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用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的胎牛血清及其制備方法:將已存放血漿的試管置入-20~0℃環(huán)境下保存?zhèn)溆茫粚⒀獫{分離提取胎牛血清,具體步驟如下:取6-12g氯化鈉、0.1-0.5g磷酸二氫鉀和1.4-2.4g磷酸二氫鉀放入容器中,向其中加入300-700mL去離子水,攪拌均勻,使用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-20%的鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH為7.0-7.3,將上述所收集的血漿倒入容器中,攪拌均勻,溫度設(shè)定為25-38℃,靜置8-20min,得混合液C;22)將上述的混合液C放入離心機(jī)中離心分離8-20min,轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000-10000r/min,取上清液。胎牛血清在無(wú)菌條件下要經(jīng)過(guò)0.1微米膜三重過(guò)濾,要進(jìn)行一系列的檢測(cè)。麗水OriCell血清報(bào)價(jià)
血清中絮狀沉淀,它們是什么,怎么處理?1.將冷凍保存的血清取出后,置4℃冰箱靜止過(guò)夜;2.待血清融化后,上下顛倒,輕輕混勻,繼續(xù)4℃2-3小時(shí);3.輕輕吸取上層血清,分裝,余底下50ml左右;4.低速離心5分鐘,去掉沉淀。若解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該怎么處理?胎牛血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多種原因,但較普遍的原因是由于胎牛血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在胎牛血清解凍后,也會(huì)存在于胎牛血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響胎牛血清本身的質(zhì)量。若欲去除這些絮狀沉淀物,可以將胎牛血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾。我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過(guò)濾膜。韶關(guān)無(wú)外泌體血清哪里有賣(mài)胎牛血清含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
胎牛血清-血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清在存儲(chǔ)的時(shí)候要在零下濕度的溫度下進(jìn)行保存,并且需要避免陽(yáng)光的照射,需要用恒溫冰箱來(lái)進(jìn)行保存。
胎牛血清的主要成分有哪些?脂聯(lián)素,有人發(fā)現(xiàn),將牛脂聯(lián)素注射入C57小鼠,可降低循環(huán)血糖水平和在高脂飲食后提高脂肪清理率。持續(xù)注射牛脂聯(lián)素兩周后,胰島素敏感性和葡萄糖耐受性明顯增強(qiáng),高脂喂養(yǎng)小鼠肝臟脂質(zhì)堆積減少。這些結(jié)果提供了直接的證據(jù)表明內(nèi)源性牛脂聯(lián)素是一種調(diào)節(jié)脂肪和葡萄糖代謝的生理Hormone。以上可以看到,胎牛血清提供的一些活性因子參與營(yíng)養(yǎng)的運(yùn)輸、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)分子向細(xì)胞的轉(zhuǎn)運(yùn)和利用,調(diào)節(jié)細(xì)胞的代謝和生理狀態(tài)??梢?jiàn)胎牛血清在細(xì)胞環(huán)境中發(fā)揮著積極的作用,這是人工合成的基礎(chǔ)培養(yǎng)基所比擬不了的。反復(fù)凍融會(huì)破壞胎牛血清中有效成分,影響血清品質(zhì)。
胎牛血清制備:離心,將準(zhǔn)備好的瓶放入離心套筒調(diào)好平衡后,對(duì)稱(chēng)放入離心機(jī),按1800轉(zhuǎn)/分鐘離心50分鐘后,放入4℃冷庫(kù)備用。抽血清,取出4℃冷庫(kù)離心好的瓶,注意輕抬輕放,以免將下層血塊和血清混層。將經(jīng)過(guò)高壓滅菌裝有兩孔瓶塞的5000ml大瓶的抽氣孔一端的管子接好空氣濾器,再接到壓縮機(jī)抽氣口上。打開(kāi)壓縮機(jī),用抽血清孔的管子輕輕抽取采的血瓶?jī)?nèi)的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下層血塊。將抽好的血清分裝,即為粗制胎牛血清,放入-20℃冷庫(kù)冷藏備用。因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分較少。韶關(guān)無(wú)外泌體血清哪里有賣(mài)
胎牛血清保存需要避免陽(yáng)光的照射,需要用恒溫冰箱來(lái)進(jìn)行保存。麗水OriCell血清報(bào)價(jià)
如何區(qū)別真假胎牛血清:沉淀,很多血清客戶(hù),會(huì)發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問(wèn)題,這是沒(méi)有根據(jù)的。血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對(duì)血清質(zhì)量沒(méi)有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,和廠家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國(guó)產(chǎn)的血清,大多來(lái)自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采的血、冷凍、運(yùn)輸?shù)缴a(chǎn)會(huì)經(jīng)過(guò)多次凍融,每次凍融過(guò)程,就會(huì)析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。澄清度,進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而國(guó)產(chǎn)血清,因?yàn)榻^大多數(shù)是新生牛血清,相對(duì)而言更加粘稠,顏色略深,這對(duì)于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進(jìn)行對(duì)比,可容易分辨。麗水OriCell血清報(bào)價(jià)
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