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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-01-22

NA基因擴(kuò)增子測(cè)序及分析,研究菌群分布。參考文獻(xiàn)2:·樣本類(lèi)型:***種子。·樣本粉碎:每管20粒種子,電動(dòng)組織研磨器配合研磨杵,研磨5min?!颖綝NA提取:FastDNA Spin Kit for Soil提取。·下游實(shí)驗(yàn):細(xì)菌16S rDNA基因擴(kuò)增子測(cè)序及分析,研究菌群分布。 相關(guān)文獻(xiàn):1.Campisano A ,Antonielli L , Pancher M , et al. Bacterial Endophytic Communities in theGrapevine Depend on Pest Management【J】. Plos One, 2014, 9.2.Chen X , Krug L ,Yang H , et a上海益啟生物的土壤DNA提取價(jià)格大概多少?奉賢區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取聯(lián)系人

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PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃,11分鐘;94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個(gè)循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實(shí)施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘,將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中,加入800 ul結(jié)合液,混勻;混合液轉(zhuǎn)移至裝有玻璃纖維的離心柱中,上海土壤微生物DNA土壤DNA提取代理商上海益啟生物公司的土壤DNA提取附帶使用說(shuō)明書(shū)嗎?

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。如果樣品中的目的微生物含有比較厚的細(xì)胞壁,可能需要額外的破碎裂解。問(wèn)題4:洗脫的DNA顏色為黃色或棕色怎么辦?解決思路:·腐殖酸含量高【1】在洗滌步驟之前,可先用4.5M-5.5M的異硫氰酸胍溶液洗滌1-2次?!?】減少樣本用量。問(wèn)題5:A260/A280比值偏低怎么辦?解決思路:·蛋白去除不干凈:增加蛋白沉淀離心的次數(shù)?!は礈觳桓蓛簦涸黾酉礈齑螖?shù)。問(wèn)題6:A260/A280比值高怎么辦?解決思路:·RNA含量高,可在洗脫之后的溶液中加

樣本,5-6m/s,研磨20-40s,難裂解樣本研磨2個(gè)循環(huán),增加研磨力度,提取按土壤試劑盒提取protocol進(jìn)行?!ぽ^軟的樣本,仍然可以采用介質(zhì)E,提高裂解的劇烈程度,增加研磨速度和時(shí)間,增加研磨次數(shù)。不僅如此,我們還有文獻(xiàn)支持。參考文獻(xiàn)1:·樣本類(lèi)型:葡萄枝·樣本粉碎:使用液氮和攪拌機(jī)將植物材料在無(wú)菌鋼瓶中粉碎?!颖玖呀猓篎astPrep-24TM 5G,介質(zhì)E裂解。·樣本DNA提?。篎astDNA Spin Kit for Soil提取?!は掠螌?shí)驗(yàn):細(xì)菌16S rD土壤DNA提取哪家靠譜?

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.53+0.03;1.09+0.03、1.51+0.05;1.37士0.03、1.43+0.03;0.81+0.02。提取不同土壤基因組DNA結(jié)果,有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土上樣3μL其余土壤上樣8μL;M: 1kb plus DNA ladder,Lane 1-4:自動(dòng)化提??;Lane5-8:手工提?。籐ane 1&5: 100mg有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土;Lane 2&6: 100mg花壇土;Lane 3&7: 250mg鹽堿土;Lane 4&8: 250mg沙漠土。提取不同類(lèi)型土壤DNA進(jìn)行PCR及酶切結(jié)果。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1:有機(jī)營(yíng)養(yǎng)土;Lane 2:花壇土;Lane 3:鹽堿土;Lane 4上海益啟生物的聯(lián)系電話。閔行區(qū)FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取

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與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明技術(shù)克服了樣品土壤來(lái)源的二氧化硅對(duì)DNA的吸附,從而減少了不必要的DNA損失,可達(dá)到獲取高質(zhì)量、高產(chǎn)量土壤尿液DNA目的。 附圖說(shuō)明 圖1是本發(fā)明實(shí)施例1中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 圖2是本發(fā)明實(shí)施例2中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 圖3是本發(fā)明實(shí)施例3中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 圖4是本發(fā)明實(shí)施例4中提取的DNA的復(fù)合STR擴(kuò)增圖譜。 具體實(shí)施方式 下面將結(jié)合本發(fā)明的附圖,對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述。奉賢區(qū)土壤基因組DNA提取土壤DNA提取聯(lián)系人

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