膜片鉗技術之全細胞記錄的實驗流程：（1）破膜：加大微電極內(nèi)的負壓將細胞膜吸破，此時可見時間常數(shù)較大的全細胞膜電容電流的出現(xiàn)，以及方波電流的輕微加大。①可用嘴吸；②也可用注射器施加負壓；③還可以在施加負壓的基礎上進行電擊穿來破膜。若只用電擊穿破膜，形成的入口電阻Ra較大。（2）細胞破膜后，若所用浴液的滲透壓比電極內(nèi)液的滲透壓略高，則應該將所施加的負壓力在幾秒內(nèi)或幾十秒內(nèi)去掉；反之，適當保留一點負壓對破膜狀態(tài)及細胞的穩(wěn)定更有利。（3）全細胞膜電容補償：調節(jié)全細胞膜電容補償板塊中的Cm和Rs進行膜電容電流補償，使輸出電流信號中細胞膜電容電流成分消失或變至較小。（4）串聯(lián)電阻補償：打開串聯(lián)電阻補償鍵，調節(jié)串聯(lián)電阻補償至不產(chǎn)生震蕩為度。（5）漏減調節(jié)。（6）正式進入標本細胞的檢測。膜片鉗的數(shù)據(jù)如何處理：通過滲透很快改變胞漿成分并達到平衡。南京細胞生物學離子通道網(wǎng)站

膜片鉗又稱單通道電流記錄技術，用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面，使之形成10～100的密封(giga-seal)，又稱巨阻封接，被孤立的小膜片面積為μm量級，內(nèi)中只有少數(shù)離子通道。然后對該膜片實行電壓鉗位，可測量單個離子通道開放產(chǎn)生的pA（10的負12次方安培）量級的電流，這種通道開放是一種隨機過程。通過觀測單個通道開放和關閉的電流變化，可直接得到各種離子通道開放的電流幅值分布、開放幾率、開放壽命分布等功能參量，并分析它們與膜電位、離子濃度等之間的關系。還可把吸管吸附的膜片從細胞膜上分離出來，以膜的外側向外或膜的內(nèi)側向外等方式進行實驗研究。這種技術對小細胞的電壓鉗位、改變膜內(nèi)外溶液成分以及施加藥物都很方便。廣州藥理學實用膜片鉗哪家好膜片鉗的應用：與藥物作用有關的心肌離子通道。

膜片鉗技術是通過微玻管電極（膜片電極或膜片吸管）接觸細胞膜，用千兆歐姆以上的阻抗使之封接，在電學上分隔和電極尖開口處相接的細胞膜的小區(qū)域（膜片）以及其周圍，在此基礎上固定點位，對這膜片上的離子通道的離子電流（pA級）進行監(jiān)測記錄的方法。測量回路的中心部分是使用場效應管運算放大器構成的I-V轉換器。當場效應管運算放大器的正負輸入端子是等電位，向正輸入端子施加指令電位時，因為短路負端子以及膜片都可等電位地達到鉗制的作用，字膜片微電極與默片之間形成10GΩ以上封接時，其間達到Z小的分流電流。

膜片鉗的應用：在心血管藥理研究中的應用：隨著膜片鉗技術在心血管方面的普遍應用，對血管疾病和藥物作用的認識不只得到了不斷更新，而且在其病因學與藥理學方面還形成了許多新的觀點。正如諾貝爾基金會在頒獎時所說：“Neher和Sadmann的貢獻有利于了解不同疾病機理，為研制新的更為有效的藥物開辟了道路”。創(chuàng)新藥物研究與高通量篩選：在離子通道高通量篩選中主要是進行樣品量大、篩選速度占優(yōu)勢、信息量要求不太高的初級篩選。較近幾年，分別形成了以膜片鉗和熒光探針為基礎的兩大主流技術市場。將電生理研究信息量大、靈敏度高等特點與自動化、微量化技術相結合，產(chǎn)生了自動化膜片鉗等一些新技術。膜片鉗技術的應用范圍：在心血管藥理方面的研究。

膜片鉗電生理技術服務實驗流程之標本制備和膜片鉗實驗系統(tǒng)：標本制備：根據(jù)研究目的的不同，可采用不同的細胞組織，如心肌細胞、平滑肌細胞、腫瘤細胞等，現(xiàn)在幾乎可對各種細胞進行膜片鉗的研究。對所采用的細胞，必須滿足實驗要求，一般多采用酶解分離法，也可采用細胞培養(yǎng)法；另外，由于與分子生物學技術的結合，現(xiàn)在也運用分子克隆技術表達不同的離子通道，如利用非洲爪蟾卵母細胞表達外源性基因等。膜片鉗實驗系統(tǒng)：根據(jù)不同的電生理實驗要求，可以組建不同的實驗系統(tǒng)，但有若干共同的基本部件，包括機械部分（防震工作臺、屏蔽罩、儀器設備架）、光學部分（顯微鏡、視頻監(jiān)視器、單色光系統(tǒng)）、電子部件（膜片鉗放大器、刺激器、數(shù)據(jù)采集設備、計算機系統(tǒng)）和微操縱器。膜片鉗是一種能夠直接觀察單一的離子通道蛋白質分子對相應離子通透難易程度等特性的一種實驗技術。嘉興醫(yī)學膜片鉗技術設計公司

膜片鉗和電壓鉗的區(qū)別：膜電位固定的方法不同。南京細胞生物學離子通道網(wǎng)站

膜片鉗技術之全細胞式與細胞吸附式的區(qū)別：全細胞式記錄這個名字乍聽上去好像和細胞吸附式?jīng)]啥兩樣，無非就是把電極戳在細胞上然后記錄它的電活動。但事實是，這兩者存在天壤之別。首先的一大區(qū)別體現(xiàn)在外部構型上：在cell-attached的記錄中，我們不需要用電極戳破細胞膜，只需將其懟在細胞膜上即可；但在whole-cell的記錄中，我們不只要將電極懟進細胞膜內(nèi)，而且還不能懟得過深或過淺，否則你就無法記錄到有用的電信號。概括一下就是，要形成全細胞記錄必須打破細胞膜，但由于這個操作比較厲害，所以要破膜時請相信玄學。其次，第二大區(qū)別在電阻補償上：在cell-attached的記錄中，由于我們無需打通細胞內(nèi)外膜，因此細胞膜上的各種離子通道或蛋白質就沒有串聯(lián)在電路當中，但是在whole-cell中，串聯(lián)電阻（Rs）就存在了，因此軟件輸出的命令電壓也就不等于細胞的跨膜電位，故我們需要對其進行補償。這些注意事項包括：電極電容及細胞膜電容補償問題，漏電流問題，液接電位的校正問題，空間鉗位問題，細胞內(nèi)容物被電擊內(nèi)液稀釋問題，電極內(nèi)液的成分問題等。南京細胞生物學離子通道網(wǎng)站

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