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熱滅活:一般是以56℃,30分鐘來處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活化,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和。有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅清,對大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長速率的降低。而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒立顯微鏡下觀察,像是 "小黑點(diǎn)",常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。購買的時(shí)候注意詢問廠家是否是已滅清。血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年。東莞OriCell血清價(jià)格
添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在,會使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn),除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會極其不利于細(xì)胞的正常生長。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。注意解凍的方法:再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時(shí)候,要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會增大的特點(diǎn),事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國際通用的解方式解凍血清。韶關(guān)OriCell血清價(jià)格血清的主要作用:提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長必須的物質(zhì)。
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:解凍血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。勿將血清置于37℃太久,否則血清會變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多。
胎牛血清的主要成分:蛋白質(zhì)類包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促進(jìn)細(xì)胞附著)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(能結(jié)合鐵離子,減少其毒性和被細(xì)胞利用)、纖維粘連素(促進(jìn)細(xì)胞附著生長)等;多肽類,主要是一些促進(jìn)細(xì)胞生長和分裂的生長因子,較為主要的生長因子是血小板生長因子,還有成纖維細(xì)胞生長因子、表皮細(xì)胞生長因子、神經(jīng)細(xì)胞生長因子等,雖然在血清中含量很少,但對細(xì)胞的生長和分裂也起著重要作用;類,對細(xì)胞的作用是多方面的。包括:胰島素:促進(jìn)細(xì)胞攝取葡萄糖和氨基酸,與促細(xì)胞分裂有關(guān);類胰島素生長因子:能與細(xì)胞表達(dá)的胰島素受體結(jié)合,從而有胰島素同樣的作用:促生長:促進(jìn)細(xì)胞增殖的效應(yīng);氫化可的松:血清中含有微量該成分,它可能具有促細(xì)胞貼附和增殖作用。但有人證明,血清中 的氫化可的松,在細(xì)胞密度較高時(shí)可能有抑制細(xì)胞生長和誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生分化的作用。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機(jī)物等。
不同產(chǎn)地的胎牛血清,品質(zhì)也是相差甚遠(yuǎn)。值得注意的是,胎牛血清是動物源生物制品,我國對于動物源制品的進(jìn)口一直有很嚴(yán)格的規(guī)定,目前我國批準(zhǔn)進(jìn)口的胎牛血清來源是澳大利亞、新西蘭和烏拉圭,合法正規(guī)途徑進(jìn)口的胎牛血清必須在產(chǎn)品包裝上標(biāo)注血源地。這意味著,其他血源地的胎牛血清在我國是不允許進(jìn)口的,在選購進(jìn)口產(chǎn)品時(shí),要規(guī)避選取來源為禁止輸入國家的相關(guān)產(chǎn)品。合法進(jìn)口的胎牛血清需符合我國海關(guān)和檢驗(yàn)檢疫部門的監(jiān)管要求,具備真實(shí)完整的進(jìn)口貨物報(bào)關(guān)單和出入境檢驗(yàn)檢疫入境貨物檢驗(yàn)檢疫證明。選購胎牛血清時(shí),需要核對廠家是否能提供購買批次的進(jìn)口報(bào)關(guān)單和檢驗(yàn)檢疫證書,烏拉圭來源的血清還必須具有出口許可證,確保產(chǎn)品來源安全可追溯。胎牛血清的其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚?;窗矘?biāo)準(zhǔn)血清品牌
血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。東莞OriCell血清價(jià)格
胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較為高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分較為少。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體;蛋白質(zhì)含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v);無菌檢驗(yàn):陰性;支原體檢驗(yàn): 陰性;細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。東莞OriCell血清價(jià)格
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