隨著熒光標(biāo)記技術(shù)和光學(xué)成像技術(shù)的發(fā)展, 在體生物光學(xué)成像(In vivo optical imaging)已經(jīng)發(fā)展 為一項(xiàng)嶄新的分子、 基因表達(dá)的分析檢測(cè)技術(shù),在 生命科學(xué)、 醫(yī)學(xué)研究及藥物研發(fā)等領(lǐng)域得到較多應(yīng)用, 主要分為在體生物發(fā)光成像(Bioluminescence imaging,BLI) , 和在體熒光成像,在體光纖成像記錄(Fluorescence imaging)兩種成像方式。 在體生物發(fā)光成像采用熒光素酶基因標(biāo)記細(xì)胞或DNA, 在體熒光成像則采用熒光報(bào)告基團(tuán), 如綠色熒光蛋白, 紅色熒光蛋白等進(jìn)行標(biāo)記 , 利用靈敏的光學(xué)檢測(cè)儀器, 如電荷耦合攝像機(jī) (CCD), 觀測(cè)活的物體動(dòng)物體內(nèi)疾病的發(fā)生的發(fā)展、 壞掉的的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移、 基因的表達(dá)及反應(yīng)等生物學(xué)過(guò)程, 從而監(jiān)測(cè)活的物體生物體內(nèi)的細(xì)胞活動(dòng)和基因行為。在體光纖成像記錄技術(shù)是在散射介質(zhì)(或稱為隨機(jī)介質(zhì))成像的基礎(chǔ)上發(fā)展。鎮(zhèn)江在體光纖記錄服務(wù)公司
動(dòng)物體內(nèi)很多物質(zhì)在受到激發(fā)光激發(fā)后,會(huì)發(fā)出熒光,產(chǎn)生的非特異性熒光會(huì)影響到檢測(cè)靈敏度。背景熒光主要是來(lái)源于皮毛和血液的自發(fā)熒光,皮毛中的黑色素是皮毛中主要的自發(fā)熒光源,其發(fā)光光線波長(zhǎng)峰值在 500 一 520 nm 左右,在利用綠色熒光作為成像對(duì)象時(shí),影響較為嚴(yán)重,產(chǎn)生的非特異性熒光會(huì)影響到檢測(cè)靈敏度和特異性。動(dòng)物尿液或其他雜質(zhì)如沒(méi)有及時(shí)打掃,成像中也會(huì)出現(xiàn)非特異性信號(hào)。由于各廠商的圖像分析軟件不同,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析方法也有區(qū)別?;畹奈矬w成像系統(tǒng)使用時(shí),實(shí)驗(yàn)者考慮到非特異性雜信號(hào),以及成像圖片美觀等方面,可能會(huì)調(diào)節(jié)信號(hào)的閾值,因此在在體光纖成像記錄分析信號(hào)光子數(shù)或信號(hào)面積時(shí),應(yīng)考慮閾值的改變對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。正確選擇 ROI 區(qū)域,可提高分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。蕪湖實(shí)時(shí)影像光纖在體光纖成像記錄為實(shí)現(xiàn)成像,需要將光束聚焦成很小的光點(diǎn)。
在體光纖成像記錄就是生物樣本的造影技術(shù),依照樣本尺度大小可以概分為組織造影與細(xì)胞分子的顯微技術(shù)。這些大致都需要光學(xué)技術(shù)配合生物樣本的特性發(fā)展,少數(shù)會(huì)使用光以外的波動(dòng)性質(zhì)將圖像光信號(hào)變?yōu)殡娦盘?hào)的器件,它是利用少數(shù)載流子的注入、存儲(chǔ)和轉(zhuǎn)移等物理過(guò)程來(lái)完成幾種電路功能的器件,具有體積小、重量輕、功耗低、可靠性好、無(wú)損傷現(xiàn)象、能抗震以及光譜響應(yīng)寬等特點(diǎn),是展示臺(tái)的輸入設(shè)備,是攝像頭的心臟。利用信號(hào)整形之類的技術(shù)可以得到高質(zhì)量數(shù)據(jù),此外高精度成像硬件也有助于保證較高的成像質(zhì)量。
