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在體光纖成像記錄相干斷層掃描的局限性是單能掃描生物組織表面下1-2毫米的深度。這是由于深度越大,光線無(wú)散射的射出表面的比例就越小,以至于無(wú)法檢測(cè)到。但是在檢測(cè)過(guò)程中不需要樣品制備過(guò)程,成像過(guò)程也不需要接觸被成像的組織。更重要的是,設(shè)備產(chǎn)生的激光是對(duì)人眼安全的近紅外線,因此幾乎不會(huì)對(duì)組織造成傷害。使用光學(xué)反向散射或后向反射的測(cè)量成像組織的內(nèi)部橫截面微結(jié)構(gòu),像在體外在人的視網(wǎng)膜上,并在一個(gè)其他的病因斑塊在透明,弱散射介質(zhì)和不透明的。在體光纖成像記錄待成像物體所處環(huán)境為血管,支氣管。南京神經(jīng)元成像光纖網(wǎng)站
小動(dòng)物在體光纖成像記錄圖像處理軟件除了提供含有光子強(qiáng)度標(biāo)尺的成像圖片外,還能計(jì)算分析發(fā)光面積、總光子數(shù)、光子強(qiáng)度的相關(guān)參數(shù)供實(shí)驗(yàn)者參考。原則上,如預(yù)實(shí)驗(yàn)時(shí)拍攝出圖片非特異性雜點(diǎn)多,需降低曝光時(shí)間;反之,如信號(hào)過(guò)弱可適當(dāng)延長(zhǎng)曝光時(shí)間。但曝光時(shí)間的延長(zhǎng),不單增加了目的信號(hào),對(duì)于背景噪音也存在一個(gè)放大效應(yīng)。同一批實(shí)驗(yàn)應(yīng)保持一致的曝光時(shí)間,同時(shí)還應(yīng)保持標(biāo)本相對(duì)位置和形態(tài)的一致,從而減少實(shí)驗(yàn)誤差。進(jìn)行熒光成像時(shí),實(shí)驗(yàn)者可選擇背景熒光低不容易反光的黑紙放在動(dòng)物標(biāo)本身下,減少金屬載物臺(tái)的反射干擾。深圳鈣熒光指示蛋白病毒光纖成像記錄技術(shù)在體光纖成像記錄需要許多數(shù)據(jù)點(diǎn)。
根據(jù)在體光纖成像記錄成像方式的不同, 在體生物發(fā)光成像主要有生物發(fā)光成像,和生物發(fā)光斷層成像兩種。其中,輸出是二維圖像, 即生物體外探測(cè)器上采集的光學(xué)信號(hào),其原理簡(jiǎn)單、 使用方便快捷, 適用于 定性分析及簡(jiǎn)單的定量計(jì)算, 但無(wú)法獲得生物體內(nèi)發(fā)光光源的深度信息, 難以實(shí)現(xiàn)光源的準(zhǔn)確定位。 而成像系統(tǒng)則利用 多個(gè)生物體外探測(cè)器上采集的光學(xué)信號(hào), 根據(jù)斷層成像的原理, 采用特定的 反演算法 ,得到活的物體小動(dòng)物體 內(nèi)發(fā)光光源的精確位置信息。目前, BLT的光源定位和生物組織光學(xué)特性參數(shù)的反演問(wèn)題 已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外在體生物光學(xué)成像研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)之一, 但還限于于實(shí)驗(yàn)室研究階段, 沒(méi)有達(dá)到臨床實(shí)驗(yàn)的階段, 所 以尚未有成熟的成像系統(tǒng)。
在體光纖成像記錄的優(yōu)點(diǎn)可以非侵入性,實(shí)時(shí)連續(xù)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)體內(nèi)的各種生物學(xué)過(guò)程,從而可以減少實(shí)驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量,及降低個(gè)體間差異的影響;由于背景噪聲低,所以具有較高的敏感性;不需要外源性激發(fā)光,避免對(duì)體內(nèi)正常細(xì)胞造成損傷,有利于長(zhǎng)期觀察;此外還有無(wú)放射性等其他優(yōu)點(diǎn)。然而生物發(fā)光也有自身的不足之處:例如波長(zhǎng)依賴性的組織穿透能力,光在哺乳動(dòng)物組織內(nèi)傳播時(shí)會(huì)被散射和吸收,光子遇到細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)時(shí)會(huì)發(fā)生折射,而且不同類型的細(xì)胞和組織吸收光子的特性也不盡相同,其中血紅蛋白是吸收光子的主要物質(zhì);由于是在體外檢測(cè)體內(nèi)發(fā)出的信號(hào),因而受到體內(nèi)發(fā)光源位置及深度影響;另外還需要外源性提供各種熒光素酶的底物,且底物在體內(nèi)的分布與藥動(dòng)力學(xué)也會(huì)影響信號(hào)的產(chǎn)生;由于熒光素酶催化的生化反應(yīng)需要氧氣、鎂離子及 ATP 等物質(zhì)的參與,受到體內(nèi)環(huán)境狀態(tài)的影響。在體光纖成像記錄和散射介質(zhì)成像的機(jī)理既有關(guān)聯(lián)。
在體監(jiān)測(cè)基因療于中的基因表達(dá),隨著 后基因組時(shí)代的到來(lái)和人們對(duì)疾病發(fā)生的發(fā)展機(jī)制的深入了解, 在基因水平上療于壞掉的、 心血管疾病、 和分子遺傳病等惡性疾病已經(jīng)得到國(guó)內(nèi)外研究人員越來(lái)越 較多的關(guān)注。如何客觀地檢測(cè)基因療于的臨床療效判斷終點(diǎn), 有效監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)基因在生物體內(nèi)的傳送, 并定量檢測(cè)基因療于的轉(zhuǎn)基因表達(dá), 己經(jīng)成為 基因療于應(yīng)用的關(guān)鍵所在 。通過(guò)熒光素酶或綠色熒光蛋白等報(bào)告基因, 在體光纖成像記錄能夠進(jìn)行基因表達(dá)的準(zhǔn)確定位和定量分析, 在整體水平上無(wú)創(chuàng)、 實(shí)時(shí)、 定量地檢測(cè)轉(zhuǎn)基因的時(shí)空表達(dá)。有關(guān)生命活動(dòng)的小分子在體光纖成像記錄等都可以被標(biāo)記。福州在體實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)光纖記錄
在體生物發(fā)光成像不需要外部光源激發(fā)。南京神經(jīng)元成像光纖網(wǎng)站
在體光纖成像記錄和傳統(tǒng)的體外成像或細(xì)胞培養(yǎng)相比有著明顯優(yōu)點(diǎn)。首先,在體光纖成像記錄能夠反映細(xì)胞或基因表達(dá)的空間和時(shí)間分布,從而了解活的物體動(dòng)物體內(nèi)的相關(guān)生物學(xué)過(guò)程、特異性基因功能和相互作用。由于可以對(duì)同一個(gè)研究個(gè)體進(jìn)行長(zhǎng)時(shí)間反復(fù)查看成像,既可以進(jìn)步數(shù)據(jù)的可比性,避免個(gè)體差異對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的可影響,又不需要?dú)⑺滥J絼?dòng)物,節(jié)省了大筆科研用度。第三,尤其在藥物開發(fā)方面,在體光纖成像記錄更是具有劃時(shí)代的意義。根據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果,由于進(jìn)進(jìn)臨床研究的藥物中大部分由于安全題目而終止,導(dǎo)致了在臨床研究中大量的資金浪費(fèi)。南京神經(jīng)元成像光纖網(wǎng)站