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較為低血清試驗(yàn)的要求。內(nèi)有毒的檢測:內(nèi)有毒的,又叫脂多糖(LPS)或脂寡糖(LOS),存在于革蘭氏陰性菌的細(xì)胞外膜。臨床上,內(nèi)有毒的作為一些革蘭氏陰性菌的診斷提示,如腦膜炎球菌。動(dòng)物體內(nèi),內(nèi)有毒的能夠?qū)е掳l(fā)熱或者誘導(dǎo)炎癥反應(yīng);細(xì)胞培養(yǎng)中,內(nèi)有毒的能夠誘導(dǎo)細(xì)胞反應(yīng)異常。通常,采用鱟阿米巴樣細(xì)胞裂解實(shí)驗(yàn)(LAL檢測)檢測內(nèi)有毒的水平。LAL是從美洲鱟的血液中制備的,對(duì)內(nèi)有毒的非常靈敏,在微量內(nèi)有毒的存在情況下就凝結(jié)。阿米巴樣細(xì)胞相當(dāng)于哺乳動(dòng)物的白細(xì)胞。特異性血清及其加工方式,熱鈍化:胎牛血清的常規(guī)處理方式是熱鈍化,即放在56°水浴30分鐘;其目的是使血清中的補(bǔ)體成分及一些未知的細(xì)胞生長抑制分子失活。與胎牛血清的其它加工方式一樣,熱鈍化處理過程必須小心謹(jǐn)慎,因?yàn)檠逯械纳L因子容易在較高溫度或者較長時(shí)間加熱條件下失活,甚至產(chǎn)生沉淀。血清還含有一些微量元素和離子,他們?cè)诖x醫(yī)治中起重要作用。泰州標(biāo)準(zhǔn)血清廠家
胎牛血清的合規(guī)血源產(chǎn)地對(duì)于細(xì)微差異即可決定成敗的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)來說,選擇來源安全、品質(zhì)優(yōu)良的胎牛血清至關(guān)重要。作為牛肉制品的副產(chǎn)品,胎牛血清的傳統(tǒng)產(chǎn)地包括澳大利亞,新西蘭, 美國, 南美(烏拉圭&巴西)以及歐洲等畜牧業(yè)發(fā)達(dá)的區(qū)域。業(yè)內(nèi)通常會(huì)根據(jù)不同產(chǎn)地的牛情況,將胎牛血清分為特級(jí)胎牛血清以及很好胎牛血清。例如新西蘭全境、澳大利亞及北美的部分區(qū)域從未爆發(fā)過瘋牛?。˙SE)和口蹄疫(FMD),因此這些產(chǎn)地的胎牛血清被定義為特級(jí)胎牛血清;而南美的胎牛血清則被定義為很好胎牛血清。另外,中國國產(chǎn)的胎牛血清在市場上并不多見,這一方面是由于是養(yǎng)殖模式的差異導(dǎo)致的,另一方面也受到過度使用的影響?;窗矘?biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清廠家將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。
血清的保存應(yīng)該注意:需要長期保存的血清必須儲(chǔ)存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時(shí)間切勿超過1個(gè)月,由于血清結(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃至-70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生。切勿直接將血清從-20℃進(jìn)入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。
胎牛顧名思義就是指還在母牛身體里的小牛,所以胎牛血清的采集工作,便是先從懷孕中的母牛身體里取出胎牛(通常5-8個(gè)月胎齡),之后對(duì)未發(fā)育完全的胎牛的心臟穿刺取血,完成的工作以后便再通過一系列的工藝處理獲得胎牛血清。而新生牛血清主要是采集已出生10天內(nèi)的小牛,而且它們的發(fā)育相對(duì)于胎牛而言更加完全。國產(chǎn)血清因?yàn)樵瞎?yīng)等原因,通常會(huì)選8個(gè)月以上,或足月剛出生的小牛取血,把它定義為類胎牛血清。但我們知道這時(shí)血清里的生長因子已經(jīng)完全不同于胚胎發(fā)育時(shí)的生長因子。甚至于現(xiàn)在很多國產(chǎn)廠家已經(jīng)把這類血清完全歸類于胎牛血清,貼上胎牛血清的標(biāo)簽,賣著胎牛價(jià)格,卻只起著新生牛的作用。市場上進(jìn)口胎牛血清較多,真正好的胎牛血清并不多。血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。
除了對(duì)血清進(jìn)行檢測,有何更直觀的方式分辨血清質(zhì)量?目測法,我們可根據(jù)血清的顏色,沉淀,澄清度等進(jìn)行區(qū)分。顏色:顏色根據(jù)血清蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進(jìn)口血清質(zhì)量較為好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色,較差質(zhì)量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅清或保存不當(dāng)?shù)?,由于血紅蛋白的破壞氧化,會(huì)呈現(xiàn)出暗紅色,甚至咖啡色。沉淀:血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生。沉淀產(chǎn)生的原因很多,使用時(shí)反復(fù)凍融會(huì)增加沉淀。進(jìn)口血清過濾分裝前很少反復(fù)凍融,因此成品清澈。澄清度:進(jìn)口血清是由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡。國產(chǎn)血清絕大多數(shù)為新生牛血清,相對(duì)而言更加粘稠,顏色略深。胎牛血清起酸堿度緩沖液作用。南京不含外泌體血清哪家好
血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機(jī)物等。泰州標(biāo)準(zhǔn)血清廠家
血清的保存應(yīng)該注意:血清中的沉淀物、絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,顯微鏡下"小黑點(diǎn)"。經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會(huì)明顯增多。有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點(diǎn)",常誤認(rèn)為血清受污染,一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清。切勿將血清在37℃放置太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中的有效成分會(huì)破壞而影響血清質(zhì)量。泰州標(biāo)準(zhǔn)血清廠家