很好的胎牛血清:微生物,包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過0.1μm過濾,大多也能消除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴(yán)重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底消除,但對血清質(zhì)量影響不大。病原毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進(jìn)口胎牛血清相對國產(chǎn)血清而言,檢出率不高。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。湖州OriCell胎牛血清廠家
牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。湖州OriCell胎牛血清廠家血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。
如何儲存和解凍血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復(fù)凍融。我們建議血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。血清中包含絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?沉淀包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正常特性,不會影響產(chǎn)品性質(zhì)。要除去沉淀,離心血清(400g,1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶子底部,將血清小心的轉(zhuǎn)移到另一個無菌瓶里(一般不建議采用過濾的方法除去沉淀,因為沉淀會堵塞濾膜而無法過濾)。大多情況輕輕搖動沉淀并加熱至37℃就會再溶解。所以,使用產(chǎn)品時要搖動并加熱血清至37℃,沉淀會自然消失。
胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)重要的培養(yǎng)基且不可替代,它是采自5-8個月胎齡牛胚胎中的胎血。此時胎牛各臟器正處生長分化階段,血中含有豐富的生長發(fā)育因子,非常適合各種細(xì)胞的培養(yǎng)。因此,如何在使用過程中保護(hù)這些因子的活性,達(dá)到較為大的細(xì)胞培養(yǎng)效果,就需要正確地使用胎牛血清。正確地使用胎牛血清可分為以下四個方面:正確儲存,避免反復(fù)凍融:血清在-20°C凍存。血清避免反復(fù)凍融,以免降低因子活性。如一次用不完,應(yīng)進(jìn)行分裝。血清和培養(yǎng)基應(yīng)盡可能“現(xiàn)用現(xiàn)配”,配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免在4°C或更高溫度靜置過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。血清的主要作用是提供促接觸和生長因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。
因為制作工藝成熟和產(chǎn)量大的原因,實驗室常備血清一般都為牛血清。而牛血清種類也因適合培養(yǎng)不同種類的細(xì)胞分很多種了,同屬于牛血清為什么它們價格卻有天壤之別。我們就拿市面上應(yīng)用較為廣的胎牛血清和新生牛血清為例。除了生產(chǎn)成本和供應(yīng)來源不一樣外,兩種血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時,將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可較為大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產(chǎn)量低,成本高。二者的成分也很不一樣。和新生牛血清相比,胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外,還含有豐富的胚胎生長促進(jìn)因子以及各種還未完全鑒定的成分,可滿足所培養(yǎng)細(xì)胞的特殊的代謝需求。人和動物的血清常用以進(jìn)行各種血清學(xué)試驗,幫助診斷疾病。福州無外泌體胎牛血清供應(yīng)商
胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。湖州OriCell胎牛血清廠家
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。湖州OriCell胎牛血清廠家