很好的胎牛血清對細(xì)胞成長的作用:提供細(xì)胞生長所需的天然或天然的生長因子。提供天然的結(jié)合蛋白,能識別氨基酸、脂質(zhì)、金屬離子和等,能結(jié)合并調(diào)節(jié)它們的活性。已知清蛋白即具有上述功能,并對細(xì)胞代謝、生物合成、增殖和存活具有潛在的影響。又如胎牛血清中富含胎球蛋白,具有多個鈣離子結(jié)合位點,因而能調(diào)節(jié)和維持血清中的鈣離子濃度。天然含有粘附蛋白等細(xì)胞外基質(zhì)成分,促進(jìn)細(xì)胞的附著、鋪展。提供醫(yī)治功能。這主要通過血清中的某些蛋白與有毒的金屬離子結(jié)合來完成的。如金屬硫蛋白,對多種重金屬有高度親和性,并可消除細(xì)胞生長環(huán)境中的氧自由基,具有很強(qiáng)的抗氧化活性,可防止細(xì)胞衰老。提供酸堿度緩沖的作用,以及維持滲透壓。提供蛋白酶抑制劑,使細(xì)胞免受蛋白酶的損傷。因此在細(xì)胞消化時,常用含血清的培養(yǎng)液終止胰酶對細(xì)胞的作用。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。寧波標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清多少錢
多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細(xì)胞的生長,卻降低了支持細(xì)胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。所以胎牛血清不推薦熱滅活。熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補(bǔ)體,以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補(bǔ)體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預(yù)免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導(dǎo)致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進(jìn)而影響細(xì)胞培養(yǎng)效果。揚州去外泌體血清哪里有熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因為此加熱步驟,可以使補(bǔ)體去活化。
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
國內(nèi)科研人員購買胎牛血清的現(xiàn)狀:難辨真假。 原因很多,一方面是國內(nèi)血清市場這幾年是愈發(fā)的混亂了,很多商家都盯上了這塊“蛋糕”,現(xiàn)在國內(nèi)市場能見到的各種來源的血清品牌大于50種,使用者在不了解國家政策和相關(guān)知識的前提下很難去辨別和選擇安全、穩(wěn)定、合規(guī)的胎牛血清。另一方面是客戶很難找到血清相關(guān)的真實信息,即便想去分辨也無從下手,只能聽商家的了。現(xiàn)在允許進(jìn)口的血清產(chǎn)地很少,只有南美(烏拉圭)、澳大利亞、新西蘭。對血清行業(yè)有些了解的人看到這些,就會知道能夠進(jìn)口到國內(nèi)的胎牛血清注定是很少的。胎牛血清是品質(zhì)高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分較為少。
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點是與血漿較為大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。小牛血清取自出生10-30天的小牛。寧波標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清多少錢
大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。寧波標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清多少錢
血清為何要熱滅活,有必要對所有血清都滅活嗎?如何正確的進(jìn)行滅活?加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動的補(bǔ)體系統(tǒng)參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,啟動淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究中,培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時,推薦使用熱滅清。實驗顯示,熱滅清對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,對于非必須的細(xì)胞來說血清滅活對于細(xì)胞生長只有微小甚至無任何作用,還可能造成生長速率降低,沉淀物還會明顯增多,不利于細(xì)胞觀察。因此,若非必須,不需要對血清進(jìn)行滅活處理。將需要進(jìn)行處理的血清置于56℃水浴30min,建議加放空白對照(同體積水)使用溫度計測溫,以測得溫度為56℃時為計時起始點,加熱中可不時輕度旋轉(zhuǎn)混勻血清。寧波標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清多少錢