在體光纖成像記錄是了解生物體組織結(jié)構(gòu),闡明生物體各種生理功能的一種重要研究手段。它利用光學(xué)或電子顯微鏡直接獲得生物細胞和組織的微觀結(jié)構(gòu)圖像,通過對所得圖像的分析來了解生物細胞的各種生理過程。近年來,隨著光學(xué)成像技術(shù)的發(fā)展,尤其是數(shù)字化成像技術(shù)和計算機圖像分析技術(shù)的引進,生物成像技術(shù)已經(jīng)成為細胞生物學(xué)研究中不可或缺的方法。未來生物成像技術(shù)的發(fā)展除了進一步提高圖像的分辨率外,還需要增強成像的實時性和連續(xù)性,以期實現(xiàn)對單個生物功能分子的體內(nèi)連續(xù)追蹤,詳細地記錄其生理過程,從而完全揭示其生物學(xué)功能。另外,生物成像技術(shù)在臨床醫(yī)學(xué)診斷中的應(yīng)用也越來越受到重視,發(fā)展無損傷的體內(nèi)成像技術(shù)是其在疾病診斷中較多應(yīng)用的重要前提。在體光纖成像記錄需要許多數(shù)據(jù)點。南京神經(jīng)元光纖成像記錄技術(shù)服務(wù)
在體光纖成像記錄藥物代謝相關(guān)研究,標記與藥物代謝有關(guān)的基因,研究不同藥物對該基因表達的影響,從而間接獲知相關(guān)藥物在體內(nèi)代謝的情況。在藥劑學(xué)研究方面,可通過把熒光素酶報告基因質(zhì)粒直接裝在載體中,觀察藥物載體的靶向臟器與體內(nèi)分布規(guī)律。在藥理學(xué)方面,可用熒光素酶基因標記目的基因,觀察藥物作用的通路,免疫細胞研究:標記免疫細胞,觀察免疫細胞對壞掉的細胞的識別和殺死功能,評價免疫細胞的免疫特異性、增殖、遷移等功能。干細胞研究:標記組成性表達的基因,在轉(zhuǎn)基因動物水平,標記干細胞,若將干細胞移植到另外動物體內(nèi),可用活的物體生物發(fā)光成像技術(shù)示蹤干細胞在體內(nèi)的增殖、分化及遷移的過程。南京神經(jīng)元光纖成像記錄技術(shù)服務(wù)將使科學(xué)家能夠控制在體光纖成像記錄。
在體光纖成像記錄是基于多模光纖的微弱熒光信號檢測和記錄系統(tǒng),該系統(tǒng)能夠長時間穩(wěn)定的激發(fā)熒光,并檢測熒光信號的微弱變化。用于在體記錄動物群體神經(jīng)元活動鈣信號的動態(tài)變化,在腦功能研究中具有較多的用途,其具體特點和應(yīng)用如下:1、儀器高度集成化,只需一臺儀器,配合光纖記錄系統(tǒng)電腦端軟件則可以進行實時的記錄及數(shù)據(jù)分析,實驗簡單便捷,實驗前無需調(diào)試設(shè)備;2、儀器穩(wěn)定性及可移動性強,較高有4通道版本,可同時記錄4只動物或一只動物4個位點。較高采樣率達20000 HZ,信噪比高。3、所有傳輸光路通過光纖耦合,具有很強的抗干擾能力,同時不受外界光纖干擾。
在體光纖成像記錄對于成像結(jié)果的處理,需要依賴專業(yè)的圖像分析軟件,分割出目的信號和背景噪聲,獲得準確的熒光強度值。光學(xué)成像方法可分為基于熒光的方法和基于生物發(fā)光的方法。光學(xué)相對于設(shè)備小且較便宜?;畹奈矬w顯微成像的缺點是它的有創(chuàng)性,因為需要通過手術(shù)創(chuàng)造一個窗口來觀察感興趣的結(jié)構(gòu)和組織。宏觀層析熒光成像可以無創(chuàng)、定量和三維方式測定熒光,但其空間分辨率比活的物體顯微鏡低(約1毫米)。光學(xué)成像的根本缺點是光的組織穿透率低。由于吸收和散射,熒光發(fā)射的可見光譜中的光只能穿透幾百微米的組織。這個問題限制了大多數(shù)光學(xué)方法在小動物或人類表面結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用。使用近紅外光譜能夠提高信號的組織穿透能力,并能降低了組織的自體熒光。在體光纖成像記錄為實現(xiàn)成像,需要將光束聚焦成很小的光點。
小動物在體光纖成像記錄圖像處理軟件除了提供含有光子強度標尺的成像圖片外,還能計算分析發(fā)光面積、總光子數(shù)、光子強度的相關(guān)參數(shù)供實驗者參考。原則上,如預(yù)實驗時拍攝出圖片非特異性雜點多,需降低曝光時間;反之,如信號過弱可適當延長曝光時間。但曝光時間的延長,不單增加了目的信號,對于背景噪音也存在一個放大效應(yīng)。同一批實驗應(yīng)保持一致的曝光時間,同時還應(yīng)保持標本相對位置和形態(tài)的一致,從而減少實驗誤差。進行熒光成像時,實驗者可選擇背景熒光低不容易反光的黑紙放在動物標本身下,減少金屬載物臺的反射干擾。在體光纖成像記錄能夠?qū)λ幬锖Y選及療效進行評價。南京神經(jīng)元光纖成像記錄技術(shù)服務(wù)
在體光纖成像記錄集成信號采集與數(shù)字同步模塊。南京神經(jīng)元光纖成像記錄技術(shù)服務(wù)
在體生物發(fā)光成像不需要外部光源激發(fā), 自發(fā)熒光少,而在體光纖成像記錄,需要特定波長的外部激發(fā)光源激發(fā), 自發(fā)熒光較多, 故前者比后者靈敏度更高, 在體生物發(fā)光斷層成像原型系統(tǒng), 主要由 CCD相機、 固定小動物的支架、 控制裝置 (使支架水平運動、 垂直運動或旋轉(zhuǎn)) 、完全密閉的不透光的成像暗箱等組成。將小動物麻醉后固定在支架上, 并置于成像暗箱中, 由控制裝置帶動支架沿水平方向運動、 垂直方向運動或旋轉(zhuǎn), 利用相機從多個不同角度和位置對活的物體小動物的生物發(fā)光現(xiàn)象進行投影成像 然后將采集到的數(shù)據(jù)信息傳輸?shù)接嬎銠C中, 并采用特定的圖像重建算法定位動物體內(nèi)的發(fā)光光源, 得到活的物體動物體內(nèi)發(fā)光光源的精確位置信息。南京神經(jīng)元光纖成像記錄技術(shù)服務(wù)
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