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添加胎牛血清的時(shí)候要注意避免把沉淀加入培養(yǎng)液,因?yàn)槿绻囵B(yǎng)液有沉淀的存在,會(huì)使得其中培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量的黑點(diǎn),除此之外,細(xì)胞的表面還很可能會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì),總之出現(xiàn)這樣的情況會(huì)極其不利于細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。那么為了較為大程度減少血清的損失,可以把所有有沉淀的血清進(jìn)行收集并做離心處理,之后便可將上清液加入培養(yǎng)液中使用。注意解凍的方法:再高質(zhì)量的胎牛血清也要在使用的時(shí)候堅(jiān)持謹(jǐn)慎的原則,因此在解凍血清的時(shí)候,要細(xì)心地考慮到其解凍時(shí)體積一般會(huì)增大的特點(diǎn),事先為血清預(yù)留出能夠容納膨脹體積的空間。如此一來,便不會(huì)發(fā)生污染或者容器凍裂的情況。另外較為好采用國際通用的解方式解凍血清。胎牛血清提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。金華進(jìn)口胎牛血清哪里有
血清為何要熱滅活,有必要對(duì)所有血清都滅活嗎?如何正確的進(jìn)行滅活?加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng)。啟動(dòng)的補(bǔ)體系統(tǒng)參與溶解細(xì)胞事件,刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,啟動(dòng)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活化。在免疫學(xué)研究中,培養(yǎng)ES細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞時(shí),推薦使用熱滅清。實(shí)驗(yàn)顯示,熱滅清對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的,對(duì)于非必須的細(xì)胞來說血清滅活對(duì)于細(xì)胞生長(zhǎng)只有微小甚至無任何作用,還可能造成生長(zhǎng)速率降低,沉淀物還會(huì)明顯增多,不利于細(xì)胞觀察。因此,若非必須,不需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。將需要進(jìn)行處理的血清置于56℃水浴30min,建議加放空白對(duì)照(同體積水)使用溫度計(jì)測(cè)溫,以測(cè)得溫度為56℃時(shí)為計(jì)時(shí)起始點(diǎn),加熱中可不時(shí)輕度旋轉(zhuǎn)混勻血清。無錫標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清報(bào)價(jià)胎牛血清:性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
胎牛血清和新生牛血清的區(qū)別是什么?取血年齡不同:牛血清按照牛取血時(shí)間或牛齡可進(jìn)行區(qū)分。胎牛血清指的是取自未出生,母牛剖腹得來的胎牛。國產(chǎn)胎牛血清(并無明確定義,但通常以此稱)的指的是出生4-6小時(shí),且未進(jìn)行哺乳進(jìn)食的牛,有時(shí)還稱作國產(chǎn)新生牛。 新生牛血清指的是出生14天-3個(gè)月進(jìn)行取血的牛。成年牛血清指的是取血時(shí)牛齡通常超過12個(gè)月的牛。以上取血牛齡的差異主要是受當(dāng)?shù)貒倚竽翗I(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響,因?yàn)榕Q酁樾竽翗I(yè)副產(chǎn)業(yè),并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。組分與比例不同:這幾種不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,細(xì)胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因?yàn)樘ヅN催M(jìn)食過母乳,所以IgG含量低。用途與用法不同:根據(jù)細(xì)胞所需生長(zhǎng)條件可確定。
國內(nèi)科研人員購買胎牛血清的現(xiàn)狀:難辨真假。 原因很多,一方面是國內(nèi)血清市場(chǎng)這幾年是愈發(fā)的混亂了,很多商家都盯上了這塊“蛋糕”,現(xiàn)在國內(nèi)市場(chǎng)能見到的各種來源的血清品牌大于50種,使用者在不了解國家政策和相關(guān)知識(shí)的前提下很難去辨別和選擇安全、穩(wěn)定、合規(guī)的胎牛血清。另一方面是客戶很難找到血清相關(guān)的真實(shí)信息,即便想去分辨也無從下手,只能聽商家的了?,F(xiàn)在允許進(jìn)口的血清產(chǎn)地很少,只有南美(烏拉圭)、澳大利亞、新西蘭。對(duì)血清行業(yè)有些了解的人看到這些,就會(huì)知道能夠進(jìn)口到國內(nèi)的胎牛血清注定是很少的。胎牛血清中的物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)或抑制生長(zhǎng)活性是達(dá)到生理平衡的。
較為低血清試驗(yàn)的要求。內(nèi)有毒的檢測(cè):內(nèi)有毒的,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革蘭氏陰性菌的細(xì)胞外膜。臨床上,內(nèi)有毒的作為一些革蘭氏陰性菌的診斷提示,如腦膜炎球菌。動(dòng)物體內(nèi),內(nèi)有毒的能夠?qū)е掳l(fā)熱或者誘導(dǎo)炎癥反應(yīng);細(xì)胞培養(yǎng)中,內(nèi)有毒的能夠誘導(dǎo)細(xì)胞反應(yīng)異常。通常,采用鱟阿米巴樣細(xì)胞裂解實(shí)驗(yàn)(LAL檢測(cè))檢測(cè)內(nèi)有毒的水平。LAL是從美洲鱟的血液中制備的,對(duì)內(nèi)有毒的非常靈敏,在微量?jī)?nèi)有毒的存在情況下就凝結(jié)。阿米巴樣細(xì)胞相當(dāng)于哺乳動(dòng)物的白細(xì)胞。特異性血清及其加工方式,熱鈍化:胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補(bǔ)體成分及一些未知的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制分子失活。與胎牛血清的其它加工方式一樣,熱鈍化處理過程必須小心謹(jǐn)慎,因?yàn)檠逯械纳L(zhǎng)因子容易在較高溫度或者較長(zhǎng)時(shí)間加熱條件下失活,甚至產(chǎn)生沉淀。血清的主要作用:提供基本營養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無機(jī)物、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)?;窗踩ネ饷隗w血清價(jià)格
胎牛血清的細(xì)菌內(nèi)有毒的 ≤5(EU/ml);牛腹瀉病毒:陰性;大腸桿菌噬菌體:陰性。金華進(jìn)口胎牛血清哪里有
血清的常見問題:保存方法,血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議將無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。解凍方法:將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。避免產(chǎn)生沉淀物:解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。金華進(jìn)口胎牛血清哪里有