取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻;混合液轉移至裝有石英膜的離心柱中,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,加入500 ul漂洗液,12000rpm離心1分鐘;倒棄收集管中廢液,12000rpm離心3分鐘,將離心柱轉移至新的離心管中,70℃加熱3分鐘;加入20 ul洗脫液,70℃加熱3分鐘;12000rpm離心1分鐘,丟棄離心柱,離心管中液體即為DNA溶液。 2)PCR擴增及電泳 PCR擴增使用Identifiler Plus試劑盒,10 μl擴增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,擴增程序為,95℃,11分鐘;上海益啟訂購土壤DNA提取的服務電話是多少?上海土壤DNA提取試劑盒土壤DNA提取聯(lián)系電話
土壤樣品總DNA,經(jīng)1.2%瓊脂糖凝膠電泳(0.5×TAE)結果如下:1. 西紅柿栽盆 2. 淤泥3. 沙土 4. 松樹下 5. 棕櫚樹下 6. 花園7. 尼羅河百合花栽盆 8. 草坪 9. 檸檬樹下 10. 鱷梨樹。產(chǎn)品詳情:產(chǎn)品名稱:FastDNA? SPIN土壤試劑盒。規(guī)格:50次。貨號:11***02*0。訂購:立即訂購。新品|吃土青年,你們心心念念的柱膜法土壤基因組DNA提取試劑盒上市啦!編者語:土壤是環(huán)境樣本中**常見的類型,土壤樣本種類眾多,含有豐富的微生物,但這些微生物會與土壤浦東新區(qū)FastDNA Spin Kit土壤DNA提取代理價格土壤DNA提取保證正規(guī)產(chǎn)品——益啟生物公司。
94℃,20 秒,59℃,3分鐘,30個循環(huán);60℃,10分鐘;4℃保存;電泳在ABI 3500XL儀器中進行;電泳上樣體系為,1 μl PCR產(chǎn)物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 實施例5 以二氧化硅包裹的磁性納米顆粒提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤,烘干,取100-200 mg土壤樣品,加入樣品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震蕩混勻后,75℃加熱裂解15分鐘;最大轉速離心5分鐘,將上清液轉移至新的樣品管中,加入800 ul結合液,混勻;混合液轉移至裝有15 ul二氧化硅包裹的磁性納米顆粒的離心管中,混勻后靜止15分鐘;上磁力架吸附2分鐘,吸棄上清液;加入500 ul漂洗液,混勻,上磁力架吸附1分鐘,吸棄上清;
。如果樣品中的目的微生物含有比較厚的細胞壁,可能需要額外的破碎裂解。問題4:洗脫的DNA顏色為黃色或棕色怎么辦?解決思路:·腐殖酸含量高【1】在洗滌步驟之前,可先用4.5M-5.5M的異硫氰酸胍溶液洗滌1-2次。【2】減少樣本用量。問題5:A260/A280比值偏低怎么辦?解決思路:·蛋白去除不干凈:增加蛋白沉淀離心的次數(shù)?!は礈觳桓蓛簦涸黾酉礈齑螖?shù)。問題6:A260/A280比值高怎么辦?解決思路:·RNA含量高,可在洗脫之后的溶液中加上海益啟生物的土壤DNA提取詢價公司電話。
:沙漠土;Lane 5:陰性對照。圖:提取不同土壤基因組DNA PCR擴增結果。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1/3/5/7: 酶切前;Lane 2/4/6/8: 酶切后;Lane 1&2:有機營養(yǎng)士;Lane 3&4:花壇土;Lane 5&6:鹽堿土;Lane 78&8:沙漠土。圖:提取不同土壤基因組DNA用Apa I酶切結果。PART.03。選擇MP試劑盒的理由。MagBeads FastDNATM Kit for Soil:A260/A280更接近1.8, A260/A230更高, 提取純度高于平均水平,提取效果穩(wěn)定。DNA收率效果對比—濃度更高上海益啟生物公司土壤DNA提取的優(yōu)勢。浦東新區(qū)土壤DNA提取咨詢報價
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(c)漂洗液,所述漂洗液為70-80%乙醇; (d)洗脫液,其組分為:10 mmol/L Tris-HCl,0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉,pH 8.0; (e)硅基DNA吸附材料,所述硅基DNA吸附材料為二氧化硅納米顆粒、硅膠膜、玻璃纖維膜、石英膜、二氧化硅包裹的磁性納米顆粒中的任意一種。 使用本發(fā)明的試劑盒,用以提取土壤尿液DNA的方法,包括以下步驟: 1)DNA提取 用土壤裂解液和蛋白酶K裂解含有尿液的土壤樣品,離心分離土壤和上清液,上清液加入結合液,混合后加入硅基DNA吸附材料,分離硅基DNA吸附材料和液體,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脫DNA;具體包括以下步驟: a.刮取含有尿液的表層土壤,烘干,上海土壤DNA提取試劑盒土壤DNA提取聯(lián)系電話