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小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項(xiàng)?來(lái)源不同:胎牛血清 是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過(guò)心臟穿刺獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清采自出生10至14 天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng),而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過(guò)一個(gè)月。解凍血清時(shí) ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會(huì)增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份。廈門(mén)OriCell血清
國(guó)際上流行的【血清融化三步法】可較為大限度地保存血清中因子的活性,不會(huì)產(chǎn)生沉淀,同時(shí)能縮短血清融化時(shí)間。關(guān)于胎牛血清的滅活:真正的胎牛血清因?yàn)樘ヅ](méi)有形成有效補(bǔ)體,如果針對(duì)補(bǔ)體滅活的話,就不需要。其他情況根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)來(lái)決定。胎牛血清的濃度:胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混合后配成完全培養(yǎng)基。曾有文獻(xiàn)報(bào)道,不同胎牛血清濃度對(duì)細(xì)胞存在一定的影響,尤其是干細(xì)胞和原代細(xì)胞。具體很好濃度需要用戶根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)來(lái)確定,以既保證培養(yǎng)的效果,又避免血清的浪費(fèi)。淮安進(jìn)口胎牛血清廠家胎牛血清提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較為高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分較為少。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無(wú)溶血、無(wú)異物稍粘稠液體;蛋白質(zhì)含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v);無(wú)菌檢驗(yàn):陰性;支原體檢驗(yàn): 陰性;細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。
添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在,會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn),除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。注意解凍的方法:再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時(shí)候,要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn),事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來(lái),便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國(guó)際通用的解方式解凍血清。每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。
那么如何保障胎牛血清的品質(zhì)呢:內(nèi)有毒的,內(nèi)有毒的含量越低的血清,胎牛血清級(jí)別就越高:內(nèi)有毒的≤10EU/ml時(shí),此血清為特級(jí)胎牛血清;10EU/ml<內(nèi)有毒的≤ 25EU/ml時(shí),此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清;內(nèi)有毒的≥ 25EU/ml時(shí),此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清;應(yīng)選取內(nèi)有毒的含量低的胎牛血清,使培養(yǎng)的細(xì)胞更健康。如果選取內(nèi)有毒的較高的血清,細(xì)胞一直泡在“毒液”里,短期內(nèi)細(xì)胞看不出太明顯的變化,但長(zhǎng)期的話細(xì)胞會(huì)衰老得較快,從而對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成嚴(yán)重影響。微生物:微生物包括細(xì)菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類(lèi)病原毒等。嚴(yán)格的生產(chǎn)工藝可以對(duì)細(xì)菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制。同時(shí)3次0.1um過(guò)濾可以完全祛除支原體(支原體直徑0.2~0.3um)。通過(guò)病毒的檢測(cè),可以嚴(yán)格控制牛腹瀉、牛細(xì)小、藍(lán)舌病等病毒。通過(guò)非瘋牛病疫區(qū)生產(chǎn)還可避免朊病毒。小牛血清取自出生10-30天的小牛。廈門(mén)OriCell血清
人和動(dòng)物的血清常用以進(jìn)行各種血清學(xué)試驗(yàn),幫助診斷疾病。廈門(mén)OriCell血清
很好的胎牛血清:好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無(wú)沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說(shuō)明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說(shuō)明血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象。胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說(shuō)明的牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。標(biāo)準(zhǔn)為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。國(guó)產(chǎn)血清,大多高于ph7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于ph7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來(lái)初步鑒別血清的來(lái)源。廈門(mén)OriCell血清
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