對血清的成分和作用的研究雖有很大進(jìn)展,但仍存在一些問題。主要是:血清的成份可能有幾百種之多,對其準(zhǔn)確的成份、含量及其作用機(jī)制仍不清楚,尤其是對其中一些多肽類生長因子、和脂類等尚未充分認(rèn)識,這給研究工作帶來許多困難;血清都是批量生產(chǎn),各批量之間差異很大,而且血清保存期至多一年,因此,要保證每批血清的相似性極為困難,從而使實驗的標(biāo)準(zhǔn)化和連續(xù)性受到限制;不能排除血清中含有易變物質(zhì),這被認(rèn)為是“瓶中惡化”的原因之一。血清提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。蘇州OriCell胎牛血清報價
血清是血液凝固后的液體部分,不含血細(xì)胞、纖維蛋白及凝集因子等,含有多種對細(xì)胞生長必需的營養(yǎng)因子及大分子物質(zhì)。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量對細(xì)胞生長必需的生長因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物質(zhì),如氨基酸、糖類、脂類及類物質(zhì)。胎牛血清應(yīng)用在哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)中;因此,胎牛血清應(yīng)用很較廣。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。相對于新生動物血清或成體動物血清來說,胚胎期動物血清有什么優(yōu)點?與其它類型血清相比,胚胎期動物血清含有更多的生長因子,及較少的gamma球蛋白含量。血清與血漿的區(qū)別:血清是由血液凝固后的上清液制備的;而血漿中含有抗凝劑,所以血漿中含有血液凝固相關(guān)的蛋白。廈門細(xì)胞培養(yǎng)用血清哪家好胎牛血清指的是取自未出生,母牛剖腹得來的胎牛。
國內(nèi)科研人員購買胎牛血清的現(xiàn)狀:難辨真假。 原因很多,一方面是國內(nèi)血清市場這幾年是愈發(fā)的混亂了,很多商家都盯上了這塊“蛋糕”,現(xiàn)在國內(nèi)市場能見到的各種來源的血清品牌大于50種,使用者在不了解國家政策和相關(guān)知識的前提下很難去辨別和選擇安全、穩(wěn)定、合規(guī)的胎牛血清。另一方面是客戶很難找到血清相關(guān)的真實信息,即便想去分辨也無從下手,只能聽商家的了?,F(xiàn)在允許進(jìn)口的血清產(chǎn)地很少,只有南美(烏拉圭)、澳大利亞、新西蘭。對血清行業(yè)有些了解的人看到這些,就會知道能夠進(jìn)口到國內(nèi)的胎牛血清注定是很少的。
購買回來的血清都是冰凍狀態(tài),使用時需要融化,融化過程在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,待溶解完成,我們觀察到的胎牛血清會表現(xiàn)出黃色或紅色。并不是越紅越好,也不是越黃越好,淡黃色到淡紅色才是比較正常的顏色范圍。很多培養(yǎng)細(xì)胞的寶寶會發(fā)現(xiàn)進(jìn)口血清有沉淀,從而懷疑血清的質(zhì)量問題。那么,血清中可能出現(xiàn)的沉淀物是什么?纖維蛋白,它是經(jīng)常出現(xiàn)的較大的沉淀物,可以達(dá)到1-2mm,可以用肉眼觀察到。磷酸鈣,它也是常見的一種沉淀物,通常會使血清出現(xiàn)渾濁,并且在37℃培養(yǎng)的時候會增加。這種沉淀物在倒置顯微鏡下觀察像小黑點,這些小黑點由于布朗運動看上去可以活動,因此經(jīng)常被誤認(rèn)為是微生物污染。膽固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白質(zhì),它們也是血清中出現(xiàn)沉淀物的常見原因。關(guān)于細(xì)胞生長,其實很多試驗以及經(jīng)驗表明沉淀物不會影響細(xì)胞培養(yǎng),當(dāng)然血清生產(chǎn)商也是這樣說的。胎牛血清的蛋白質(zhì)含量:3.5%~5.0%( w/v);血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)。
小牛血清和胎牛血清有何區(qū)別與注意事項?來源不同:胎牛血清 是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺獲取的胎牛的血清,新生牛(小牛)血清采自出生10至14 天的小牛。組份與比例不同:兩者所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同,用途與用法不同:某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長,而有些細(xì)胞只需小牛血清即可,使用濃度不同,一般在5%-10%,有特殊要求的濃度在20%。血清保存和使用須注意:血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃,若存放在4℃不可超過一個月。解凍血清時 ,應(yīng)先將血清至于2-8℃冰箱,并經(jīng)常搖勻使之溶解,然后至室溫放置使之升溫,一定不可將冷凍的血清直接放入37℃水浴或者溫箱中,如放在37℃解凍,顏色加深,粘稠度也會增加,血清在解凍和熱滅活后,應(yīng)按用量分裝并于-20℃保存,避免反復(fù)凍融。胎牛血清是一種性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。蘇州OriCell胎牛血清報價
胎牛血清的牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。蘇州OriCell胎牛血清報價
為何血清會存在批間差?如何避免此影響?因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,每個批號的組分和組分含量都是不固定的,因此批間差異是可能存在的。為了避免批間差異對細(xì)胞的影響,XP建議先進(jìn)行批號測試,篩選合適的批號,備好庫存(血清未開封時,在-20℃下可保存5年)。如需更換血清批次或產(chǎn)地,建議先試用后再大量訂購。血清中沉淀是什么成分?造成原因有哪些?如何預(yù)防和處理沉淀?血清中沉淀主要有:纖維蛋白(絮狀沉淀),甲胎蛋白,脂蛋白,冷凝集素,玻粘連蛋白,磷酸鈣[1](顯微鏡下小黑點沉淀),膽固醇等。原因:造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活,反復(fù)凍融,長期儲存于2-8℃或者室溫。預(yù)防措施與建議:因此不立即使用的血清應(yīng)保存在-20℃或以下。蘇州OriCell胎牛血清報價