如何區(qū)別真假胎牛血清:外觀,拿到血清,較先接觸的是血清外觀,對(duì)于缺少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人來說,外觀的判斷尤為重要,顏色根據(jù)血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現(xiàn)出黃色或紅色,我國(guó)的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl,實(shí)際上,血紅蛋白含量的高低對(duì)血清并無直接影響,這個(gè)指標(biāo)的意義在于能體現(xiàn)出采的血過程的嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范程度,良好的操作能降低血清的溶血。國(guó)產(chǎn)血清的點(diǎn)很分散,大多是由屠戶采的血后馬上離心收集,所以很少會(huì)有溶血,表現(xiàn)出明亮的蠟黃色,當(dāng)然,國(guó)產(chǎn)血清也很少有標(biāo)準(zhǔn)意義上的胎牛血清。進(jìn)口胎牛血清或多或少總有點(diǎn)溶血,因?yàn)檎嬲奶ヅQ迥δ懿睿t細(xì)胞容易破裂。總的來說,國(guó)產(chǎn)的血清呈現(xiàn)出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量較好的呈現(xiàn)出談黃、微紅色,差點(diǎn)的呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。當(dāng)然,熱滅活胎牛血清或保存不當(dāng)?shù)难?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅,甚至咖啡色。血清的主要作用:提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。深圳優(yōu)級(jí)血清哪里有
胎牛血清(FBS)是來自胎牛的凝結(jié)血液的液體部分,不含細(xì)胞、纖維蛋白和凝血因子,但含有大量對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)至關(guān)重要的營(yíng)養(yǎng)和大分子因子。牛血清白蛋白是FBS的主要成分。FBS中的生長(zhǎng)因子對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞的維持和生長(zhǎng)至關(guān)重要。FBS還含有多種小分子,如氨基酸、糖、脂質(zhì)和Hormone。FBS應(yīng)用普遍。FBS的主要用途之一是在真核細(xì)胞培養(yǎng)中,其濃度高達(dá)20%甚至更高,它提供許多促進(jìn)細(xì)胞存活和增殖的必需營(yíng)養(yǎng)素和生長(zhǎng)因子。然而,需要注意的是,人類細(xì)胞培養(yǎng)物中的FBS可能會(huì)引入研究成果。用人類血清培養(yǎng)的人類細(xì)胞與用FBS培養(yǎng)的細(xì)胞表現(xiàn)不同。FBS還用于人類和獸用疫苗以及生物技術(shù)藥物的研究、制造和控制,并用于阻止胰蛋白酶消化或用作冷凍保存中的保護(hù)劑。鹽城優(yōu)等血清品牌我們常會(huì)看到胎牛血清的標(biāo)注上有對(duì)產(chǎn)品滅活也有沒有滅活的。
胎牛血清的處理方法主要有以下幾種:1.活性炭處理,活性炭可以與親脂性分子結(jié)合,因此已用于從FBS中去除Hormone,例如雄雌二醇、孕酮、皮質(zhì)醇、睪酮、三碘甲狀腺原氨酸(T3)和甲狀腺素(T4)。這些血清脂質(zhì)Hormone傾向于干擾免疫測(cè)定系統(tǒng)和胰島素測(cè)定方法。2.透析,透析可以從FBS中去除所有分子量小于10,000MW的分子。這包括極性和非極性分子。去除細(xì)胞因子、葡萄糖、氨基酸和許多其他物質(zhì)。透析還可以去除FBS中的Antibiotic和其他外源性分子。
如何區(qū)別真假胎牛血清:免疫球蛋白,國(guó)產(chǎn)血清的只是定性檢測(cè),結(jié)果也很不準(zhǔn)確,進(jìn)口胎牛血清大多定量檢測(cè)。免疫球蛋白的數(shù)值能完全體現(xiàn)出時(shí)的牛齡情況,國(guó)產(chǎn)血清,基本都是新生牛的,血清中容易產(chǎn)生IgM,IgG的含量也偏高,進(jìn)口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。其它不管是國(guó)產(chǎn)還是進(jìn)口血清,都是不測(cè)Antibiotic的(無四環(huán)素胎牛血清之外)。國(guó)外,Antibiotic的使用很嚴(yán)格,用量也很少,每頭奶牛的產(chǎn)品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含Antibiotic或含量極低;國(guó)內(nèi),Antibiotic的濫用已成了普遍現(xiàn)象,血清中殘留很高,對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)極為不利,這是國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差的根本原因。血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成。
用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:將已存放血漿的試管置入-20~0℃環(huán)境下保存?zhèn)溆?;將血漿分離提取胎牛血清,具體步驟如下:取6-12g氯化鈉、0.1-0.5g磷酸二氫鉀和1.4-2.4g磷酸二氫鉀放入容器中,向其中加入300-700mL去離子水,攪拌均勻,使用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-20%的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH為7.0-7.3,將上述所收集的血漿倒入容器中,攪拌均勻,溫度設(shè)定為25-38℃,靜置8-20min,得混合液C;22)將上述的混合液C放入離心機(jī)中離心分離8-20min,轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000-10000r/min,取上清液。血清指血漿除去纖維蛋白原后的膠狀液體。舟山去外泌體胎牛血清哪家好
透析胎牛血清是在胎牛血清的基礎(chǔ)上進(jìn)行加工的。深圳優(yōu)級(jí)血清哪里有
如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),應(yīng)該如何去除?胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會(huì)存在于胎牛血清中,這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。如果想要去除這些絮狀沉淀物,可以采取離心法,400g,離心1~2分鐘,將上清重新分裝即可使用。胎牛血清中含有豐富的促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的成分,如維生素、運(yùn)輸?shù)鞍住⑽⒘吭?、生長(zhǎng)因子等。深圳優(yōu)級(jí)血清哪里有
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