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94℃，20 秒，59℃，3分鐘，30個(gè)循環(huán)；60℃，10分鐘；4℃保存；電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行；電泳上樣體系為，1 μl PCR產(chǎn)物，9 μl甲酰胺，其中已加Liz。 實(shí)施例5 以二氧化硅包裹的磁性納米顆粒提取土壤尿液DNA 1）DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤，烘干，取100-200 mg土壤樣品，加入樣品管中，然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k，震蕩混勻后，75℃加熱裂解15分鐘；最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中，加入800 ul結(jié)合液，混勻；混合液轉(zhuǎn)移至裝有15 ul二氧化硅包裹的磁性納米顆粒的離心管中，混勻后靜止15分鐘；上磁力架吸附2分鐘，吸棄上清液；加入500 ul漂洗液，混勻，上磁力架吸附1分鐘，吸棄上清；

實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，有沒有遇到過實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合預(yù)期的情況，提取DNA的純度過低、濃度達(dá)不到預(yù)期或者是出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。***給大家聊一聊一下其他同學(xué)遇到的問題，以及MP技術(shù)人員給出的解決方案，希望可以幫到大家，在以后的實(shí)驗(yàn)中順順利利~問題1：土壤樣品含水量過高怎么辦？解決思路：· 如果土壤樣品過濕，可先將樣本10，000 x g，離心30s，盡可能多的去除液體。問題2：DNA產(chǎn)量低怎么辦？解決思路：· 樣本微生物含量低：【1】增加樣本量【2】買土壤DNA提取哪家專業(yè)？

樣本，5-6m/s，研磨20-40s，難裂解樣本研磨2個(gè)循環(huán)，增加研磨力度，提取按土壤試劑盒提取protocol進(jìn)行。·較軟的樣本，仍然可以采用介質(zhì)E，提高裂解的劇烈程度，增加研磨速度和時(shí)間，增加研磨次數(shù)。不僅如此，我們還有文獻(xiàn)支持。參考文獻(xiàn)1：·樣本類型：葡萄枝·樣本粉碎：使用液氮和攪拌機(jī)將植物材料在無菌鋼瓶中粉碎。·樣本裂解：FastPrep-24TM 5G，介質(zhì)E裂解?！颖綝NA提取：FastDNA Spin Kit for Soil提取?！は掠螌?shí)驗(yàn)：細(xì)菌16S rD上海益啟生物家賣的土壤DNA提取包售后嗎？嘉定區(qū)土壤微生物DNA土壤DNA提取哪家好

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NA基因擴(kuò)增子測序及分析，研究菌群分布。參考文獻(xiàn)2：·樣本類型：***種子?！颖痉鬯椋好抗?0粒種子，電動組織研磨器配合研磨杵，研磨5min。·樣本DNA提?。篎astDNA Spin Kit for Soil提取?！は掠螌?shí)驗(yàn)：細(xì)菌16S rDNA基因擴(kuò)增子測序及分析，研究菌群分布。 相關(guān)文獻(xiàn)：1.Campisano A ，Antonielli L ， Pancher M ， et al. Bacterial Endophytic Communities in theGrapevine Depend on Pest Management【J】. Plos One， 2014， 9.2.Chen X ， Krug L ，Yang H ， et a楊浦區(qū)土壤微生物土壤DNA提取聯(lián)系人