小動(dòng)物在體光纖成像記錄可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要通過(guò)尾靜脈注射、皮下移植、原位移植等方法接種已標(biāo)記的細(xì)胞或組織。在建模時(shí)應(yīng)認(rèn)真考慮實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮瓦x擇熒光標(biāo)記,如標(biāo)記熒光波長(zhǎng)短,則穿透效率不高,建模時(shí)不宜接種深部臟器和觀察體內(nèi)轉(zhuǎn)移,但可以觀察皮下瘤和解剖后臟器直接成像。深部臟器和體內(nèi)轉(zhuǎn)移的觀察大多選用熒光素酶標(biāo)記。小鼠經(jīng)過(guò)常規(guī)麻醉(氣麻、針麻皆可)后放入成像暗箱平臺(tái),軟件控制平臺(tái)的升降到一個(gè)合適的視野,自動(dòng)開(kāi)啟照明燈(明場(chǎng))拍攝首先一次背景圖。下一步,自動(dòng)關(guān)閉照明燈,在沒(méi)有外界光源的條件下(暗場(chǎng))拍攝由小鼠體內(nèi)發(fā)出的特異光子。明場(chǎng)與暗場(chǎng)的背景圖疊加后可以直觀的顯示動(dòng)物體內(nèi)特異光子的部位和強(qiáng)度,完成成像操作。值得注意的是熒光成像應(yīng)選擇合適的激發(fā)和發(fā)射濾片,生物發(fā)光則需要成像前體內(nèi)注射底物激發(fā)發(fā)光。實(shí)時(shí)觀測(cè)動(dòng)物在進(jìn)行復(fù)雜行為時(shí)的神經(jīng)投射活動(dòng)。
在體光纖成像記錄直接標(biāo)記法不涉及細(xì)胞的遺傳修飾,標(biāo)價(jià)能夠在體外培養(yǎng)時(shí)主動(dòng)與細(xì)胞結(jié)合,也可以將標(biāo)記直接注射到動(dòng)物體內(nèi),間接標(biāo)記法,將報(bào)告基因引入細(xì)胞,并翻譯成酶、受體、熒光或生物發(fā)光蛋白如果報(bào)告基因的表達(dá)是穩(wěn)定的,標(biāo)記的細(xì)胞可以在整個(gè)細(xì)胞的生命周期中被觀察到。由于報(bào)告基因通常被傳遞給后代細(xì)胞,因此細(xì)胞增殖也能夠得到體現(xiàn)。體內(nèi)標(biāo)記是指將探針直接注射進(jìn)入機(jī)體,常用的標(biāo)記方法是靜脈注射氧化鐵納米顆粒。光學(xué)成像方法可分為基于熒光的方法和基于生物發(fā)光的方法。在體光纖成像記錄在腦功能研究中具有較多的用途。鎮(zhèn)江在體光纖記錄服務(wù)公司
在體光纖成像記錄實(shí)現(xiàn)了人類追求綠色健康的夢(mèng)想。鎮(zhèn)江在體光纖記錄服務(wù)公司
在體光纖成像記錄在軟組織傳播而成像,由于無(wú)輻射、操作簡(jiǎn)單、圖像直觀、價(jià)格便宜等優(yōu)勢(shì)在臨床上較多應(yīng)用。在小動(dòng)物研究中,由于所達(dá)到組織深度的限制和成像的質(zhì)量容易受到骨或軟組織中的空氣的影響而產(chǎn)生假象。所以超聲不像其他動(dòng)物成像技術(shù)那樣應(yīng)用較多,應(yīng)用主要集中在生理結(jié)構(gòu)易受外界影響的膀胱和血管,此外小動(dòng)物超聲在轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的產(chǎn)前發(fā)育研究中有很大優(yōu)勢(shì)。隨著分子生物學(xué)及相關(guān)技術(shù)的發(fā)展,各種成像技術(shù)應(yīng)用更較多,成像系統(tǒng)要求能對(duì)的定量、分辨率高、標(biāo)準(zhǔn)化、數(shù)字化、綜合性、在系統(tǒng)中對(duì)分子活動(dòng)敏感并與其他分子檢測(cè)方式互相補(bǔ)償及整合。與此同時(shí),作為動(dòng)物顯像的技術(shù)平臺(tái),動(dòng)物成像技術(shù)將在生命科學(xué)、醫(yī)藥研究中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。鎮(zhèn)江在體光纖記錄服務(wù)公司