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超濾離心管可以滅菌嗎?1. 超濾離心管使用75%的乙醇消毒。2. 不能121℃滅菌,否則會(huì)變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。3. 超濾管應(yīng)當(dāng)干燥保存,買回來的時(shí)候就是干的。當(dāng)然也可以濕潤保存,但是應(yīng)當(dāng)保存在20%的乙醇中,是為了防止沒洗去的殘留的液體長菌堵膜。4. 有人說濕潤保存不能干,指的是卷式和板式超濾膜。離心管是一個(gè)簡單的可以承受高轉(zhuǎn)速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉淀。超濾離心管會(huì)有一個(gè)類似于內(nèi)管和外管的兩個(gè)部分,內(nèi)管中是帶有一定分子量的膜,當(dāng)高速離心時(shí),分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內(nèi)管中),就是超濾的原理.常用于濃縮樣品。超濾離心管可以用于制備血液制品、免疫球蛋白等緩解藥物,以緩解某些自身免疫性疾病。遼寧高離心力離心管廠商
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,較常見的是10kD。到底選擇多大截留分子量比較合適呢?10kDa、 5kDa、還是30kDa?通常應(yīng)截留分子量不應(yīng)大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾 管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認(rèn)真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學(xué)物質(zhì)的耐受程度有所不同,表格中有。新買來的超濾是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預(yù)冷幾分鐘。然后將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂?shù)陌拙€為準(zhǔn)。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預(yù)冷。遼寧高離心力離心管廠商使用前應(yīng)先對超濾膜進(jìn)行濕潤化處理,以免損壞其結(jié)構(gòu)并保證較佳效果。
使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。這個(gè)我是聽老板們說的,的確乙醇泡完后孔徑會(huì)增大,基本就是5-10KD較大,也就是說如果你的蛋白在21KD以上,應(yīng)該沒問題?;蛘呖梢圆挥靡掖寂?,用NaOH洗之后直接用無菌水保存,每周換一下液體,應(yīng)該沒有問題??纯凑f明書不就結(jié)了!我原來在CRO的時(shí)候一直是重復(fù)用的,也沒見什么不好??!短期會(huì)用的話,用20%的乙醇泡著,回頭拼命用millipore的水充干凈,然后在用樣品緩沖液平衡一下就好,至于有些人說的改變孔徑,也沒那么大影響的,你至少跟目的蛋白分子量差別3倍的截留分子量才安全的不是嗎?1個(gè)月以內(nèi)不用的話,建議用100mM的NaOH保存!更長時(shí)間的話加0.02%的疊氮鈉,但那個(gè)東西強(qiáng)致疾病物,不建議使用。理論上截留目標(biāo)物,孔徑應(yīng)選1/3~1/5的膜;透過目標(biāo)物,孔徑應(yīng)選5-10倍的膜。
超濾離心管,備有四種材質(zhì)的超濾膜:聚醚砜、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據(jù)不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可將離心管放入離心機(jī)反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使?jié)饪s液達(dá)到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;新推出產(chǎn)品膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時(shí)候,輕輕加入新的Buffer(經(jīng)0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1ml左右,連續(xù)三次,之后一次的濃縮終體積根據(jù)需要的蛋白濃度而定,一般不多于500ul,也有濃縮至200ul以內(nèi)的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達(dá)到1000倍以上,基本上可以達(dá)到換buffer的目的。超濾離心管可以用于分離各種生物樣品,如血漿、細(xì)胞培養(yǎng)液、酶溶液等。
在選擇過程中,應(yīng)首先執(zhí)行以下步驟:1考慮樣品和分子特性:比如改變pH 可能增加構(gòu)象改變的風(fēng)險(xiǎn),而降低溫度可能降低濃縮效率等。2、選擇正確的膜:眾所周知,超濾沒有太多的膜選項(xiàng),但您應(yīng)對再生纖維素和聚醚砜(PES)材料進(jìn)行測試,以確定哪種材料可為您的特定材料提供較低的非特異性結(jié)合和較優(yōu)的回收率。3、選擇合適的截留分子量,通常是靶標(biāo)1/3大小的截留分子量較適合。但有時(shí)則需要更小的孔徑來滿足回收率的要求。如果在病毒和核酸樣品,可參看下面截留分子量和病毒顆粒分子大小以及核酸大小的換算表。選擇合適的裝置:賽多利斯擁有適用于低濃度樣品、DNA、蛋白質(zhì)、病毒、過濾應(yīng)用等普遍的裝置選項(xiàng);選擇合適的裝置可以有效改善結(jié)果。超濾離心管可以有效地去除溶液中的雜質(zhì),使樣品更純凈。四川30K超濾離心管價(jià)錢多少
使用超濾離心管時(shí)應(yīng)注意避免過度壓力造成膜堵塞或損壞,并影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。遼寧高離心力離心管廠商
注意:超濾離心管中的濾膜一旦潤濕 后應(yīng)避免變干。如果在預(yù)清洗后不是立即使用,則讓液體保留在濾膜上,直到使用。6.使用方法:1).將超濾內(nèi)管插入所提供的一個(gè)微量離心管中。2).向超濾管內(nèi)管中加入不超過500 μL的樣本,并蓋上蓋子。3).將蓋好蓋子的超濾管放入離心轉(zhuǎn)子中,讓蓋子的連接帶朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管平衡。4).以14,000 x g離心約10-30分鐘,具體時(shí)間取決于所使用超濾管的NMWL。5).離心結(jié)束后將整個(gè)超濾管從離心機(jī)中取出,取出內(nèi)管。6).為了回收濃縮后的溶質(zhì),將內(nèi)管倒過來插在-個(gè)干凈的微量離心管中。放在離心機(jī)中,讓打開的蓋子朝著轉(zhuǎn)子的中間;用一個(gè)類似的超濾管進(jìn)行平衡。以1 ,000 x g離心2分鐘,使?jié)饪s后的樣本從超濾內(nèi)管轉(zhuǎn)移到收集管中。超濾液可以保存在收集管中。遼寧高離心力離心管廠商