超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用。 使用注意事項 (1)選擇合適的超濾管。通常應截留分子量不應大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質(zhì)的耐受程度有所不同。 (2)新買來的超濾是干燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。 (3)平衡。質(zhì)量和重心二者都要達到平衡。注意轉(zhuǎn)速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。不同離心機的轉(zhuǎn)速 rpm換算成g之后,有所不同。離心機的加速度調(diào)至較低檔,減小對膜的壓力。超濾離心管可以用于制備樣品以進行下一步實驗,如電泳、質(zhì)譜等。北京30K超濾離心管訂做
玻璃離心管,大家都知道,玻璃是很容易碎的,所以如果我們選擇玻璃離心管時,離心機的離心力一定不能調(diào)得很高,還需要將玻璃離心管墊上橡膠墊,避免破碎,玻璃離心管的優(yōu)點是管體透明,利于觀察分離情況。鋼制離心管,鋼制離心管硬度大、抗熱、抗凍、不變形等優(yōu)點被普遍應用,一般鋼制離心管都會循環(huán)使用。離心管盡量選擇pp材質(zhì)的塑料離心管,也可以選鋼制的,玻璃材質(zhì)因為其容易破碎,分離轉(zhuǎn)速要求高,需將轉(zhuǎn)速控制在2000rpm/min內(nèi),所以通常情況下不做選擇。離心管的選擇還可以根據(jù)自己所分離樣品的大小來決定是選擇微量離心管、普通離心管、大容量離心管還是離心瓶。寧波10K超濾離心管哪家強超濾離心管可以根據(jù)不同孔徑大小選擇超濾膜,以便過濾出所需大小范圍內(nèi)的目標分子。
超濾離心管的分子量選擇:按照樣品量和目標分子量選擇適當?shù)某瑸V離心管,為了得到較高的收率,所選濾膜的截留分子量MWCO建議選擇所需截留分子大小的1/3左右,不超過目標分子量的一半。因為超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜上的孔并非均勻,離心高壓下也可能滲漏,因此截留孔徑越小,流速越慢但截留比例更大。如果樣本濃度低體積大,可選擇較小容積的超濾管多次重復加樣離心。如果同時需要脫鹽和去除可溶小分子雜質(zhì),可將待濃縮樣品稀釋到超濾管較大容積再離心,重復2次可除去99%鹽。避免過長時間或者過速離心,雖然優(yōu)良品質(zhì)的產(chǎn)品都有防死端設計,可避免過度離心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免過度濃縮,體積越小,越容易因表面吸附而損失得率。離心后用Tips輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率。盡量避免Tips接觸膜表面。
超濾離心管使用注意事項:當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩沖溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續(xù)加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發(fā)生蛋白沉淀,導致堵管。若發(fā)生沉淀,要確定沉淀的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,后者的方法是換不同的緩沖溶液,直到蛋白不發(fā)生沉淀為止。超濾離心管還可以用于檢測樣品中的元素、抗體等生物活性分子。
其實,離心管是離心機中較重要的配件之一,它主要是用來承裝實驗樣品的,我們使用離心機時,首先需要用到的就是轉(zhuǎn)子,轉(zhuǎn)子里面需要放的就是離心管了。之所以說離心管是離心機較重要的配件之一是因為,如果沒有離心管,樣品就沒辦法承裝。那么,了解過離心管的作用之后,你知道離心管應該如何選擇嗎?相信連用過離心機的朋友都不會很清楚。那么接下來小編帶你了解一下離心管應該如何選擇。想要了解離心管如何選擇就要先說到材質(zhì),離心管的材質(zhì)一般分為三種,一種是塑料離心管,第二種是玻璃離心管,第三種是鋼制離心管。超濾離心管可以通過手動或自動方式進行操作,以適應不同的實驗室流程要求。河南濃縮超濾離心管供應商
超濾離心管還可用于制備純度高的酶、蛋白質(zhì)等生物制品,以滿足不同實驗室和行業(yè)的需求。北京30K超濾離心管訂做
蛋白和多肽超濾離心管,垂直設計和有效的膜表面積提供了快速的樣品處理,較高的樣品回收率(> 90% 的樣品回收率),以及 80~100 倍濃縮的能力。濃縮物使用吸液器從過濾裝置中收集,而超濾液則在提供的離心管中收集。超濾離心管是一種可以為蛋白質(zhì)樣本的濃縮和緩沖交換提供可靠準確結(jié)果的一次性超濾離心式過濾裝置,與層析、透析等方法相比,超濾對被處理的分子更加溫和,不需要有機萃取,不會導致蛋白變性,且簡單高效。規(guī)格超濾濃縮器可處理體積4mL 以內(nèi)的樣本,離心管內(nèi)包含一個內(nèi)置豎直的聚醚砜(PES)膜過濾裝置,聚醚砜膜具備低蛋白附著、高通量的特點,可應用在3KD、5KD、10KD、30KD、50KD、100KD 六種不同的截留分子量中。截留分子量標識和體積刻度蝕刻在濃縮器的側(cè)面便于識別。北京30K超濾離心管訂做