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合肥神經生物學膜片鉗電生理技術供應商

來源: 發(fā)布時間:2023-06-03

電壓鉗與膜片鉗有什么區(qū)別?電壓鉗技術是通過向細胞內注射一定的電流,抵消離子通道開放時所產生的離子流,從而將細胞膜電位固定在某一數(shù)值。由于注射電流的大小與離子流的大小相等、方向相反,因此它可以反映離子流的大小和方向。膜片鉗技術鉗制的是膜片,是指采用尖銳端經過處理的微電極與細胞膜發(fā)生緊密接觸,使尖銳端下的這片細胞膜在電學上與其它細胞膜分離,這很大程度降低了背景噪聲,使單通道微弱的電流得以分辨出來。采用電壓鉗技術將這片膜的電位鉗制在某一數(shù)值,可記錄到單通道電流。從這點上看,膜片鉗技術是特殊的電壓鉗技術。隨著膜片鉗技術的發(fā)展,它已經不只只局限于膜片的概念,也不只只采用電壓鉗技術,還常采用電流鉗技術。膜片鉗使用操作注意:不得在本機電腦下載別的軟件,拷數(shù)據(jù)時需用實驗室配置的U盤。合肥神經生物學膜片鉗電生理技術供應商

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膜片鉗技術操作方法:開始封接:調低微操步進速度,使電極尖銳端慢慢向細胞靠近,如發(fā)現(xiàn)基線方波突然變小,封接電阻上升時,即停止電極下降,通過注射器給電極負壓,封接成功的可見方波很快變小,電阻升至G歐。此時,調節(jié)快電容補償按鈕,將快電容電流補償?shù)?,如封接穩(wěn)定后,準備破膜。破膜:在鉗制電位水平-60mV時,漏電流<20pA,給予比較大的負壓(也可根據(jù)情況使用ZAP電破方式破膜),將要破時可見基線上下浮動,破后,可見基線前后有兩個較大的慢電容電流。嘉興藥理學膜片鉗技術原理及步驟膜片鉗的應用:對單細胞形態(tài)與功能關系的研究。

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膜片鉗技術在通道研究中的重要作用:1.與藥物作用有關的心肌離子通道:心肌細胞通過各種離子通道對膜電位和動作電位穩(wěn)態(tài)的維持而保持正常的功能。近年來,國外學者在人類心肌細胞離子通道特性的研究中取得了許多進展,使得心肌藥理學實驗由動物細胞模型向人心肌細胞成為可能。2.對離子通道生理與病理情況下作用機制的研究:通過對各種生理或病理情況下細胞膜某種離子通道特性的研究,了解該離子的生理意義及其在疾病過程中的作用機制。

膜片鉗技術本質上也屬于電壓鉗范疇,兩者的區(qū)別關鍵在于:①膜電位固定的方法不同;②電位固定的細胞膜面積不同,進而所研究的離子通道數(shù)目不同。電壓鉗技術主要是通過保持細胞跨膜電位不變,并迅速控制其數(shù)值,以觀察在不同膜電位條件下膜電流情況。因此只能用來研究整個細胞膜或一大塊細胞膜上所有離子通道活動。目前電壓鉗主要用于巨大細胞的全性能電流的研究,特別在分子克隆的卵母細胞表達電流的鑒定中發(fā)揮著其他技術不能替代的作用。全自動膜片鉗系統(tǒng)技術指標:軟件的功能全部,可按照操作者設定的參數(shù)方案自動執(zhí)行實驗。

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膜片鉗操作實驗:膜片鉗放大器是整個實驗系統(tǒng)中的中心,它可用來作單通道或全細胞記錄,其工作模式可以是電壓鉗,也可以是電流鉗。從原理來說,膜片鉗放大器的探頭電路即I-V變換器有兩種基本結構形式,即電阻反饋式和電容反饋式,前者是一種典型的結構,后者因用反饋電容取代了反饋電阻,降低了噪聲,所以特別適合很低噪聲的單通道記錄。由于供膜片鉗實驗的專門計算機硬件及相應的軟件程序的相繼出現(xiàn),使得膜片鉗實驗操作簡便、效率提高。如與EPC-9型膜片鉗放大器(內含ITC-16數(shù)據(jù)采集/接口卡)配套使用的軟件PULSE/PULSEFIT,它既可產生刺激波形,控制數(shù)據(jù)采集,又可分析數(shù)據(jù),同時具有用于膜電容監(jiān)測的鎖相放大器,多種軟件功能集成于一體。膜片鉗技術本質上也屬于電壓鉗范疇。莆田全自動腦定位膜片鉗研究方案

全自動膜片鉗系統(tǒng)技術指標:藥物消耗極低。每次更換的外液只需十幾微升。合肥神經生物學膜片鉗電生理技術供應商

膜片鉗使用的注意事項:1.為了防止塵埃、靜電傷害機器,每天做實驗前請用清水拖地。2.拉制儀使用前需預熱15-30min。3.銀絲電極及地線發(fā)白時,請先用砂紙輕微打磨,再浸入新鮮的次氯酸鈉溶液鍍氯化銀,如果銀絲電極30min未變黑,則考慮更換次氯酸鈉。4.先開放大器,后開軟件;先關軟件,后關放大器。5.非必須用到汞燈時請不要打開汞燈電源,打開后至少需1個小時才可關閉。6.在放大器打開時不能用手、金屬物品或其它導電的物品接觸電極絲(包括地線),在取放細胞片時請關閉放大器。膜片鉗技術用特制的玻璃微吸管吸附于細胞表面,使之形成10~100MΩ的高阻封接,被孤立的小膜片面積為微米數(shù)量級,因此封接范圍內細胞膜光有少數(shù)離子通道。膜片鉗使用的注意事項:為了防止塵埃、靜電傷害機器,每天做實驗前請用清水拖地。合肥神經生物學膜片鉗電生理技術供應商

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