病毒采樣管由拭子+采樣管+病毒保存液三部分構(gòu)成。病毒保存液包括Hank's液基礎(chǔ)、慶大霉素、、BSA (V)、冷凍保護劑、生物緩沖劑和氨基酸。在Hank's基礎(chǔ)之上,添加4-羥乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)、BSA(牛血清白蛋白第五組分)等病毒穩(wěn)定成分,可在較寬的溫度范圍內(nèi)維持病毒的活性,降低病毒分解速度,提升病毒分離的陽性率。
病毒保存液的質(zhì)量,是提高PCR檢測陽性率與病毒分離陽性率的關(guān)鍵因素,從根本上決定了病毒采樣管的質(zhì)量。添加常溫穩(wěn)定的類,可解決采樣后的霉菌污染問題,實現(xiàn)采樣液的常溫保存。 我們在病毒采樣后并不是都能在樣本采集處進行運輸和保存的因此我們就需要對采集的病毒拭子進行運輸和保留。深圳支原體保存液生產(chǎn)廠家
一次性使用病毒采樣管(滅活型)的特點:
①、操作使用簡單,無需配液,體系內(nèi)含有高效病毒裂解液,采樣后即刻滅活病毒,有效防止二次風(fēng)險,保障運輸及檢測人員安全
②、病毒DNA/RNA可在常溫保存與運輸1周不降解,按大多數(shù)商業(yè)化試劑盒進行提取后,獲得的DNA或者是RNA質(zhì)量好,得率高,可完成各種基因檢測及分析實驗,如PCR或者是qPCR等,同時節(jié)省運輸成本
③、內(nèi)含核酸RNA酶抑制劑,很大程度保護病毒核酸穩(wěn)定不被降解,大幅提高核酸提取效率。適用于、流感病毒、手足口病毒等常見的病毒樣本采集保存運輸工作,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位組織樣本,儲存的樣本可用于后續(xù)的核酸提取或者純化等臨床試驗。 血液保存液品牌企業(yè)對于不同的檢測目的,需要使用不同的病毒保存液,以及不同的病毒檢測實驗條件所以分成了滅活型和非滅活型。
市場上使用的病毒保存液主要有兩種,一種是以運送培養(yǎng)基為基礎(chǔ)改良的病毒維持液,另一種則為核酸提取裂解液改良的保存液。
前者的主要成分是Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)液(MEM)或Hank's平衡鹽,添加了病毒生存所需的鹽類、氨基酸、維生素、葡萄糖以及蛋白質(zhì),這種保存液使用酚紅鈉鹽做為指示劑,溶液pH值在6.6-8.0時溶液呈粉紅色。保存液中添加了必須的葡萄糖、L-谷氨酰胺和蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)的提供形式有胎牛血清或牛血清白蛋白,可以穩(wěn)定病毒的蛋白質(zhì)外殼。由于保存液營養(yǎng)成分豐富,有利于病毒的成活但是也有利于細(xì)菌的生長,如果保存液中污染了細(xì)菌,則會大量繁殖,其代謝產(chǎn)物中的二氧化碳會使保存液pH值下降,從粉紅色變?yōu)辄S色。因而大多數(shù)廠家都在配方中添加了抑菌劑成分,推薦使用的抑菌劑為青霉素、鏈霉素、慶大霉素及多粘菌素B等,不推薦使用疊氮鈉、2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(MCI)和
5-氯-2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮(CMCI)等抑制劑,因為這些組分對PCR反應(yīng)有影響。由于這種保存液提供的樣本基本是活病毒,可以很大程度保持樣本的原始性,后續(xù)不僅可以用于病毒的核酸提取檢測,還能用于病毒的培養(yǎng)和分離。但是用于檢測時應(yīng)該注意的是必須滅活以后再進行核酸提取純化。
非滅活型的病毒采樣管:
除了滅活型的病毒保存液,保存的病毒完整性更好,檢出率更高,出了核酸檢測外還可以用于其他研究。
滅活型病毒保存液則使用上更安全,操作環(huán)境要求也不用那么嚴(yán)格,各有各的優(yōu)勢,目前研究的非滅活病毒保存液的成分主要為Hank’s液基礎(chǔ),在這個基礎(chǔ)上,添加了氯化鉀,氯化鎂和氯化鈣等物質(zhì)為致病菌提供必須的營養(yǎng)離子使之專一性更強、且保存時間更長,更大限度保存致病菌形態(tài)的完整性,提高致病菌提取率。
非滅活型的一次性病毒采樣管的特點:
①、低溫非凍型保存,不破壞病毒的外殼,方便長途運輸。
②、適用于各種拭子樣品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、咽喉拭子等。
③、保存液中添加了氯化鉀、氯化鎂和氯化鈣等物質(zhì)為致病菌提供了必須的營養(yǎng)離子,使病菌專一性更強、且保存時間更長,可以更大限度保存致病菌形態(tài)的完整性,提高致病菌的提取率。
④、保存液中的成分可以有效防止細(xì)菌和污染。 病毒保存液主要適用于****、手足口病毒、流感病毒等常見的病毒樣本采集保存運輸工作。
病毒采樣管是一種通用的采樣產(chǎn)品,可以快速滅活病毒,可以保證檢測人員的風(fēng)險還避免了氣溶膠的風(fēng)險。還可以用于各種病毒樣品、衣原體樣品包括近肆虐全球的原樣品的取樣,可以進行2~8天的短期儲存和運輸,在-70℃或液氮環(huán)境中長期儲存。如果需要長途運輸,建議使用冷鏈運輸,避免采樣管的樣本錯過了檢測的比較好時期。
病毒采樣管用于臨床流感、禽流感、手足口病、麻疹、等病毒標(biāo)本和支原體、解脲支原體、衣原體等標(biāo)本的采集和運輸,可以有效的滅活病毒,避免氣溶膠的風(fēng)險 從采集完樣品到開始檢測,中間可能遇到各種問題,比如異地運輸或郵寄標(biāo)本。深圳衣原體保存液
病毒保存液是一種采樣管內(nèi)浸沒采樣拭子病毒標(biāo)本的一種保護病毒的被檢測物質(zhì)的液體。深圳支原體保存液生產(chǎn)廠家
滅活型病毒保存液的原理:
主要是核酸提取裂解液改良的病毒裂解型保存液,里面添加有高濃度的裂解鹽,能夠迅速高效地使待測樣本利的病毒蛋白裂解失活,可以有效防止操作員二次,同時又含有Rnase酶抑制劑,能保護病毒核酸不被降解,后續(xù)的實驗只要能檢測出病毒的核酸即可以做出診斷。而且能在常溫下保存相對較長的時間,節(jié)省了病毒樣品保存以及運輸?shù)某杀尽?
非滅活型病毒保存液的原理:
它同時保留了病毒的蛋白質(zhì)外殼以及病毒核酸DNA或者RNA,這樣就可以保證病毒樣本核酸在送檢過程中的完整性,雖然操作失誤時會也有一定的性風(fēng)險,但是這種保存液很大程度地保持了病毒樣本的原始性,是一種培養(yǎng)型的病毒運輸介質(zhì),需要注意的是采樣后長時間保存需要保持嚴(yán)格低溫保存。
深圳支原體保存液生產(chǎn)廠家
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