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胎牛血清的主要成分:蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進(jìn)細(xì)胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用)、纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著生長)等;多肽類,主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂的生長因子,較為主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對(duì)細(xì)胞的生長和分裂也起著重要作用;類,對(duì)細(xì)胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);類胰島素生長因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:促生長:促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng);氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中 的氫化可的松,在細(xì)胞密度較高時(shí)可能有抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁。東莞標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清報(bào)價(jià)
細(xì)胞培養(yǎng)是很多下游實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),細(xì)胞培養(yǎng)的好壞會(huì)直接影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)的成功和穩(wěn)定,而胎牛血清作為細(xì)胞培養(yǎng)的主要試劑對(duì)實(shí)驗(yàn)的重要性不言而喻!胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基,因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,故目前多數(shù)實(shí)驗(yàn)人員選擇的都是胎牛血清進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到醫(yī)治作用。是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。東莞標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清報(bào)價(jià)血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶?jī)隽选?/p>
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較為高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分較為少。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體;蛋白質(zhì)含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v);無菌檢驗(yàn):陰性;支原體檢驗(yàn): 陰性;細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內(nèi)抽出,放入試管中,不加抗凝劑,則凝血反應(yīng)被,血液迅速凝固,形成膠凍。凝血塊收縮,其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清,也可于凝血后經(jīng)離心取得。在凝血過程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白塊,所以血清中無纖維蛋白原,這一點(diǎn)是與血漿較為大的區(qū)別。而在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),各凝血因子也都發(fā)生了變化。這些成分都留在血清中并繼續(xù)發(fā)生變化,如凝血酶原變成凝血酶,并隨血清存放時(shí)間逐漸減少以至消失。這些也都是與血漿區(qū)別之處。但大量未參加凝血反應(yīng)的物質(zhì)則與血漿基本相同。為避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析,都以血清為樣品。血清的成份可能有幾百種之多,對(duì)其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚。
血清為何要熱滅活,有必要對(duì)所有血清都滅活嗎?如何正確的進(jìn)行滅活?加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動(dòng)的補(bǔ)體系統(tǒng)參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究中,培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅清。實(shí)驗(yàn)顯示,熱滅清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,對(duì)于非必須的細(xì)胞來說血清滅活對(duì)于細(xì)胞生長只有微小甚至無任何作用,還可能造成生長速率降低,沉淀物還會(huì)明顯增多,不利于細(xì)胞觀察。因此,若非必須,不需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。將需要進(jìn)行處理的血清置于56℃水浴30min,建議加放空白對(duì)照(同體積水)使用溫度計(jì)測(cè)溫,以測(cè)得溫度為56℃時(shí)為計(jì)時(shí)起始點(diǎn),加熱中可不時(shí)輕度旋轉(zhuǎn)混勻血清。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機(jī)物等。東莞標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清報(bào)價(jià)
將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。東莞標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清報(bào)價(jià)
未經(jīng)檢疫的胎牛血清可能攜帶傳染性物質(zhì),一旦流入境內(nèi),將會(huì)對(duì)人民**的生命健康造成重大威脅,如可能帶有瘋牛病病毒、牛病毒性腹瀉病毒、牛細(xì)小病毒、狂犬病毒或其他傳染性物質(zhì),具有極高的檢疫風(fēng)險(xiǎn)。此外,不合格的血清對(duì)實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性、穩(wěn)定性和真實(shí)性也會(huì)造成嚴(yán)重影響。無合格質(zhì)檢的胎牛血清存在支原體、病毒等污染,這對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)造成嚴(yán)重不良影響;工藝不規(guī)范導(dǎo)致溶血,溶血較嚴(yán)重的血清含有許多胞內(nèi)產(chǎn)物,對(duì)細(xì)胞有刺激作用,影響實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和數(shù)據(jù)的真實(shí)性;血清批次不穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)結(jié)果難以重復(fù)。東莞標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清報(bào)價(jià)
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