、PE (聚乙烯)、PP(聚丙烯)等材質(zhì)。PP的管子性能相對(duì)來(lái)說(shuō)比較好。塑料的離心管透明或者半透明,可以直觀地看到樣品的離心情況,但是比較容易變形,抗有機(jī)溶劑的腐蝕性較差,所以使用壽命較短。因此,實(shí)驗(yàn)室一般會(huì)經(jīng)常購(gòu)買(mǎi)離心管。PC (聚碳酸酯):透明度較好,硬度大,可以高溫消毒,但不耐強(qiáng)酸強(qiáng)堿以及一些有機(jī)溶劑如酒精之類(lèi)。主要用于5萬(wàn)轉(zhuǎn)以上的超高速離心。PE(聚乙烯):不透明。和丙銅、醋酸、鹽酸等不反應(yīng),較為穩(wěn)定,高溫下容易變軟。PP(聚丙烯):半透明,化學(xué)及溫度穩(wěn)定性較好,但是在低溫下會(huì)變脆,所以在離心時(shí)不要在4℃以下。超濾離心管可以有效地去除混合物中的低分子量化合物,從而提高目標(biāo)化合物的純度。
下面是處理和重復(fù)使用超濾管的步驟。將超濾管中的水倒出來(lái),用Milliq水輕輕沖洗幾次。[如管底有可見(jiàn)蛋白質(zhì)沉淀,可先加水,再用設(shè)備頭吹氣,注意不要碰觸膜,吹氣至沉淀懸浮,再倒出,不要沖自來(lái)水。)然后加入0.2 mNaOH溶液,室溫放置20分鐘,平衡超濾。在此期間定量管。離心10分鐘。倒出剩余的MaOH溶液,將管芯浸入Milliq燒杯(1L或2L)中。放器數(shù)小時(shí),然后用新水替換,放置數(shù)小時(shí),不斷稀釋Na0E濃度。50ml管道和蓋子用自來(lái)水沖洗,內(nèi)壁用Milliq水沖洗。取出浸入水中的芯,并將其加入幾乎滿(mǎn)毫升的水中。在50毫升試管中注入毫升水。慢慢地將芯放入50毫升離心管中,排出一些水。然后蓋上蓋子,4度存放,直到下次使用。一般來(lái)說(shuō),根據(jù)上述步驟和注意事項(xiàng),每根渠道在三到四年內(nèi)不會(huì)受損。超濾離心管通常由聚碳酸酯或聚丙烯制成,具有強(qiáng)度高和化學(xué)惰性。成都超濾離心管在哪買(mǎi)
超濾離心管還可用于藥代動(dòng)力學(xué)和藥物分析中,以確定藥物代謝和藥效學(xué)參數(shù)。成都超濾離心管在哪買(mǎi)
其實(shí),離心管是離心機(jī)中較重要的配件之一,它主要是用來(lái)承裝實(shí)驗(yàn)樣品的,我們使用離心機(jī)時(shí),首先需要用到的就是轉(zhuǎn)子,轉(zhuǎn)子里面需要放的就是離心管了。之所以說(shuō)離心管是離心機(jī)較重要的配件之一是因?yàn)?,如果沒(méi)有離心管,樣品就沒(méi)辦法承裝。那么,了解過(guò)離心管的作用之后,你知道離心管應(yīng)該如何選擇嗎?相信連用過(guò)離心機(jī)的朋友都不會(huì)很清楚。那么接下來(lái)小編帶你了解一下離心管應(yīng)該如何選擇。想要了解離心管如何選擇就要先說(shuō)到材質(zhì),離心管的材質(zhì)一般分為三種,一種是塑料離心管,第二種是玻璃離心管,第三種是鋼制離心管。成都超濾離心管在哪買(mǎi)