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根據(jù)在體光纖成像記錄成像方式的不同, 在體生物發(fā)光成像主要有生物發(fā)光成像,和生物發(fā)光斷層成像兩種。其中,輸出是二維圖像, 即生物體外探測(cè)器上采集的光學(xué)信號(hào),其原理簡(jiǎn)單、 使用方便快捷, 適用于 定性分析及簡(jiǎn)單的定量計(jì)算, 但無法獲得生物體內(nèi)發(fā)光光源的深度信息, 難以實(shí)現(xiàn)光源的準(zhǔn)確定位。 而成像系統(tǒng)則利用 多個(gè)生物體外探測(cè)器上采集的光學(xué)信號(hào), 根據(jù)斷層成像的原理, 采用特定的 反演算法 ,得到活的物體小動(dòng)物體 內(nèi)發(fā)光光源的精確位置信息。目前, BLT的光源定位和生物組織光學(xué)特性參數(shù)的反演問題 已經(jīng)成為國(guó)內(nèi)外在體生物光學(xué)成像研究的重點(diǎn)和難點(diǎn)之一, 但還限于于實(shí)驗(yàn)室研究階段, 沒有達(dá)到臨床實(shí)驗(yàn)的階段, 所 以尚未有成熟的成像系統(tǒng)。在體光纖成像記錄和散射介質(zhì)成像的機(jī)理既有關(guān)聯(lián)。鎮(zhèn)江在體實(shí)時(shí)影像光纖網(wǎng)站
在體光纖成像記錄可見光成像體內(nèi)可見光成像包括生物發(fā)光與熒光兩種技術(shù)。生物發(fā)光是用熒光素酶基因標(biāo)記DNA,利用其產(chǎn)生的蛋白酶與相應(yīng)底物發(fā)生生化反應(yīng)產(chǎn)生生物體內(nèi)的光信號(hào);而熒光技術(shù)則采用熒光報(bào)告基因(GFP、RFP)或熒光染料(包括熒光量子點(diǎn))等新型納米標(biāo)記材料進(jìn)行標(biāo)記,利用報(bào)告基因產(chǎn)生的生物發(fā)光、熒光蛋白質(zhì)或染料產(chǎn)生的熒光就可以形成體內(nèi)的生物光源。前者是動(dòng)物體內(nèi)的自發(fā)熒光,不需要激發(fā)光源,而后者則需要外界激發(fā)光源的激發(fā)。揚(yáng)州蛋白病毒光纖成像記錄技術(shù)服務(wù)公司在體光纖成像記錄標(biāo)記與藥物代謝有關(guān)的基因。
在體光纖成像記錄是基于多模光纖的微弱熒光信號(hào)檢測(cè)和記錄系統(tǒng),該系統(tǒng)能夠長(zhǎng)時(shí)間穩(wěn)定的激發(fā)熒光,并檢測(cè)熒光信號(hào)的微弱變化。用于在體記錄動(dòng)物群體神經(jīng)元活動(dòng)鈣信號(hào)的動(dòng)態(tài)變化,在腦功能研究中具有較多的用途,其具體特點(diǎn)和應(yīng)用如下:1、儀器高度集成化,只需一臺(tái)儀器,配合光纖記錄系統(tǒng)電腦端軟件則可以進(jìn)行實(shí)時(shí)的記錄及數(shù)據(jù)分析,實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)單便捷,實(shí)驗(yàn)前無需調(diào)試設(shè)備;2、儀器穩(wěn)定性及可移動(dòng)性強(qiáng),較高有4通道版本,可同時(shí)記錄4只動(dòng)物或一只動(dòng)物4個(gè)位點(diǎn)。較高采樣率達(dá)20000 HZ,信噪比高。3、所有傳輸光路通過光纖耦合,具有很強(qiáng)的抗干擾能力,同時(shí)不受外界光纖干擾。
對(duì)生物體內(nèi)的突觸結(jié)構(gòu)和蛋白進(jìn)行空間分布的研究時(shí),成像系統(tǒng)需要具備高的成像速度,防止出現(xiàn)生物體移動(dòng)造成的重影現(xiàn)象;成像的超高動(dòng)態(tài)范圍和熒光信號(hào)的超高線性度:像的熒光強(qiáng)度計(jì)數(shù)需要具有對(duì)的的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義證明實(shí)驗(yàn)結(jié)論的正確性,因此圖像的熒光強(qiáng)度值必須能夠精確反映體內(nèi)蛋白、基因濃度的高低,這需要檢測(cè)器具有超高的動(dòng)態(tài)范圍能夠同時(shí)記錄強(qiáng)信號(hào)和弱信號(hào),并且在此動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)圖像計(jì)數(shù)值與真實(shí)的熒光信號(hào)對(duì)的線性變化以正確反映蛋白、基因的濃度。在體光纖成像記錄硬件也有助于保證較高的成像質(zhì)量。
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在體光纖成像記錄直接標(biāo)記法不涉及細(xì)胞的遺傳修飾,標(biāo)價(jià)能夠在體外培養(yǎng)時(shí)主動(dòng)與細(xì)胞結(jié)合,也可以將標(biāo)記直接注射到動(dòng)物體內(nèi),間接標(biāo)記法,將報(bào)告基因引入細(xì)胞,并翻譯成酶、受體、熒光或生物發(fā)光蛋白如果報(bào)告基因的表達(dá)是穩(wěn)定的,標(biāo)記的細(xì)胞可以在整個(gè)細(xì)胞的生命周期中被觀察到。由于報(bào)告基因通常被傳遞給后代細(xì)胞,因此細(xì)胞增殖也能夠得到體現(xiàn)。體內(nèi)標(biāo)記是指將探針直接注射進(jìn)入機(jī)體,常用的標(biāo)記方法是靜脈注射氧化鐵納米顆粒。光學(xué)成像方法可分為基于熒光的方法和基于生物發(fā)光的方法。鎮(zhèn)江在體實(shí)時(shí)影像光纖網(wǎng)站