超濾離心管的常見問題與解答,一:超濾離心管的膜材質(zhì)是什么?超濾離心管的膜材質(zhì)為特有的Ultracel再生纖維素膜,生產(chǎn)工藝嚴(yán)格,截留分子量明確而,蛋白吸附損失較小。二:如果要用超濾離心管的方法分離兩種蛋白,那么這兩個(gè)蛋白的大小需要相差多少?按照經(jīng)驗(yàn),建議兩個(gè)蛋白的分子量要相差一個(gè)數(shù)量級(jí)(10倍)。不保證超濾離心管不包含RNA酶,建議用0.1%DEPC在37度浸泡2小時(shí),以完全滅活RNA酶;殘留的DEPC可以用Milli-Q超純水洗滌除去。去污劑因其獨(dú)特的性質(zhì),當(dāng)濃度大于臨界微團(tuán)濃度(Critical Micelle Concentration、CMC)時(shí),去污劑分子會(huì)聚集形成微團(tuán)而改變分子構(gòu)象,這有可能會(huì)影響去污劑的去除效果,具體的操作步驟請(qǐng)垂詢我們。超濾離心管也可用于免疫學(xué)研究和診斷,如T細(xì)胞啟用、細(xì)胞因子分析等。浙江100K超濾離心管售價(jià)
一提起蛋白質(zhì)濃縮、更換緩沖液,我們都會(huì)想起超濾。這是一種我們都很熟悉的膜分離技術(shù)。它可用來分離溶液中極小的顆粒和溶解的分子。這種方法的較大特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,只需要濃縮離心管和離心機(jī),即可圓滿完成我們的任務(wù)。與層析、透析等方法相比,超濾對(duì)被處理的分子更加溫和。它不需要有機(jī)萃取,就不會(huì)導(dǎo)致蛋白變性。這種方法非常高效,可同時(shí)濃縮和純化分子。操作可在低溫(比如冷庫)下進(jìn)行。另外,快速、便宜,也是許多人青睞它的原因。濃縮離心管的操作很簡(jiǎn)單。選擇適當(dāng)?shù)臐饪s離心管,加入待處理的樣本,按照離心管的指示進(jìn)行離心操作,之后回收截留的樣本。在離心力的作用下,溶液中的小分子溶質(zhì)和溶劑透過超濾膜,被收集在濾過液收集瓶中,而大分子溶質(zhì)被超濾膜截留在濃縮離心管中。這種分離的主要依據(jù)是分子大小,但分子形狀和電荷等其他因素也會(huì)有影響。紹興超濾離心管使用超濾離心管時(shí),應(yīng)注意保持樣品干燥、無污染和清潔。
選擇合適的超濾管。通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對(duì)各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同。新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機(jī)預(yù)冷至4度)。不同離心機(jī)的轉(zhuǎn)速rpm換算成g之后,有所不同。
其實(shí),離心管是離心機(jī)中較重要的配件之一,它主要是用來承裝實(shí)驗(yàn)樣品的,我們使用離心機(jī)時(shí),首先需要用到的就是轉(zhuǎn)子,轉(zhuǎn)子里面需要放的就是離心管了。之所以說離心管是離心機(jī)較重要的配件之一是因?yàn)?,如果沒有離心管,樣品就沒辦法承裝。那么,了解過離心管的作用之后,你知道離心管應(yīng)該如何選擇嗎?相信連用過離心機(jī)的朋友都不會(huì)很清楚。那么接下來小編帶你了解一下離心管應(yīng)該如何選擇。想要了解離心管如何選擇就要先說到材質(zhì),離心管的材質(zhì)一般分為三種,一種是塑料離心管,第二種是玻璃離心管,第三種是鋼制離心管。超濾離心管通常被用于生物醫(yī)學(xué)中,以研究疾病細(xì)胞、干細(xì)胞等。
超濾離心管只需5到15分鐘,即可對(duì)50到500L樣本進(jìn)行簡(jiǎn)便、可靠的濃縮與脫鹽處理:快速處理樣本。通常,回收率高于90%;備有低蛋白質(zhì)結(jié)合的Omega、Bio-Inert或GHP濾膜可供選擇。對(duì)應(yīng)各種截留分子量,備有各種編碼以供輕松識(shí)別的顏色可供選擇。結(jié)構(gòu)材料為低結(jié)合聚丙烯。超聲焊接密封,防止側(cè)流或密封不嚴(yán)。適用于配合1.5mL試管的標(biāo)準(zhǔn)離心轉(zhuǎn)子。超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。雖然PES材料使非特異吸附較小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時(shí)候,會(huì)有問題。非特異結(jié)合的程度隨著個(gè)別蛋白結(jié)構(gòu)的不同而不同。使用超濾離心管時(shí)需要注意樣品制備和pH調(diào)整等實(shí)驗(yàn)步驟,以確保較佳結(jié)果。遼寧蛋白分離離心管廠家有哪些
超濾離心管還可用于檢測(cè)水中的微生物、化學(xué)物質(zhì)等,并進(jìn)行環(huán)境監(jiān)測(cè)和控制。浙江100K超濾離心管售價(jià)
避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時(shí)補(bǔ)加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。離心管是一個(gè)簡(jiǎn)單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。 超濾離心管通常不需要預(yù)處理即可使用,不過對(duì)于蛋白質(zhì)樣本處理,特別是較稀的蛋白質(zhì)溶液來說(<10ug/mL),用超濾膜濃縮回收率常常是不定量的。浙江100K超濾離心管售價(jià)