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如何解凍血清?血清解凍需采用逐步解凍法:將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解,然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉(zhuǎn)入37℃解凍,這樣因溫差較大易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)并出現(xiàn)沉淀。需要對新買的血清進(jìn)行過濾嗎?血清在ISO13485認(rèn)證的廠房中生產(chǎn),經(jīng)過3次0.1μm過濾,出廠經(jīng)過檢測并且會(huì)使用三種以上的細(xì)胞株進(jìn)行培養(yǎng)測試及無菌檢測,污染幾率非常低。通常細(xì)胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進(jìn)行分析檢測,結(jié)果表明絕大部分都是因人為操作失誤導(dǎo)致污染。因此買來的血清不需要再次進(jìn)行過濾。胎牛血清的牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。鹽城優(yōu)級胎牛血清價(jià)格
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:解凍血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多?;窗矁?yōu)級胎牛血清多少錢請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁。
胎牛血清用于細(xì)胞培養(yǎng)不過百年歷史,但發(fā)展得相當(dāng)快,每年的需求量也不斷上升。在胎牛血清和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的方面,國外起步較早,認(rèn)識也較深入。應(yīng)該說,胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)基方面,具有的優(yōu)勢。因?yàn)槠錉I養(yǎng),所以幾乎適合所有類型的細(xì)胞生長,每種細(xì)胞都可以從中攝取自己所需的養(yǎng)分。而且,胎牛血清還含有適合細(xì)胞貼壁鋪展以及抗氧化和醫(yī)治的成分,這使得它成為天然通用的很好培養(yǎng)基。據(jù)研究,胎牛血清中含有至少四百多種成分,而且這些成分的含量在不同批次的血清中存在波動(dòng),有時(shí)甚至波動(dòng)較大。因此,在持續(xù)使用胎牛血清時(shí),要注意盡量同一批次的。通常,同一批次的血清數(shù)量有限,一次大約不超過2000升。因此,在更換批次時(shí),要注意觀察細(xì)胞的生長和狀態(tài)。
血清的常見問題:保存方法,血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。解凍方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物:解凍血清時(shí),請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清有免疫,維持酸堿平衡和滲透壓的作用,血清蛋白質(zhì)亦可儲(chǔ)備供給機(jī)體蛋白質(zhì)不足時(shí)的應(yīng)用。
胎牛血清的主要成分:蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進(jìn)細(xì)胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用)、纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著生長)等;多肽類,主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂的生長因子,較為主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細(xì)胞的生長和分裂也起著重要作用;類,對細(xì)胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);類胰島素生長因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:促生長:促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng);氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中 的氫化可的松,在細(xì)胞密度較高時(shí)可能有抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。解凍血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。鹽城優(yōu)級胎牛血清價(jià)格
血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。鹽城優(yōu)級胎牛血清價(jià)格
為何血清會(huì)存在批間差?如何避免此影響?因?yàn)檠鍋碓从趧?dòng)物,其組成成分有1000種左右,每個(gè)批號的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對細(xì)胞的影響,XP建議先進(jìn)行批號測試,篩選合適的批號,備好庫存(血清未開封時(shí),在-20℃下可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用后再大量訂購。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何預(yù)防和處理沉淀?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘連蛋白,磷酸鈣[1](顯微鏡下小黑點(diǎn)沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復(fù)凍融,長期儲(chǔ)存于2-8℃或者室溫。預(yù)防措施與建議:因此不立即使用的血清應(yīng)保存在-20℃或以下。鹽城優(yōu)級胎牛血清價(jià)格
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