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來源: 發(fā)布時間:2022-05-10

實施例1 以二氧化硅納米顆粒提取土壤尿液DNA。 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有15 ul二氧化硅納米顆粒的離心管中,混勻后靜止15分鐘;8000rpm離心1分鐘去除上清液;加入500 ul漂洗液,混勻,8000rpm離心1分鐘去除上清液;加入500 ul漂洗液,混勻,8000rpm離心1分鐘去除上清液;70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,震蕩混勻,70℃加熱3分鐘;全網(wǎng)優(yōu)惠的土壤DNA提取在哪里購買?江蘇FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取規(guī)格

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實驗的時候,有沒有遇到過實驗結(jié)果不符合預(yù)期的情況,提取DNA的純度過低、濃度達不到預(yù)期或者是出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。***給大家聊一聊一下其他同學遇到的問題,以及MP技術(shù)人員給出的解決方案,希望可以幫到大家,在以后的實驗中順順利利~問題1:土壤樣品含水量過高怎么辦?解決思路:· 如果土壤樣品過濕,可先將樣本10,000 x g,離心30s,盡可能多的去除液體。問題2:DNA產(chǎn)量低怎么辦?解決思路:· 樣本微生物含量低:【1】增加樣本量【2】青浦區(qū)FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取哪家優(yōu)惠土壤DNA提取上海授權(quán)代理商。

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12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,

8000rpm離心1分鐘,上清DNA溶液轉(zhuǎn)移至新的離心管中。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例2 以硅膠膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有硅膠膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉(zhuǎn)移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)土壤DNA提取保證正規(guī)產(chǎn)品——益啟生物公司。

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DNA Spin Kit,按照植物DNA提取protocol進行。FastDNA Spin Kit(11**40**0)。艱難樣本:植物組織或堅硬、有韌性的樣本組織,采用介質(zhì)A。介質(zhì)A中含有石榴石和氧化鋯珠,能夠有效的破碎植物組織,釋放微生物。去雜提純:植物中含葉綠素、多糖、多酚等抑制物,試劑盒中即有針對植物樣本DNA提取而設(shè)計的裂解液CLS-VF及雜質(zhì)去除劑PPS及漂洗液,能夠很好的去除影響DNA純化及下游實驗的抑制劑。解決方案2:當作微生物樣本看待,選擇SPINeasy D上海關(guān)于土壤DNA提取的哪家靠譜?浙江土壤微生物土壤DNA提取報價

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.53+0.03;1.09+0.03、1.51+0.05;1.37士0.03、1.43+0.03;0.81+0.02。提取不同土壤基因組DNA結(jié)果,有機營養(yǎng)土上樣3μL其余土壤上樣8μL;M: 1kb plus DNA ladder,Lane 1-4:自動化提取;Lane5-8:手工提?。籐ane 1&5: 100mg有機營養(yǎng)土;Lane 2&6: 100mg花壇土;Lane 3&7: 250mg鹽堿土;Lane 4&8: 250mg沙漠土。提取不同類型土壤DNA進行PCR及酶切結(jié)果。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1:有機營養(yǎng)土;Lane 2:花壇土;Lane 3:鹽堿土;Lane 4江蘇FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取規(guī)格