胎牛血清的處理方法有:熱滅活,F(xiàn)BS的常見處理方法是熱滅活,其中將FBS在56°C的水浴中加熱30分鐘,偶爾搖晃。目的是滅活FBS中存在的補體系統(tǒng)的任何成分,以及其他潛在的未知細胞生長抑制劑。以前熱滅活也是為了去除支原體污染,這不再是一個問題,因為現(xiàn)在所有的血清產(chǎn)品都通過小到足以去除支原體的孔徑進行過濾。必須注意的是,熱滅活也可能產(chǎn)生不良影響,例如降低培養(yǎng)細胞附著在表面上的能力。熱滅活過程必須小心進行,因為溫度過高或長時間加熱會使生長因子失活,并產(chǎn)生沉淀物。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾?;窗操悩I(yè)血清哪家好
胎牛血清:在細胞培養(yǎng)過程,質(zhì)量粗糙的FBS可能會導(dǎo)致細胞出現(xiàn)生長速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象,從而導(dǎo)致實驗受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗證的FBS,則可以十分確定這款FBS對哪些細胞具有良好的培養(yǎng)效果,進而判斷其能否把自己的細胞養(yǎng)好。對于質(zhì)量好的FBS,通常采用血清敏感性細胞(如干細胞)來進行培養(yǎng)驗證,若培養(yǎng)效果良好,則其他常規(guī)細胞系的培養(yǎng)就更不在話下。FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品,其生產(chǎn)在本質(zhì)上會受到天氣、食物供應(yīng)、經(jīng)濟條件和牛群規(guī)模等各種因素的影響,導(dǎo)致血清的供應(yīng)可能出現(xiàn)貨源、價格及批次間的不穩(wěn)定性,從而造成實驗的不順甚至實驗失敗。在過去,國內(nèi)外已有多個實驗室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導(dǎo)致實驗結(jié)果無法重復(fù)的情況,浪費了巨大的時間和金錢成本。蕪湖標準胎牛血清廠家胎牛血清具有極為重要的功能。
如何區(qū)別真假胎牛血清:1、血紅蛋白,標準為不高于20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高,反之,數(shù)值越低。2、pH,國產(chǎn)血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān),這也能用來初步鑒別血清的來源。3、微生物。包括細菌、霉菌、支原體、噬菌體、各類病原性的病毒等。隨著國內(nèi)血清廠家生產(chǎn)條件的改善提高,細菌、霉菌等“大型”微生物幾乎能100%控制,支原體經(jīng)過0.1um過濾,大多也能清理。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產(chǎn)環(huán)境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底清理,但對血清質(zhì)量影響不大。病原性的病毒,特別是BVDV,在國產(chǎn)血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產(chǎn)血清質(zhì)量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。
細胞培養(yǎng)用到的胎牛血清需要滅活嗎:細胞培養(yǎng)胎牛血清是不可或缺重要培養(yǎng)基,胎牛血清中含有諸多細胞生長因子,維生素,氨基酸等物質(zhì)。我們常會看到胎牛血清的標注上有對產(chǎn)品滅活也有沒有滅活的,胎牛血清為什么不需要熱滅活便可以使用。事實上,熱滅活目的是為了去除血清中補體等對熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對補體的滅活則明顯沒有必要。胎牛血清中含有的C1,C6單單達成年動物血清的1-3%,而其它補體成分單單有成年動物的5-50%,至于補體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌(180℃2小時)后,按無菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動瓶內(nèi)生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時,再放入4℃冷庫4小時以備離心。胎牛血清指的是取自未出生,母牛剖腹得來的胎牛。鎮(zhèn)江標準血清價格
胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用的天然培養(yǎng)基。淮安賽業(yè)血清哪家好
如何挑選好的胎牛血清:好的胎牛血清是實驗的成功的前提是所有實驗人做細胞培養(yǎng)的共識,如何挑選好的胎牛血清,可以從以下幾個方面著手。1.外觀,好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說明,血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白,標準為不高于,20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。4、pH國產(chǎn)血清,大多高于7.5,進口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān)。淮安賽業(yè)血清哪家好
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