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胎牛血清:解凍胎牛血清時(shí),請按照規(guī)定的的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若胎牛血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時(shí),請隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會變得混濁,同時(shí)胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害,而影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量較大的天然培養(yǎng)基。寧波去外泌體血清供應(yīng)商
胎牛血清制備:用止血鉗夾住血管,切開1厘米左右的切口進(jìn)行插管,插好管后打開血管的止血鉗,讓牛血順采的血管流入另一個(gè)潔凈房間內(nèi)的瓶中。采的血瓶采的血前經(jīng)干烤滅菌(180℃2小時(shí))后,按無菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采的血前半小時(shí)放入37℃恒溫箱備用。采的血前先晃動瓶內(nèi)生理鹽水,使其充分濕潤瓶壁后倒出,再進(jìn)行采的血并加塞封口。將采的血后的瓶放37℃恒溫室2小時(shí),再放入4℃冷庫4小時(shí)以備離心。寧波去外泌體血清供應(yīng)商血清的保存應(yīng)該注意:需要長期保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。
胎牛血清的主要成分有哪些?脂聯(lián)素,有人發(fā)現(xiàn),將牛脂聯(lián)素注射入C57小鼠,可降低循環(huán)血糖水平和在高脂飲食后提高脂肪清理率。持續(xù)注射牛脂聯(lián)素兩周后,胰島素敏感性和葡萄糖耐受性明顯增強(qiáng),高脂喂養(yǎng)小鼠肝臟脂質(zhì)堆積減少。這些結(jié)果提供了直接的證據(jù)表明內(nèi)源性牛脂聯(lián)素是一種調(diào)節(jié)脂肪和葡萄糖代謝的生理Hormone。以上可以看到,胎牛血清提供的一些活性因子參與營養(yǎng)的運(yùn)輸、促進(jìn)營養(yǎng)分子向細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)和利用,調(diào)節(jié)細(xì)胞的代謝和生理狀態(tài)??梢娞ヅQ逶诩?xì)胞環(huán)境中發(fā)揮著積極的作用,這是人工合成的基礎(chǔ)培養(yǎng)基所比擬不了的。
如何挑選好的胎牛血清:好的胎牛血清是實(shí)驗(yàn)的成功的前提是所有實(shí)驗(yàn)人做細(xì)胞培養(yǎng)的共識,如何挑選好的胎牛血清,可以從以下幾個(gè)方面著手。1.外觀,好的血清應(yīng)是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁,不透明,含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若棕紅色,說明,血清中的血紅蛋白含量太高,有溶血現(xiàn)象。2、總蛋白含量,胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數(shù)值偏高,說明牛齡偏大,不是胎牛;數(shù)值偏低,表明血清可能摻水了。3、血紅蛋白,標(biāo)準(zhǔn)為不高于,20mg/dl,顏色越紅,數(shù)值越高;反之,數(shù)值越低。4、pH國產(chǎn)血清,大多高于7.5,進(jìn)口胎牛血清,大多低于7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關(guān)。一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌,如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾。
胎牛血清有必要做熱滅活嗎?實(shí)驗(yàn)證明,經(jīng)過正確處理的熱滅活胎牛血清,對于大多數(shù)的細(xì)胞而言都是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對細(xì)胞的生長只有微小的促進(jìn),或完全沒有任何作用,甚至可能因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,從而造成細(xì)胞生長速率的降低。經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會明顯的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此類沉淀物增加得更多,這常常會使研究者誤認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。因此我們建議客戶,若非必須,可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節(jié)省客戶寶貴的時(shí)間,更確保血清的質(zhì)量。每100ml人血清含有蛋白質(zhì)6-8g,其中主要是白蛋白和球蛋白。寧波賽業(yè)胎牛血清品牌
胎牛血清的無菌檢驗(yàn):陰性;支原體檢驗(yàn): 陰性;細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml)。寧波去外泌體血清供應(yīng)商
為什么要熱滅活胎牛血清?胎牛血清加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。開啟的補(bǔ)體參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,開啟淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞。在免疫學(xué)研究,培養(yǎng)ES細(xì)胞,昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅活胎牛血清。為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現(xiàn)少量沉淀?胎牛血清沒有預(yù)老化,儲存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應(yīng)該不會影響血清的質(zhì)量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復(fù)凍融。寧波去外泌體血清供應(yīng)商
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