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胎牛血清的處理方法主要有以下幾種:1.活性炭處理,活性炭可以與親脂性分子結(jié)合,因此已用于從FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮質(zhì)醇、睪酮、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)。這些血清脂質(zhì)Hormone傾向于干擾免疫測定系統(tǒng)和胰島素測定方法。2.透析,透析可以從FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。這包括極性和非極性分子。去除細(xì)胞因子、葡萄糖、氨基酸和許多其他物質(zhì)。透析還可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。胎牛血清含有豐富的細(xì)胞生長必須的營養(yǎng)成份,常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng)。臺州特級胎牛血清
胎牛血清的作用:胎牛血清提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的Hormone,胎牛血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。胎牛血清提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,胎牛血清能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。胎牛血清是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。臺州特級胎牛血清胎牛血清經(jīng)自然層析、離心后收集得到去除血細(xì)胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體。
如何區(qū)別真假胎牛血清:沉淀,很多血清客戶,會發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題,這是沒有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國產(chǎn)的血清,大多來自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采的血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會經(jīng)過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過濾后看起來反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。澄清度,進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進(jìn)行對比,可容易分辨。
活性炭處理胎牛血清的應(yīng)用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關(guān)的細(xì)胞研究實(shí)驗(yàn)。同時(shí)活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長因子,減少了影響細(xì)胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無菌過濾內(nèi)的毒性≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對細(xì)胞有害的成分較少。血清的主要作用是提供基本營養(yǎng)物質(zhì)、提供和各種生長因子、提供結(jié)合蛋白。
胎牛血清對細(xì)胞貼壁中的作用:在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),大部分來自實(shí)體組織感官的細(xì)胞會貼壁。它們在機(jī)體內(nèi)時(shí),也是與其他細(xì)胞或者細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)合的,貼壁對維持細(xì)胞的良好形態(tài)和促進(jìn)細(xì)胞的增殖有益處。有人培養(yǎng)許旺細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)貼壁良好的細(xì)胞,其增殖率也較高。人的造血干細(xì)胞培養(yǎng),更是需要有貼壁細(xì)胞構(gòu)成“造血微環(huán)境”。有人發(fā)現(xiàn)這些貼壁細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞,巨噬細(xì)胞,上皮樣細(xì)胞,脂肪細(xì)胞,它們交錯連接,構(gòu)成網(wǎng)狀支架結(jié)構(gòu)。培養(yǎng)基中加入牛血清,對于粘附細(xì)胞的貼壁也很有幫助。牛血清中含有玻連蛋白、纖黏連蛋白,對細(xì)胞粘附都有促進(jìn)作用。需注意,熱滅活小牛血清會降低血清對細(xì)胞粘附的促進(jìn)作用,尤其在細(xì)胞旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)時(shí)更為明顯。反復(fù)凍融會破壞胎牛血清中有效成分,影響血清品質(zhì)。紹興OriCell血清
胎牛血清常用于動物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。臺州特級胎牛血清
胎牛血清如何采取?在牛屠宰過程中,如發(fā)現(xiàn)母牛懷孕,就應(yīng)立即將生殖系統(tǒng)從尸體中分離出來,在無菌條件下從子宮中取出小牛,進(jìn)行臍帶打結(jié)處理,清理羊水并消毒。在胎兒兩肋之間直接插入一根針頭到心臟,在真空的條件下,血液通過導(dǎo)管被抽入無菌的血液收集袋內(nèi)。在沒有真空泵時(shí),也可將血液收集袋放在胎牛身體下面,通過重力作用或按摩方式進(jìn)行收集。血液收集后,放在低溫條件下凝集,經(jīng)過離心去掉凝集物而獲得血清。胎牛血清的獲得量取決于胎兒的大小和年齡。胎兒至少3個月,否則會因心臟太小而不便于操作。一個3月齡的胎兒可產(chǎn)生150mL的血清;6月齡和9月齡的胎兒可分別產(chǎn)生350mL和550mL血清。臺州特級胎牛血清
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