使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。這個(gè)我是聽(tīng)老板們說(shuō)的,的確乙醇泡完后孔徑會(huì)增大,基本就是5-10KD較大,也就是說(shuō)如果你的蛋白在21KD以上,應(yīng)該沒(méi)問(wèn)題。或者可以不用乙醇泡,用NaOH洗之后直接用無(wú)菌水保存,每周換一下液體,應(yīng)該沒(méi)有問(wèn)題??纯凑f(shuō)明書不就結(jié)了!我原來(lái)在CRO的時(shí)候一直是重復(fù)用的,也沒(méi)見(jiàn)什么不好?。《唐跁?huì)用的話,用20%的乙醇泡著,回頭拼命用millipore的水充干凈,然后在用樣品緩沖液平衡一下就好,至于有些人說(shuō)的改變孔徑,也沒(méi)那么大影響的,你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個(gè)月以內(nèi)不用的話,建議用100mM的NaOH保存!更長(zhǎng)時(shí)間的話加0.02%的疊氮鈉,但那個(gè)東西強(qiáng)致疾病物,不建議使用。理論上截留目標(biāo)物,孔徑應(yīng)選1/3~1/5的膜;透過(guò)目標(biāo)物,孔徑應(yīng)選5-10倍的膜。超濾離心管通常被用于生物醫(yī)學(xué)、制藥、食品科學(xué)等領(lǐng)域中。杭州10K超濾離心管排行榜
避免過(guò)度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。離心管是一個(gè)簡(jiǎn)單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。 超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過(guò)對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來(lái)說(shuō)(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。江蘇再生纖維素離心管工廠使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意遵循正確的操作流程和實(shí)驗(yàn)室規(guī)范,并定期進(jìn)行質(zhì)量控制和評(píng)估。
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;新推出產(chǎn)品膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達(dá)到1000倍以上,基本上可以達(dá)到換buffer的目的。
離心管主要有塑料、不銹鋼制成,塑料離心管常用資料有聚丙烯(PP).聚乙烯(PE),聚碳酸酯(PC)等。其中PP管性能較好,塑料離心管的優(yōu)點(diǎn)是透明(或半透明),硬度小,可用穿刺法取出梯度,缺陷是易變形,抗有機(jī)溶劑腐蝕性差,運(yùn)用壽命短;不銹鋼離心管強(qiáng)度大,不變形,能抗凍,抗熱,抗化學(xué)腐蝕,但用時(shí)要防止接觸強(qiáng)腐蝕性的化學(xué)藥品、如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿等化學(xué)試劑。這里主要介紹塑料離心管:塑料離心管都有管蓋,離心前管蓋必需蓋嚴(yán),倒置不漏液。管蓋有三種作用:①避免樣品外泄,用于有放射性或強(qiáng)腐蝕性的樣品時(shí)②避免樣品揮發(fā)③支持離心管,避免離心管變形。使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免振動(dòng)或震動(dòng)造成樣品混亂并影響分離效果。
超濾離心管采用PH適用范圍普遍、蛋白結(jié)合力低、通量高、相容性強(qiáng)的PES聚醚礬膜制作而成。產(chǎn)品獨(dú)特的設(shè)計(jì)與制作工藝有利于降低溶質(zhì)極化導(dǎo)致濾膜結(jié)垢,防止過(guò)度離心使樣本干掉而造成樣本損失、降低離心時(shí)間,提高樣本回收率(回收率>90%)、同時(shí)保持溫和的濃縮環(huán)境以保持蛋白的活性和構(gòu)象。公司提供多種截留分子量的超濾離心管(10kD、30kD、50kD、10OkD),15ml離心過(guò)濾器可快速有效的濃縮純化多達(dá)15ml的生物樣品,,單支非滅菌包裝滿足實(shí)驗(yàn)室常用需求。同時(shí)公司也支持OEM定制。超濾離心管是一種將離心力和超濾技術(shù)相結(jié)合的一次性過(guò)濾裝置,在生物實(shí)驗(yàn)中為蛋白質(zhì)樣本的濃縮、脫鹽和緩沖交換提供可靠的數(shù)據(jù),與層析、透析等方法相比,超濾離心管處理分子更加溫和,不需要有機(jī)萃取,不會(huì)導(dǎo)致蛋白變性,操作快速且簡(jiǎn)單高效,在分離分子的同時(shí),濃縮倍數(shù)得到了大幅提高,濃縮效率得到了明顯提升。在使用超濾離心管時(shí),需要注意保持管子清潔、干燥和無(wú)污染。蘇州10K超濾離心管生產(chǎn)廠
超濾離心管也可用于免疫學(xué)研究和診斷,如T細(xì)胞啟用、細(xì)胞因子分析等。杭州10K超濾離心管排行榜
超濾作為一種膜分離技術(shù),普遍應(yīng)用于生物樣品的濃縮、脫鹽和緩沖液置換,其原理是溶液在力的作用下,通過(guò)超濾膜孔徑的篩濾,大分子量的顆粒被截留下來(lái),而水、溶劑和低分子量溶質(zhì)則允許透過(guò)膜,從而達(dá)到濃縮、脫鹽和緩沖液置換的目的,這種方法較大的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便、快速、高效,可同時(shí)濃縮和純化分子。如何使用超濾心離心管1. 使用角轉(zhuǎn)子加到超濾裝置上,較大樣本量為15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 將帶蓋過(guò)濾裝置放入離心機(jī)轉(zhuǎn)子內(nèi); 用一個(gè)類似的裝置來(lái)平衡。3. 使用定角轉(zhuǎn)子時(shí),將薄膜面板朝上定位,較大旋轉(zhuǎn) 5000 xg,旋轉(zhuǎn) 30 分鐘。4. 為了回收濃縮的溶質(zhì),在過(guò)濾裝置的底部插入一個(gè)移液管,通過(guò)左右掃動(dòng)的方式將樣品抽離,以保證總回收率。超濾液可貯存在離心管中。說(shuō)明:為達(dá)到較佳回收率,離心后應(yīng)立即取出濃縮樣品。杭州10K超濾離心管排行榜