對生物體內(nèi)的突觸結(jié)構(gòu)和蛋白進行空間分布的研究時,成像系統(tǒng)需要具備高的成像速度,防止出現(xiàn)生物體移動造成的重影現(xiàn)象;成像的超高動態(tài)范圍和熒光信號的超高線性度:像的熒光強度計數(shù)需要具有對的的統(tǒng)計學意義證明實驗結(jié)論的正確性,因此圖像的熒光強度值必須能夠精確反映體內(nèi)蛋白、基因濃度的高低,這需要檢測器具有超高的動態(tài)范圍能夠同時記錄強信號和弱信號,并且在此動態(tài)范圍內(nèi)圖像計數(shù)值與真實的熒光信號對的線性變化以正確反映蛋白、基因的濃度。在體光纖成像記錄也缺乏對不同儲存條件的對比評價。徐州腦立體定位光纖記錄原理
在體光纖成像記錄應用:1、在體光纖成像記錄通過光學記錄特定細胞類型在自然狀態(tài)下的神經(jīng)活動;2、實時觀測動物在進行復雜行為時的神經(jīng)投射活動;3、闡明特殊的神經(jīng)環(huán)路在動物行為中的作用;4、通過直接觀測和投射相關的神經(jīng)環(huán)路的動態(tài)活動模式,整機一體化,輕巧便攜,集成信號采集與數(shù)字同步模塊;通道數(shù):默認采樣通道數(shù)7路,可根據(jù)實驗需求訂制擴展;通過熒光信號強度變化可以很好的表征神經(jīng)元的活性,并實時監(jiān)測記錄熒光信號強度的方法即光纖記錄。無錫神經(jīng)元成像光纖網(wǎng)站在體光纖成像記錄就是生物樣本的造影技術。
在體光纖成像記錄的應用,揭示機體的生理病理改變過程,目前, 在體生物光學成像技術己成功應用于 干細胞移植、 壞掉的免疫、 毒血癥、 風濕性關節(jié)炎、 皮炎等發(fā)病機制的研究中, 可以實時監(jiān)測生物機體的生理、病理改變過程, 具有重要的臨床意義。藥物的篩選和評價的應用目前 , 轉(zhuǎn)基因動物模型己大量應用于病理研究、藥物研發(fā)、 藥物篩選和藥物評價等領域。通過體外基因轉(zhuǎn)染或直接注射等手段, 將熒光素酶或綠色熒光蛋 自等報告基因標記在生物體內(nèi)的任何細胞, 如:壞掉的細胞、 造血細胞等上, 采用在體生物光學成像技術對其示蹤, 了解細胞在生物體內(nèi)的轉(zhuǎn)移規(guī)律,不單能夠檢測轉(zhuǎn)基因動物體 內(nèi)的基因表達或 內(nèi)源性基因的活性和功能, 而且能夠?qū)λ幬锖Y選及療效進行評價。
在體光纖成像記錄可見光成像體內(nèi)可見光成像包括生物發(fā)光與熒光兩種技術。生物發(fā)光是用熒光素酶基因標記DNA,利用其產(chǎn)生的蛋白酶與相應底物發(fā)生生化反應產(chǎn)生生物體內(nèi)的光信號;而熒光技術則采用熒光報告基因(GFP、RFP)或熒光染料(包括熒光量子點)等新型納米標記材料進行標記,利用報告基因產(chǎn)生的生物發(fā)光、熒光蛋白質(zhì)或染料產(chǎn)生的熒光就可以形成體內(nèi)的生物光源。前者是動物體內(nèi)的自發(fā)熒光,不需要激發(fā)光源,而后者則需要外界激發(fā)光源的激發(fā)。在體光纖成像記錄不需要掃描器件。
在體光纖成像記錄活細胞成像的安全性,對于被標記細胞的基因表達譜和蛋白質(zhì)組進行分析,可以評估報告基因?qū)毎δ艿母蓴_作用。小動物活的物體成像技術,活的物體動物成像技術的優(yōu)勢,1、實現(xiàn)實時、無創(chuàng)的在體監(jiān)測 2、發(fā)現(xiàn)早期病變,縮短評價周期3、評價更科學,準確、可靠4、獲得更多的評價數(shù)5、降低研發(fā)的風險和開支6、更好的遵守3R原則,在體光學成像技術的應用潛力依賴于光學成像逆向問題算法的新進展.為了解決復雜生物組織中的非勻質(zhì)問題。在體光纖成像記錄為實現(xiàn)成像,需要將光束聚焦成很小的光點。珠海神經(jīng)元光纖成像原理
在體光纖成像記錄可分為基于熒光的方法和基于生物發(fā)光的方法。徐州腦立體定位光纖記錄原理
在體光纖成像記錄的目的是實時檢測細胞的活性變化。基于鈣離子濃度變化的熒光成像技術被較多用來記錄神經(jīng)元活性。在體光纖記錄方法與傳統(tǒng)的在體電生理記錄方法有著不同的特點,光纖記錄因其穩(wěn)定、方便、易上手而應用較多。首先,將熒光蛋白表達在特定類型的神經(jīng)元中,光纖記錄可以實現(xiàn)細胞類型特異性的活性檢測,而用電生理記錄的方法記錄特定類型的神經(jīng)元的活性比較困難。其次,電生理記錄容易受到環(huán)境中的電信號以及動物的行為動作影響,而光纖記錄相對來說有著較強的抗干擾性能。然后,光纖記錄相對穩(wěn)定,可以很容易實現(xiàn)長時程的活性檢測,例如動物的整個學習過程,而利用電生理記錄實現(xiàn)起來則相對困難。較后,光纖記錄用神經(jīng)元群體的熒光強度變化來表征神經(jīng)元整體的活性變化,不能反映單個神經(jīng)元的活性,而電生理記錄則能夠檢測到單個神經(jīng)元的活性,具有更高的空間分辨率。徐州腦立體定位光纖記錄原理