活性炭處理胎牛血清的應(yīng)用:活性炭處理胎牛血清主要用于受體研究和雌Hormone相關(guān)的細(xì)胞研究實驗。同時活性炭處理胎牛血清極大的降低了多種Hormone和生長因子,減少了影響細(xì)胞生化分析的干擾因子。性炭處理胎牛血清減少了血清中的類固醇類化合物,3x100nm無菌過濾內(nèi)的毒性≤10EU/mL,血紅素≤20mg/dL。胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。顯然,胎牛血清是品質(zhì)較高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細(xì)胞有害的成分較少。胎牛血清在融化過程中,瓶子里冰塊的底部你會看見亮亮的蛋白絲就是血清中大量的蛋白在快速融化。衢州細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清廠家
胎牛血清在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用:1.提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的Hormone,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他Hormone等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到釋放毒性作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。5.起酸堿度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。7.參與細(xì)胞凍存。在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(常見為10%)的。具體到不同試驗,應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報導(dǎo),或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來確定較佳濃度。胎牛血清應(yīng)在-20℃儲存,運輸應(yīng)干冰冷鏈運輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。衢州細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清廠家胎牛血清是品質(zhì)高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細(xì)胞有害的成分較為少。
胎牛血清融化方法:只要2.5個小時,溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時間,而且較大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。血清融化過程中,蛋白質(zhì)會比水先融化。冰塊底部亮亮的細(xì)絲就是融化中的蛋白,血清在培養(yǎng)細(xì)胞中,比較重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中較大限度地保留因子的活性,就變得非常重要。回憶一下,細(xì)胞復(fù)蘇時,要保持細(xì)胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個半小時,4℃過夜需要大約10個小時(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實驗室融化時間會稍有出入)。
如果胎牛血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),應(yīng)該如何去除?胎牛血清中的沉淀物出現(xiàn)有很多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白在胎牛血清解凍后,也會存在于胎牛血清中,這也是造成沉淀物的主要原因之一。但少量絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。如果想要去除這些絮狀沉淀物,可以采取離心法,400g,離心1~2分鐘,將上清重新分裝即可使用。胎牛血清中含有豐富的促進(jìn)細(xì)胞生長的成分,如維生素、運輸?shù)鞍?、微量元素、生長因子等。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會明顯增多。
胎牛血清:胎牛血清(FBS),胎牛血清是一種性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。1、性狀、外觀淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。2、蛋白質(zhì)含量3.5%~5.0%(w/v)。3、血紅蛋白含量≤0.02%(w/v)。4、無菌檢驗陰性。5、支原體檢驗陰性。6、細(xì)菌內(nèi)的毒性≤5(EU/ml)。7、牛腹瀉病毒陰性。8、大腸桿菌噬菌體陰性。9、支持細(xì)胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)較大增殖濃度≥2.5×106個/ml,細(xì)胞倍增時間≤15h克隆率≥85%。胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。蘇州不含外泌體血清報價
胎牛血清應(yīng)用比較普遍。衢州細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清廠家
胎牛血清與其它牛血清有何區(qū)別?胎牛血清(FoetalBovineSerum,簡稱FBS):胎牛血清是指懷孕3-8個月的母牛被屠宰后,發(fā)育未完全的胎牛心臟密閉穿刺采的血后,通過一系列工藝處理獲得。此時胎牛血中含有特殊的生長發(fā)育因子,一旦胚胎發(fā)育完全這些因子會自動消失。新生牛血清(NewbornCalfSerum,簡稱NBCS):出生14小時內(nèi)未進(jìn)食的新生牛,通常采用頸動脈采集血液分離得到的血清。小牛血清(CalfSerum):出生后3天至6月齡小牛動脈采的血分離血清。成年牛血清(AdultBovineSerum,簡稱ABS)指的是屠宰時收集全血后分離得到血清。衢州細(xì)胞培養(yǎng)用胎牛血清廠家
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