細(xì)胞培養(yǎng)是很多下游實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，細(xì)胞培養(yǎng)的好壞會(huì)直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功和穩(wěn)定，而胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的主要試劑對實(shí)驗(yàn)的重要性不言而喻！胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基，因?yàn)樘ヅＮ催M(jìn)食過母乳，所以IgG含量低，且含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份，故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)，具有極為重要的功能。提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的，基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物，以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白，能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他等，能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合，起到醫(yī)治作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑，使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活，保護(hù)細(xì)胞不受傷害。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較為大的天然培養(yǎng)基，含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份。寧波優(yōu)級(jí)胎牛血清哪家好

胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛；新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。顯然，胎牛血清是品質(zhì)較為高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分較為少。胎牛血清：性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體；蛋白質(zhì)含量：3.5%～5.0%（ w/v）；血紅蛋白含量 ≤ 0.02%（ w/v）；無菌檢驗(yàn)：陰性；支原體檢驗(yàn)： 陰性；細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5（EU/ml）；牛腹瀉病毒：陰性；大腸桿菌噬菌體：陰性。黃山特級(jí)血清瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法：-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。

如何避免血清中產(chǎn)生沉淀？按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生：解凍血清時(shí)，請隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時(shí)，須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久，否則血清會(huì)變得渾濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞，從而影響血清的品質(zhì)。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活，請遵守56℃，30分鐘的原則，并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高，時(shí)間過久或搖晃不均勻，都會(huì)造成沉淀物的增多。

購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會(huì)表現(xiàn)出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養(yǎng)細(xì)胞的寶寶會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題。那么,血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么?纖維蛋白,它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物,可以達(dá)到1-2mm,可以用肉眼觀察到。磷酸鈣,它也是常見的一種沉淀物,通常會(huì)使血清出現(xiàn)渾濁,并且在37℃培養(yǎng)的時(shí)候會(huì)增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點(diǎn),這些小黑點(diǎn)由于布朗運(yùn)動(dòng)看上去可以活動(dòng),因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì),它們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見原因。關(guān)于細(xì)胞生長,其實(shí)很多試驗(yàn)以及經(jīng)驗(yàn)表明沉淀物不會(huì)影響細(xì)胞培養(yǎng),當(dāng)然血清生產(chǎn)商也是這樣說的。胎牛血清支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)　生長曲線（接種濃度）大增殖濃度≥2.5×106 個(gè)/ml。

細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎？如何處理？一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：細(xì)胞生長過老，破碎的細(xì)胞殘??；血清質(zhì)量不好，反復(fù)凍融的結(jié)果；配制培養(yǎng)基的pH值偏高，不宜細(xì)胞生長；配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格?？蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn)；培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn)，可能是原代組織中的雜質(zhì)，多次傳代可以消除。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。寧波優(yōu)級(jí)胎牛血清哪家好

胎牛血清：性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。寧波優(yōu)級(jí)胎牛血清哪家好

因?yàn)橹谱鞴に嚦墒旌彤a(chǎn)量大的原因，實(shí)驗(yàn)室常備血清一般都為牛血清。而牛血清種類也因適合培養(yǎng)不同種類的細(xì)胞分很多種了，同屬于牛血清為什么它們價(jià)格卻有天壤之別。我們就拿市面上應(yīng)用較為廣的胎牛血清和新生牛血清為例。除了生產(chǎn)成本和供應(yīng)來源不一樣外，兩種血清的成分也很不相同。胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時(shí)，將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可較為大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈。和新生牛血清相比，胎牛血清顯然產(chǎn)量低，成本高。二者的成分也很不一樣。和新生牛血清相比，胎牛血消除了免疫球蛋白含量很低之外，還含有豐富的胚胎生長促進(jìn)因子以及各種還未完全鑒定的成分，可滿足所培養(yǎng)細(xì)胞的特殊的代謝需求。寧波優(yōu)級(jí)胎牛血清哪家好

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