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胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)證明,經(jīng)過正確處理的熱滅活胎牛血清,對(duì)于大多數(shù)的細(xì)胞而言都是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至可能因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,從而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此類沉淀物增加得更多,這常常會(huì)使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議客戶,若非必須,可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省客戶寶貴的時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量。胎牛血清的無菌檢驗(yàn):陰性;支原體檢驗(yàn): 陰性;細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml)。鹽城細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清多少錢
胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別?胎牛血清(FoetalBovineSerum,簡(jiǎn)稱FBS):胎牛血清是指懷孕3-8個(gè)月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺采的血后,通過一系列工藝處理獲得。此時(shí)胎牛血中含有特殊的生長(zhǎng)發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會(huì)自動(dòng)消失。新生牛血清(NewbornCalfSerum,簡(jiǎn)稱NBCS):出生14小時(shí)內(nèi)未進(jìn)食的新生牛,通常采用頸動(dòng)脈采集血液分離得到的血清。小牛血清(CalfSerum):出生后3天至6月齡小牛動(dòng)脈采的血分離血清。成年牛血清(AdultBovineSerum,簡(jiǎn)稱ABS)指的是屠宰時(shí)收集全血后分離得到血清。金華進(jìn)口血清胎牛血清提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。
胎牛血清:胎牛血清是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無機(jī)物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。其中不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子。胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)也較低,是理想的細(xì)胞生長(zhǎng)補(bǔ)充劑。所有胎牛血清均在當(dāng)?shù)孬F醫(yī)部門的監(jiān)督下從注冊(cè)的出口屠場(chǎng)采集,符合國(guó)際動(dòng)物協(xié)會(huì)要求。
胎牛血清融化方法:只要2.5個(gè)小時(shí),溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時(shí)間,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過程中,蛋白質(zhì)會(huì)比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白,血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中較大限度地保留因子的活性,就變得非常重要?;貞浺幌?,細(xì)胞復(fù)蘇時(shí),要保持細(xì)胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個(gè)半小時(shí),4℃過夜需要大約10個(gè)小時(shí)(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實(shí)驗(yàn)室融化時(shí)間會(huì)稍有出入)。血清的保存應(yīng)該注意:需要長(zhǎng)期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。
胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時(shí)之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗(yàn)陰性。5、支原體檢驗(yàn)陰性。6、細(xì)菌內(nèi)的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒陰性。8、大腸桿菌噬菌體陰性。9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長(zhǎng)曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個(gè)/ml,細(xì)胞倍增時(shí)間≤15h克隆率≥85%。胎牛血清在水浴過程中,胎牛血清的液面要完全浸在水中。常州標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清價(jià)格
我們常會(huì)看到胎牛血清的標(biāo)注上有對(duì)產(chǎn)品滅活也有沒有滅活的。鹽城細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清多少錢
胎牛血清:在細(xì)胞培養(yǎng)過程,質(zhì)量粗糙的FBS可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)生長(zhǎng)速度緩慢、不貼壁、容易老化等現(xiàn)象,從而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)受阻。經(jīng)過質(zhì)量驗(yàn)證的FBS,則可以十分確定這款FBS對(duì)哪些細(xì)胞具有良好的培養(yǎng)效果,進(jìn)而判斷其能否把自己的細(xì)胞養(yǎng)好。對(duì)于質(zhì)量好的FBS,通常采用血清敏感性細(xì)胞(如干細(xì)胞)來進(jìn)行培養(yǎng)驗(yàn)證,若培養(yǎng)效果良好,則其他常規(guī)細(xì)胞系的培養(yǎng)就更不在話下。FBS作為其他行業(yè)的副產(chǎn)品,其生產(chǎn)在本質(zhì)上會(huì)受到天氣、食物供應(yīng)、經(jīng)濟(jì)條件和牛群規(guī)模等各種因素的影響,導(dǎo)致血清的供應(yīng)可能出現(xiàn)貨源、價(jià)格及批次間的不穩(wěn)定性,從而造成實(shí)驗(yàn)的不順甚至實(shí)驗(yàn)失敗。在過去,國(guó)內(nèi)外已有多個(gè)實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)過因血清批間差異大而導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果無法重復(fù)的情況,浪費(fèi)了巨大的時(shí)間和金錢成本。鹽城細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清多少錢
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