胎牛血清:解凍胎牛血清時,請按照規(guī)定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。杭州標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清價格
胎牛血清的作用:胎牛血清提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的Hormone,胎牛血清基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。胎牛血清提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,胎牛血清能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。胎牛血清是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。起酸堿度緩沖液作用。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。廣州優(yōu)級胎牛血清多少錢胎牛血清適合脈沖示蹤實驗(同位素標(biāo)記研究細(xì)胞代謝)適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選。
胎牛血清的處理方法有:熱滅活,F(xiàn)BS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。目的是滅活FBS中存在的補體系統(tǒng)的任何成分,以及其他潛在的未知細(xì)胞生長抑制劑。以前熱滅活也是為了去除支原體污染,這不再是一個問題,因為現(xiàn)在所有的血清產(chǎn)品都通過小到足以去除支原體的孔徑進(jìn)行過濾。必須注意的是,熱滅活也可能產(chǎn)生不良影響,例如降低培養(yǎng)細(xì)胞附著在表面上的能力。熱滅活過程必須小心進(jìn)行,因為溫度過高或長時間加熱會使生長因子失活,并產(chǎn)生沉淀物。
胎牛血清:在細(xì)胞培養(yǎng)過程,質(zhì)量粗糙的FBS可能會導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象,從而導(dǎo)致實驗受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗證的FBS,則可以十分確定這款FBS對哪些細(xì)胞具有良好的培養(yǎng)效果,進(jìn)而判斷其能否把自己的細(xì)胞養(yǎng)好。對于質(zhì)量好的FBS,通常采用血清敏感性細(xì)胞(如干細(xì)胞)來進(jìn)行培養(yǎng)驗證,若培養(yǎng)效果良好,則其他常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)就更不在話下。FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品,其生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣、食物供應(yīng)、經(jīng)濟(jì)條件和牛群規(guī)模等各種因素的影響,導(dǎo)致血清的供應(yīng)可能出現(xiàn)貨源、價格及批次間的不穩(wěn)定性,從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去,國內(nèi)外已有多個實驗室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導(dǎo)致實驗結(jié)果無法重復(fù)的情況,浪費了巨大的時間和金錢成本。胎牛血清支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14) 生長曲線(接種濃度)大增殖濃度≥2.5×106 個/ml。
胎牛血清:胎牛血清參與細(xì)胞培養(yǎng),是細(xì)胞生長天然的培養(yǎng)基,它為細(xì)胞提供生長因子、結(jié)合蛋白、脂質(zhì)、礦物質(zhì)、黏附和鋪展因子等來促進(jìn)體外細(xì)胞培養(yǎng)。透析胎牛血清主要用于可能需要關(guān)注小分子濃度的特殊研究。這主要包括四個領(lǐng)域:蛋白質(zhì)組學(xué)、同位素標(biāo)記、細(xì)胞通訊以及報告基因細(xì)胞系的篩選,其中有些領(lǐng)域是相互交叉的。以下稍作舉例。將13C或15N標(biāo)記的氨基酸摻入到培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞,來標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)新合成的蛋白質(zhì),一般培養(yǎng)5-6代,細(xì)胞中的蛋白質(zhì)將都被同位素標(biāo)記。然后質(zhì)譜分析,即可比較經(jīng)過不同處理的細(xì)胞,其內(nèi)部蛋白質(zhì)豐度的變化。胎牛血清的牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。金華優(yōu)級血清品牌
胎牛血清起到為細(xì)胞提供營養(yǎng)、支持、保護(hù)的作用。杭州標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清價格
胎牛血清:胎牛血清初次解凍后,應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。若置于4°C的血清,應(yīng)在一周內(nèi)用完。為保證細(xì)胞培養(yǎng)的較佳效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。血清避免反復(fù)凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子。杭州標(biāo)準(zhǔn)級胎牛血清價格
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